Opsomming van mikrobiologiese toetsvereistes
2024-01-24 15:14:33
Die vereistes en stappe virmikrobiologiese toetsingis soos volg:
Aseptiese operasie vereistes:
1. Jy moet werksklere en 'n werkpet dra wanneer jy bakterieë inent.
2. Wanneer voedselmonsters ingeënt word, moet spesiale werksklere, pette en pantoffels gedra word, wat in die bufferkamer van die steriele kamer geplaas moet word en na UV-ontsmetting voor werk gebruik moet word.
3. Wanneer voedselmonsters ingeënt word, was jou hande met seep voordat jy die steriele kamer binnegaan, en vee dan jou hande skoon met 'n 75% alkohol wattebal.
4. Die strooitjies, plat skottelgoed en kultuurmedia wat vir inenting gebruik word, moet gesteriliseer en gesteriliseer word. Ongebruikte houers moet nie ongebruik gelaat word nadat die pakkie oopgemaak is nie. Metaalgereedskap moet voor gebruik drie keer met 95% alkohol geoutoklaveer of verbrand word.
5. Wanneer die strooitjie uit die verpakking haal, moet die punt van die strooitjie nie aan die blootgestelde dele raak nie. Wanneer die strooitjie gebruik word om die proefbuis of die plaat te ent, moet die punt van die strooitjie nie aan die rand van die proefbuis of die plaat raak nie.
6. Die inenting van monsters en die oordrag van bakterieë moet voor 'n alkohollamp gedoen word. Wanneer bakterieë of monsters ingeënt word, moet die strooi deur vlam gesteriliseer word nadat dit uit die verpakking gehaal en die proefbuisprop oopgemaak is.
7. Voordat bakterieë ingeënt word, moet alle metaaldrade van die entlus en naald met 'n vlam verbrand word, en indien nodig moet die verbinding tussen die lus, naald en staaf verbrand word. Die entlus vir die inenting van tuberkulose-bakterieë en virulente bakterieë moet vir 5 minute in kookwater gekook word en dan deur vlam verbrand word.
8. Wanneer jy bakteriële vloeistof of monsters met 'n strooi suig, gebruik die ooreenstemmende rubberpunt om dit te suig, en moenie dit direk met jou mond suig nie.
Steriele kamer gebruik vereistes:
1. Die vensters wat na die buitekant van die steriele kamer lei, moet dubbelglas en verseël wees. Hulle moet nie na willekeur oopgemaak word nie. Daar moet 'n bufferkamer en skuifdeur wees wat ooreenstem met die grootte van die steriele kamer. Daar moet ook 'n klein venster van 0,5~0,7m2 wees. Ter voorbereiding vir die verbygaan van items nadat u die steriele kamer binnegegaan het.
2. Die steriele kamer moet skoon gehou word. Na werk moet dit ontsmet word met 2% tot 3% kresol seepoplossing, die werkoppervlak moet afgevee word en items wat nie met die eksperiment verband hou nie, moet nie gestoor word nie.
3. Die deur van die steriele kamer moet styf toegemaak word voor en na gebruik, en die ultravioletlamp moet aangeskakel word. As 'n binnenshuise opgeskorte ultravioletlamp vir ontsmetting gebruik word, word 'n 30W ultravioletlamp benodig. Die afstand is 1.0m, en die bestralingstyd is nie minder nie as 30 minute. Wanneer ultravioletlampe gebruik word, moet aandag gegee word aan Werk direk onder ultraviolet lig om skade te voorkom. Die lamp moet elke twee weke liggies met 'n alkohol katoenbal afgevee word om stof en vet te verwyder om die impak van ultravioletpenetrasie te verminder.
4. Wanneer voedselmonsters verwerk en ingeënt word, gaan die steriele kamer binne vir operasie en word nie toegelaat om na goeddunke in of uit te gaan nie. As items deurgegee moet word, kan dit deur die klein venstertjie gestuur word.
5. Indien lugversorging in die steriele kamer geïnstalleer moet word, moet daar 'n filtertoestel wees.
Vereistes vir ontsmetting en sterilisasie
Glasware, metaalgereedskap en kultuurmedia gebruik virmikrobiologiese toetsing, gekontamineerde en geïnokuleerde kulture, ens. moet voor gebruik gesteriliseer word. Droë hitte en klam hitte druk stoom sterilisasie metodes.
1. Voorbereiding voor sterilisasie
(1) Alle items wat gesteriliseer moet word, moet eers gewas en gedroog word. Glasware soos strooitjies en plat skottelgoed moet styf met papier gepak word. As metaalbuise gebruik word, moet die ventilasiegate daarop oopgemaak word.
(2) Draai die prop van die driehoekige fles wat die kweekmedium bevat in papier toe, bedek die proefbuis en trek die kern van die spuit uit en draai dit toe met gaas.
2. installeer
(1) Droë hitte steriliseerder: Die items moet nie oorvol wees nie en kan nie aan die vier mure van die boks raak nie.
(2) Groot hoëdruk stoomkoker: Plaas gesteriliseerde items, draai dit apart toe en sit dit direk in die sterilisasiesilinder. Moenie die items oorvol maak nie.
3. Toerustinginspeksie
(1) Kyk of die deurskakelaar buigsaam is, of die rubberring beskadig is en of dit plat is.
(2) Kontroleer of die drukmeter op die nul-posisie bly wanneer die stoom uitgeput is, maak die deur en deksel toe, ventileer stoom of hitte, en let op of daar luglekkasie is, of die toestande wat deur die drukmeter en die termometer gemerk word ooreenstem, en of die pyplyn geblokkeer is.
(3) Vir steriliseerders met outomatiese elektroniese programbeheertoestelle, moet die gespesifiseerde program voor gebruik nagegaan word om te sien of dit aan die vereistes vir sterilisasie voldoen.
4. Sterilisasiebehandeling
(1) Droë hitte sterilisasie metode:
Hierdie metode is geskik vir items wat nie onder droë hittetoestande beskadig, agteruitgaan of verdamp nie. Dit word meer algemeen gebruik vir die sterilisering van glasware, metaalprodukte, keramiekprodukte, ens.
①Instrumente en toebehore moet gewas word voor droog-bak om te verhoed dat die vuiligheid wat aan die oppervlak geheg is, verkool word.
② Tydens sterilisasie moet die items nie oorvol wees nie, moenie direk met die onderkant en muur van die boks in aanraking kom nie, en laat gapings tussen items.
③ Tydens sterilisasie, maak die deur styf toe, koppel die kragtoevoer aan, maak die uitlaatgat vir ongeveer 30 minute oop om die koue lug in die steriliseerder te verwyder, pas die aanwyserlig aan wanneer die temperatuur tot 160°C styg, en hou dit vir 1,5 tot 2 uur in stand.
④Nadat sterilisasie voltooi is of tydens die temperatuurverhogingsproses, moet die deur onder 60°C oopgemaak word.
(2) Die volgende stappe moet gevolg word wanneer 'n draagbare drukkoker of vertikale drukstoomsterilisator gebruik word:
① Voeg 3L water by die hoofliggaam van die draagbare drukkoker, en 16L water by die vertikale drukkoker (die hoeveelheid water moet aangevul word wanneer dit hergebruik word, en die water moet vervang word as dit troebel word);
② Vir 'n draagbare drukkoker, steek die uitlaatpyp op die boonste deksel in die vierkantige buis op die binnewand van die sterilisasievat (steriliseerders sonder slange of dié met geroeste en gekraakte slange mag nie gebruik word nie);
③ Bedek die boonste deksel en maak dit styf vas om luglekkasie te voorkom; plaas die steriliseerder op die vuurbron om te verhit, skakel die krag van die vertikale drukkoker aan en maak die uitlaatklep op die boonste deksel oop om die lug uit te laat (uitlaat lug vir 10 tot 15 minute nadat die water kook) );
④ Maak die uitlaatklep toe om die stoomdruk tot die gespesifiseerde vereistes te verhoog en dit vir die gespesifiseerde tyd in stand te hou (afhangende van die aard van die gesteriliseerde items en relevante omstandighede);
⑤ Nadat die gespesifiseerde tyd bereik is, vir items wat gedroog moet word, maak onmiddellik die uitlaatklep oop om die stoom af te voer. Wanneer die druk na nul terugkeer, koel dit natuurlik af tot 60°C en maak dan die deksel oop om die items uit te haal. As dit 'n vloeibare item is, moenie die uitlaatklep oopmaak nie. Die pot moet onmiddellik van die hittebron verwyder word en toegelaat word om natuurlik af te koel totdat die druk na nul terugkeer en die temperatuur onder 60°C daal voordat die deksel oopgemaak word om die inhoud uit te haal om die skielike dekompressie van die vloeistof as gevolg van heftige kook of ontploffing van die houer te voorkom.
(3) Volg die volgende stappe om die horisontale drukkoker-stoomsterilisator te gebruik:
① Maak die potdeur styf toe, maak die luginlaatklep oop, voer stoom in die mezzanine in vir voorverhitting, en die koue lug in die mezzanine sal outomaties deur die lugversperring ontslaan word;
②Nadat die tussenlaag die voorafbepaalde temperatuur bereik het, maak die luginlaatklep van die potkamer oop, voer die stoom in die potkamer in, en die koue lug in die potkamer sal outomaties deur die potkamer-lugvanger ontslaan word;
③Wanneer die druk en temperatuur in die potkamer die gespesifiseerde druk bereik, pas die luginlaatklep aan om dit konstant te hou;
④ Verkoel die temperatuur natuurlik of kunsmatig tot 60 ℃ voordat die deur oopgemaak word om die items uit te haal. Moenie die vinnige stoomontladingsmetode gebruik om skielike drukval, hewige kook van die vloeistof of ontploffing van die houer te voorkom nie;
⑤ Wanneer 'n outomatiese program-beheerde druk stoomsterilisator gebruik word, nadat die items geplaas is en die deur styf toegemaak is, moet die ooreenstemmende skakelaar gedruk word volgens die kategorie van die items sodat die sterilisasie outomaties volgens die vereiste prosedures uitgevoer kan word. Tydens sterilisasie moet die aangehegte instrument gebruik word om die temperatuur en tyd aan te teken. Vir toekomstige verwysing moet die bedryfsvereistes streng in ooreenstemming wees met die vervaardiger se instruksies;
5. Sterilisasie temperatuur en tyd
(1) Sterilisasietemperatuur van droë hitte-sterilisator is 160 ℃, 1,5 ~ 2 uur.
(2) Sterilisasie temperatuur en tyd van druk stoom steriliseerder
Intermitterende sterilisasie metode
1. Sterilisasiemetode:
Gebruik stoomsterilisasie sonder druk. Sommige stowwe word maklik vernietig deur hoëdruk stoomsterilisasie, so hierdie metode kan vir sterilisasie gebruik word.
(1) Plaas die items wat gesteriliseer moet word in die pot, bedek die boonste deksel, maak die dreinuitlaat oop en dreineer die oorblywende water in die pot.
(2) Maak die dreinuitlaat toe, maak die luginlaatdeur oop en ontsmet vir 10 tot 20 minute soos nodig.
(3) Nadat sterilisasie voltooi is, maak die luginlaatdeur toe, haal die items uit en wag om af te koel tot kamertemperatuur, sit dit oornag in 'n 37°C broeikas, en gaan voort om volgens die bogenoemde metode die volgende dag te steriliseer. Doen dit drie keer om die doel van sterilisasie te bereik.
2. Hoe om die serumkoagulator te gebruik:
Wanneer die kweekmedium spesiale bestanddele soos serum of eiers bevat, sal hoë hitte sy voedingstowwe vernietig. Daarom kan lae temperatuur gebruik word om die serum te koaguleer en sterilisasiedoeleindes te bereik:
(1) Wanneer serum gebruik word wat deur hierdie metode gesteriliseer is om in te deel, moet aseptiese bewerkings streng gevolg word, en proefbuise en plate moet ook gesteriliseer word voor gebruik;
(2) Maak die kultuurmedium in 'n helling of hoë laag soos benodig. Nadat jy genoeg water bygevoeg het, koppel die kragtoevoer aan, verhoog die temperatuur vir een uur tot 75~90°C en steriliseer dit dan. Plaas dit oornag in 'n 37°C broeikas, en steriliseer dit dan drie keer.
3. Kook en ontsmet:
Jy kan 'n kookpot of kooksterilisator gebruik. Nadat die water gekook het, kook dit vir 5 tot 15 minute. Jy kan ook 2% karbolsuur by die water voeg en dit vir 5 minute kook. Voeg 0,02% formaldehied by en kook dit by 80°C vir 60 minute om die doel van sterilisasie te bereik. Kokende sterilisasie kan egter bereik word. Wanneer versterkers gebruik word, moet aandag gegee word aan die korrosiwiteit van items.
4. Sterilisasie behandeling:
Na sterilisasie is items onder normale omstandighede reeds steriel. Hulle moet noukeurig geïnspekteer en geplaas word wanneer dit uit die steriliseerder gehaal word om herbesmetting te vermy;
(1) Haal die items uit en kontroleer onmiddellik die integriteit van die verpakking. As daar skade is of die tampon verwyder word, kan dit nie as steriele items gebruik word nie;
(2) Die items wat uitgehaal word, kan nie as steriele items gebruik word as hul verpakking ooglopend in water geweek is nie;
(3) Die kweekmedium of reagense moet nagegaan word om te sien of hulle aan die kleur of toestand na sterilisasie voldoen. Diegene wat nie aan die vereistes voldoen nie, moet weggegooi word;
(4) Vir oop-toe houers moet die sifgate toegemaak word wanneer dit uitgehaal word;
(5) Indien die verwyderde items op die grond val, op 'n onrein plek misplaas word, of met water bevlek word, word dit as besmet beskou en kan dit nie as steriele items gebruik word nie;
(6) Die gekwalifiseerde gesteriliseerde items wat uitgeneem word, moet in die stoorkamer of stofdigte kas gestoor word, en dit is streng verbode om dit met ongesteriliseerde items te meng;
(7) Alle gekwalifiseerde items moet met die sterilisasiedatum en vervaldatum gemerk word;
(8) Nadat elke groep sterilisasieverwerking voltooi is, teken die naam, hoeveelheid, temperatuur, tyd en operateur van die gesteriliseerde produkte aan.
Vereistes vir die behandeling van giftige en bakteriële afval
Eksperimentele toerusting en kulture wat in mikrobiologiese eksperimente gebruik word, moet nie sonder ontsmetting uit die laboratorium gehaal word nie.
1. Gekweekte besmette materiaal en afval moet in digte houers of draadmandjies geplaas word en sentraal op aangewese plekke gestoor word totdat dit eenvormig geoutoklaveer is.
2. Kulture wat deur mikroörganismes besmet is, moet vir 30 minute by 121°C geoutoklaveer word.
3. Na gebruik moet die gekontamineerde strooitjies in 5% kreolseepoplossing of karbolsuuroplossing geplaas word, vir ten minste 24 uur geweek word (die ontsmettingsvloeistof moet nie laer as die weekhoogte wees nie), en dan gesteriliseer word deur hoë druk by 121°C vir 30 minute.
4. Die vloeistof vir vlekke en spoelsmere kan oor die algemeen direk in die riool gespoel word. Die spoelvloeistof vir virulente bakterieë moet in 'n beker gespoel en met hoë druk gesteriliseer word voordat dit in die riool gegooi word. Die gekleurde skyfies word in 5% kresol seepoplossing gesit. Nadat dit 24 uur lank in water geweek is, kook en was. Die skyfies of skottelgoed wat vir agglutinasietoetsing gebruik word, moet geoutoklaveer word en dan gewas word.
5. Nadat die kultuur gebreek is, spuit en week die gekontamineerde dele dadelik met 5% kresol seepoplossing of karbolsuuroplossing, week vir 'n halfuur en vee dan skoon.
Besoedelde werksklere of werksklere, pette, maskers, ens. wat vir gewelddadige toetse gedra word, moet in spesiale ontsmettingssakke geplaas word en met hoë druk gesteriliseer word voordat dit gewas word.
Medium voorbereidingsvereistes
Die kwaliteit van kweekmediumvoorbereiding sal die groei van mikroörganismes direk beïnvloed, omdat verskeie mikroörganismes verskillende voedingsbehoeftes en verskillende kweekdoeleindes het. Die voorbereidingsvereistes vir verskeie kultuurmedia is soos volg:
1. Weeg die bestanddele volgens die medium formule, en los dit dan op in gedistilleerde water. Die kwaliteit van die toegepaste reagense en middels moet voor gebruik nagegaan word.
2. pH-meting en -aanpassing: pH-meting moet uitgevoer word wanneer die kweekmedium tot kamertemperatuur afgekoel is, want daar is 'n sekere verskil in pH onder warm of koue toestande. Wanneer die meting voltooi is, voeg alkali of suur volgens die berekende hoeveelheid by en meng goed. Moet weer getoets word. Die pH-waarde van die kweekmedium moet akkuraat wees, anders sal dit die groei van mikroörganismes beïnvloed of die waarneming van resultate beïnvloed. Daar moet egter kennis geneem word dat hoëdruksterilisasie die afname of verhoging van die pH van sommige kultuurmedia kan beïnvloed, dus is dit nie raadsaam om teen te hoë druk of te veel kere te steriliseer nie om te verhoed dat die kwaliteit van die kultuurmedium beïnvloed word. Aanwysers, natriumdeoksicholaat, agar, ens. Voeg dit gewoonlik by nadat die pH aangepas is.
3. Die kweekmedium moet skoon gehou word om waarneming van bakteriese groei te vergemaklik. Nadat die kultuurmedium verhit en gekook is, kan dit met absorberende katoen of flennie gefiltreer word om sediment te verwyder. Indien nodig, kan dit met eierwit verhelder word. Die agarstroke wat gebruik word, moet vooraf gewas en gedroog word. Voor gebruik, vermy om die deursigtigheid te beïnvloed as gevolg van onsuiwerhede in die agar.
4. Yster, koper en ander houers moet nie gebruik word om die kweekmedium te hou nie. Dit is beter om skoon neutrale hardeglashouers te gebruik.
5. Die sterilisasie van die kweekmedium moet nie net die doel van volledige sterilisasie bereik nie, maar moet ook daarop let om nie die voedingswaarde daarvan te verminder as gevolg van verhitting nie. Oor die algemeen is 121°C vir 15 minute voldoende. Vir kweekmedia wat stowwe bevat wat hoë hitte onverdraagsaam is, soos suikers en serum, moet gelatien, ens., gesteriliseer word deur lae temperatuur of intermitterende metode. Sommige reagense wat nie verhit kan word nie, soos kaliumtelluriet, eiergeel, TTC, antibiotika, ens., moet afgekoel word tot ongeveer 50°C nadat die basiese agar geoutoklaveer is en dan bygevoeg word;
6. Nadat elke bondel kweekmedia voorberei is, moet 'n steriele groeitoets en 'n groeitoets van die getoetsde stamme uitgevoer word. As dit 'n biochemiese kultuurmedium is, gebruik standaard bakteriële stamme vir inenting en kultuur, en let op die resultate van die biochemiese reaksie. Dit moet 'n normale reaksie toon. Die kweekmedium moet nie te lank gestoor word nie. Indien nodig, kan dit in 'n 4°C yskas gebêre word.
7. Tans is daar baie soorte droë kultuurmedia. Elke bondel moet standaard stamme gebruik vir groeitoets of biochemiese reaksie waarneming. Verskeie kultuurmedia kan slegs gebruik word nadat die groeitoets van die ooreenstemmende stamme goed is. Nuut gekoopte of gedroogde wat lank gestoor is, kan gebruik word. Die pH van die kweekmedium moet ook gemeet word wanneer dit voorberei word, en die dosis en metode moet volgens die produkinstruksies gevolg word.
8. Die chemiese reagense, sterilisasietoestande, stamgroeitoetsresultate en produksiepersoneel wat in elke bondel voorbereide kultuurmedia gebruik word, moet aangeteken word vir navraag.
Vereistes vir monsterversameling en verwerking
1. Die inspeksiemonsters wat ingesamel word, moet verteenwoordigend wees. Tydens monsterneming moet die grondstowwe, verwerking, vervoer, bergingsmetodes en toestande van die bondel voedsel, die omliggende omgewingsgesondheidstoestande, ens. in detail ondersoek word om te kyk of daar enige bronne van kontaminasie is.
2. Volgens die tipe en hoeveelheid voedsel moet die monsternemingshoeveelheid en -metode uitgevoer word in ooreenstemming met die vereistes van standaardinspeksiemetodes.
3. Gee aandag aan aseptiese werking tydens monsterneming, en die houer moet gesteriliseer word om mikrobiese kontaminasie in die omgewing te vermy. Die houer moet nie gesteriliseer word met kreosale seepoplossing, sterilisasie met chloormetionien, alkohol en ander ontsmettingsmiddels nie, en dit moet nie sulke ontsmettingsmiddels of antibiotika bevat nie. Om te verhoed dat mikroörganismes in die monster doodgemaak word, moet die skêre, messe en lepels wat gebruik word ook voor gebruik gesteriliseer word.
4. Monsters moet onmiddellik na afhaal na die inspeksiekamer gestuur word vir inspeksie. Die inspeksieproses duur gewoonlik nie 3 uur nie. As die afstand lank is, kan dit in 'n omgewing van 1 ~ 5 ℃ gestoor word. As dit gevries moet word, moet dit in 'n gevriesde toestand gehou word. Dien in vir inspeksie.
5. Nadat die monster ontvang is, sal die inspeksiekamer dit registreer (monsternaam, eenheid vir inspeksie, hoeveelheid, datum, nommer, ens.) en die voorkoms van die monster waarneem. Indien enige van die volgende toestande gevind word, kan die inspeksie geweier word:
(1) Monsters wat deur spesiale hoëdruk-, kook- of ander metodes gesteriliseer is, sal hul betekenis verloor om die oorspronklike voedsel voor te stel;
(2) Bottels en sakke kos is oopgemaak, gaar vleis en sy produkte, gaar pluimvee en ander kosse is gebreek en onvolledig, dit wil sê die oorspronklike voedselvorm het verlore gegaan (behalwe vir voedselvergiftigingsmonsters);
(3) Die monsternemingshoeveelheid is onvoldoende soos vereis;
Vir monsters wat vir inspeksie ingedien is wat aan die vereistes voldoen, moet die inspeksiekamer onmiddellik inspeksie doen nadat dit ontvang is. As daar nie aan die voorwaardes voldoen word nie, moet dit in 'n 4°C-yskas gestoor word, voorberei word om betyds toestande te skep, en dan inspeksie uitvoer.
6. Wanneer monsters geïnspekteer word, voer toepaslike verwerking volgens hul verskillende eienskappe uit.
(1) Wanneer vloeibare monsters ingeënt word, moet dit deeglik gemeng en volgens die hoeveelheid ingeënt word.
(2) Vir soliede monsters, gebruik 'n gesteriliseerde mes om 25g van verskillende dele uit te sny, plaas dit in 225mL gesteriliseerde soutoplossing of ander oplossings, druk en meng met 'n homogeniseerder, en ent volgens die hoeveelheid.
(3) Bottels en sakke kos moet deur sterilisasie oopgemaak word, en bogenoemde metodes moet gekies word volgens die eienskappe voor inenting.
Monster inspeksie, aantekening en verslagdoening vereistes
1. Nadat die monster ontvang is, sal die inspeksiekamer eers 'n voorkoms-inspeksie uitvoer en die inspeksie onmiddellik in ooreenstemming met nasionale standaard-inspeksiemetodes uitvoer. Tydens die inspeksieproses moet aseptiese operasies versigtig, verantwoordelik en streng uitgevoer word om te vermymikrobiese toetsuitslagkontaminasie in die omgewing.
2. Die metodes wat tydens die monsterinspeksieproses gebruik is, die verskynsels en resultate wat voorgekom het, ens. moet in geskrewe toetsrekords geskryf word as 'n basis vir ontleding en beoordeling van die resultate. Die rekords moet gedetailleerd, duidelik, outentiek, objektief wees en moet nie verander of vervals word nie.
,
,