Oppsummering av krav til mikrobiologiske tester
2024-01-24 15:14:33
Kravene og trinnene formikrobiologisk testinger som følger:
Krav til aseptisk drift:
1.Du må bruke arbeidsklær og arbeidshette ved inokulering av bakterier.
2. Ved inokulering av matprøver skal det brukes spesielle arbeidsklær, capser og tøfler som skal plasseres i bufferrommet til sterilrommet og brukes etter UV-desinfeksjon før arbeid.
3. Når du inokulerer matprøver, vask hendene med såpe før du går inn i det sterile rommet, og tørk deretter hendene rene med en bomullsdott med 75 % alkohol.
4. Sugerørene, flate skålene og kulturmediene som brukes til inokulering, må steriliseres og steriliseres. Ubrukte beholdere skal ikke stå ubrukte etter at pakken er åpnet. Metallredskaper bør autoklaveres eller brennes tre ganger med 95 % alkohol før bruk.
5. Når sugerøret tas ut av pakken, må ikke tuppen av sugerøret berøre de utsatte delene. Når du bruker sugerøret til å inokulere reagensrøret eller platen, må tuppen av sugerøret ikke berøre kanten av reagensrøret eller platen.
6. Inokulering av prøver og overføring av bakterier skal gjøres foran en spritlampe. Ved inokulering av bakterier eller prøver skal sugerøret flammesteriliseres etter at det er tatt ut av pakken og åpnet reagensglass-proppen.
7. Før du inokulerer bakterier, bør alle metalltråder til inokulasjonsløkken og nålen brennes med en flamme, og om nødvendig bør forbindelsen mellom løkken, nål og stang brennes. Inokulasjonssløyfen for inokulering av tuberkulosebakterier og virulente bakterier skal kokes i kokende vann i 5 minutter, og deretter brennes av flamme.
8. Når du suger bakterievæske eller prøver med sugerør, bruk den tilsvarende gummituppen til å suge den, og ikke sug den direkte med munnen.
Krav til bruk av sterile rom:
1. Vinduene som fører til utsiden av det sterile rommet bør være dobbeltglass og forseglet. De bør ikke åpnes etter eget ønske. Det skal være bufferrom og skyvedør tilsvarende størrelsen på sterilrommet. Det skal også være et lite vindu på 0,5~0,7m2. Som forberedelse til å sende gjenstander etter å ha kommet inn i det sterile rommet.
2. Det sterile rommet skal holdes rent. Etter arbeid skal den desinfiseres med 2 % til 3 % kresolsåpeløsning, arbeidsflaten bør tørkes av, og gjenstander som ikke er relatert til eksperimentet bør ikke lagres.
3. Døren til det sterile rommet skal lukkes tett før og etter bruk, og den ultrafiolette lampen skal slås på. Hvis en innendørs hengende ultrafiolett lampe brukes til desinfeksjon, kreves en 30W ultrafiolett lampe. Avstanden er 1,0 m, og bestrålingstiden er ikke mindre enn 30 minutter. Når du bruker ultrafiolette lamper, bør du være oppmerksom på å operere direkte under ultrafiolett lys for å unngå skade. Lampen må tørkes forsiktig med en bomullsdott annenhver uke for å fjerne støv og fett for å redusere virkningen av ultrafiolett penetrering.
4. Når du behandler og inokulerer matprøver, må du gå inn i det sterile rommet for operasjon og ikke ha lov til å gå inn eller ut etter ønske. Hvis gjenstander må sendes videre, kan de føres gjennom det lille vinduet.
5. Hvis luftkondisjonering må installeres i det sterile rommet, bør det være en filtreringsanordning.
Krav til desinfeksjon og sterilisering
Glass, metallredskaper og kulturmedier som brukes tilmikrobiologisk testing, kontaminerte og inokulerte kulturer osv. må steriliseres før bruk. Tørr varme og fuktig varmetrykk dampsteriliseringsmetoder.
1. Forberedelse før sterilisering
(1) Alle gjenstander som må steriliseres bør vaskes og tørkes først. Glassvarer som sugerør og flate tallerkener bør pakkes tett med papir. Hvis det brukes metallrør, bør ventilasjonshullene på dem åpnes.
(2) Pakk inn proppen til den trekantede kolben som inneholder dyrkingsmediet i papir, dekk til reagensrøret og trekk ut kjernen av sprøyten, og pakk den inn med gasbind.
2. installere
(1) Tørrvarmesterilisator: Varene må ikke være overfylte og kan ikke berøre de fire veggene i esken.
(2) Stor høytrykksdampkoker: Plasser steriliserte gjenstander, pakk dem inn separat og legg dem direkte i steriliseringssylinderen. Ikke overbefolk varene.
3. Inspeksjon av utstyr
(1) Sjekk om dørbryteren er fleksibel, om gummiringen er skadet og om den er flat.
(2) Sjekk om trykkmåleren forblir i nullstilling når dampen er uttømt, lukk døren og dekselet, ventiler ut damp eller varme, og observer om det er luftlekkasje, om forholdene merket av trykkmåleren og termometeret stemmer overens, og om rørledningen er blokkert.
(3) For sterilisatorer med automatisk elektronisk programkontroll, bør det angitte programmet kontrolleres før bruk for å se om det oppfyller kravene til sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Tørrvarmesteriliseringsmetode:
Denne metoden er egnet for gjenstander som ikke skader, forringes eller fordamper under tørre varmeforhold. Det er mer vanlig brukt til sterilisering av glassvarer, metallprodukter, keramiske produkter, etc.
①Instrumenter og redskaper bør vaskes før tørrbaking for å forhindre at smuss som er festet til overflaten karboniseres.
② Under sterilisering må ikke gjenstandene være overfylte, ikke komme i direkte kontakt med bunnen og veggen av esken, og la det være mellomrom mellom gjenstandene.
③ Under sterilisering, lukk døren godt, koble til strømforsyningen, åpne avtrekkshullet i ca. 30 minutter for å fjerne den kalde luften i sterilisatoren, juster indikatorlyset når temperaturen stiger til 160°C, og hold det i 1,5 til 2 timer.
④Etter steriliseringen er fullført eller under temperaturøkningsprosessen, må døren åpnes under 60°C.
(2) Følgende trinn bør følges når du bruker en bærbar trykkoker eller vertikal trykkdampsterilisator:
① Tilsett 3L vann til hoveddelen av den bærbare trykkokeren, og 16L vann til den vertikale trykkokeren (vannmengden bør etterfylles ved gjenbruk, og vannet må skiftes ut hvis det blir grumset);
② For en bærbar trykkoker, sett inn eksosrøret på toppdekselet inn i firkantrøret på den indre veggen av steriliseringsfatet (sterilisatorer uten slanger eller de med korroderte og sprukne slanger må ikke brukes);
③ Dekk til toppdekselet og stram det godt for å forhindre luftlekkasje; Plasser sterilisatoren på brannkilden for å varme opp, slå på strømmen til den vertikale trykkokeren, og åpne avtrekksventilen på toppdekselet for å slippe ut luften (avtrekksluft i 10 til 15 minutter etter at vannet koker) );
④Steng eksosventilen for å heve damptrykket til de spesifiserte kravene og opprettholde det i den angitte tiden (avhengig av arten av de steriliserte gjenstandene og relevante omstendigheter);
⑤ Etter at den angitte tiden er nådd, for gjenstander som må tørkes, åpne umiddelbart eksosventilen for å slippe ut dampen. Når trykket går tilbake til null, avkjøl det naturlig til 60°C og åpne deretter lokket for å ta ut gjenstandene. Hvis det er en flytende gjenstand, må du ikke åpne eksosventilen. Kjelen bør fjernes fra varmekilden umiddelbart og la den avkjøles naturlig til trykket kommer tilbake til null og temperaturen faller under 60°C før lokket åpnes for å ta ut innholdet for å forhindre plutselig dekompresjon av væsken fra voldsom koking eller eksplosjon av beholderen.
(3) Følg disse trinnene for å bruke den horisontale trykkokerens dampsterilisator:
①Lukk grytedøren tett, åpne luftinntaksventilen, introduser damp i mesaninen for forvarming, og den kalde luften i mesaninen vil automatisk slippes ut gjennom luftbarrieren;
②Etter at mellomlaget når den forhåndsbestemte temperaturen, åpner du luftinntaksventilen til grytekammeret, introduserer dampen i grytekammeret, og den kalde luften i grytekammeret vil automatisk slippes ut gjennom grytekammerets luftstopper;
③Når trykket og temperaturen i grytekammeret når spesifisert trykk, juster luftinntaksventilen for å holde den konstant;
④ Avkjøl temperaturen naturlig eller kunstig til 60 ℃ før du åpner døren for å ta ut gjenstandene. Ikke bruk metoden for hurtig damputslipp for å forhindre plutselig trykkfall, voldsom koking av væsken eller eksplosjon av beholderen;
⑤ Når du bruker et automatisk program-kontrollert trykkdampsterilisator, etter å ha plassert gjenstandene og lukket døren godt, skal den tilsvarende bryteren trykkes inn i henhold til varekategorien slik at steriliseringen kan utføres automatisk i henhold til de nødvendige prosedyrene. Under sterilisering må det vedlagte instrumentet brukes til å registrere temperatur og tid. For fremtidig referanse bør driftskravene være strengt i samsvar med produsentens instruksjoner;
5. Steriliseringstemperatur og tid
(1) Steriliseringstemperaturen til tørrvarmesterilisatoren er 160 ℃, 1,5 ~ 2 timer.
(2) Steriliseringstemperatur og tid for trykkdampsterilisator
Intermitterende steriliseringsmetode
1. Steriliseringsmetode:
Bruk dampsterilisering uten trykk. Noen stoffer blir lett ødelagt ved høytrykksdampsterilisering, så denne metoden kan brukes til sterilisering.
(1) Plasser gjenstandene som skal steriliseres i gryten, dekk til toppdekselet, åpne avløpsutløpet og tøm bort det gjenværende vannet i gryten.
(2) Lukk dreneringsutløpet, åpne luftinntaksdøren og desinfiser i 10 til 20 minutter etter behov.
(3) Etter at steriliseringen er fullført, lukk luftinntaksdøren, ta ut gjenstandene og vent til avkjøling til romtemperatur, sett dem i en 37°C inkubator over natten, og fortsett å sterilisere i henhold til metoden ovenfor neste dag. Gjør dette tre ganger for å oppnå hensikten med sterilisering.
2. Slik bruker du serumkoagulatoren:
Når kulturmediet inneholder spesielle ingredienser som serum eller egg, vil høy varme ødelegge næringsstoffene. Derfor kan lav temperatur brukes til å koagulere serumet og oppnå steriliseringsformål:
(1) Ved bruk av serum sterilisert med denne metoden til alikvotering, må aseptiske operasjoner følges strengt, og prøverør og plater må også steriliseres før bruk;
(2) Gjør kulturmediet til en skråning eller høyt lag etter behov. Etter å ha tilsatt nok vann, koble til strømforsyningen, øk temperaturen til 75~90°C i én time og steriliser den deretter. Plasser den i en 37°C inkubator over natten, og steriliser den deretter tre ganger.
3. Kok og desinfiser:
Du kan bruke en kokende gryte eller kokende sterilisator. Etter at vannet koker, kok det i 5 til 15 minutter. Du kan også tilsette 2% karbonsyre i vannet og koke det i 5 minutter. Tilsett 0,02 % formaldehyd og kok det ved 80°C i 60 minutter for å oppnå hensikten med sterilisering. Kokende sterilisering kan imidlertid oppnås. Når du bruker forsterkere, bør du være oppmerksom på korrosiviteten til gjenstander.
4. Steriliseringsbehandling:
Etter sterilisering er gjenstandene allerede sterile under normale omstendigheter. De bør inspiseres nøye og plasseres når de tas ut av sterilisatoren for å unngå re-kontaminering;
(1) Ta ut varene og kontroller emballasjens integritet umiddelbart. Hvis det er skade eller tampongen fjernes, kan den ikke brukes som sterile gjenstander;
(2) Gjenstandene som tas ut kan ikke brukes som sterile gjenstander hvis emballasjen åpenbart er gjennomvåt i vann;
(3) Kulturmediet eller reagensene bør kontrolleres for å se om de oppfyller fargen eller tilstanden etter sterilisering. De som ikke oppfyller kravene bør kasseres;
(4) For åpne-lukkede beholdere bør skjermhullene lukkes når de tas ut;
(5) Hvis de fjernede gjenstandene faller til bakken, blir feilplassert på et urent sted, eller er farget med vann, anses de som forurenset og kan ikke brukes som sterile gjenstander;
(6) De kvalifiserte steriliserte gjenstandene som tas ut bør oppbevares i lagerrommet eller støvtette skap, og det er strengt forbudt å blande dem med usteriliserte gjenstander;
(7) Alle kvalifiserte varer skal merkes med steriliseringsdato og utløpsdato;
(8) Etter at hver batch med steriliseringsbehandling er fullført, noter navn, mengde, temperatur, tid og operatør for de steriliserte produktene.
Krav til behandling av giftig og bakterielt avfall
Eksperimentelt utstyr og kulturer som brukes i mikrobiologiske forsøk må ikke tas ut av laboratoriet uten desinfeksjon.
1. Kulturelt forurenset materiale og avfall skal plasseres i tette beholdere eller trådkurver og lagres sentralt på anviste steder til de er jevnt autoklaveret.
2. Kulturer kontaminert av mikroorganismer må autoklaveres ved 121°C i 30 minutter.
3. Etter bruk skal de forurensede sugerørene legges i 5 % kreolsåpeløsning eller karbolsyreløsning, bløtlegges i minst 24 timer (desinfeksjonsvæsken må ikke være lavere enn bløtleggingshøyden), og deretter steriliseres ved høyt trykk ved 121°C i 30 minutter.
4. Væsken for flekker og skylling av flekker kan generelt skylles direkte i kloakken. Skyllevæsken for virulente bakterier må spyles i et beger og steriliseres med høyt trykk før den helles i kloakken. De fargede objektglassene legges i 5 % kresolsåpeløsning. Etter bløtlegging i vann i 24 timer, kok og vask. Objektglassene eller skålene som brukes til agglutinasjonstesting må autoklaveres og deretter vaskes.
5. Etter å ha brutt kulturen, spray og bløt umiddelbart de forurensede delene med 5 % kresol såpeløsning eller karbonsyreløsning, bløtlegg i en halv time og tørk deretter rent.
Forurenset arbeidstøy eller arbeidstøy, capser, masker osv. som bæres for voldelige prøver, skal legges i spesielle desinfeksjonsposer og steriliseres ved høytrykk før det vaskes.
Middels krav til forberedelse
Kvaliteten på tilberedning av kulturmedium vil direkte påvirke veksten av mikroorganismer, fordi ulike mikroorganismer har ulike ernæringsmessige krav og ulike kulturformål. Forberedelseskravene for ulike kulturmedier er som følger:
1. Vei ingrediensene i henhold til medium-formelen, og løs dem deretter i destillert vann. Kvaliteten på de påførte reagensene og legemidlene bør inspiseres før bruk.
2. pH-måling og justering: pH-måling bør utføres når kulturmediet er avkjølt til romtemperatur, fordi det er en viss forskjell i pH under varme eller kalde forhold. Når målingen er fullført, tilsett alkali eller syre i henhold til beregnet mengde og bland godt. Bør testes på nytt. pH-verdien til kulturmediet må være nøyaktig, ellers vil det påvirke veksten av mikroorganismer eller påvirke observasjonen av resultater. Det skal imidlertid bemerkes at høytrykkssterilisering kan påvirke reduksjonen eller økningen av pH-verdien til enkelte kulturmedier, så det er ikke tilrådelig å sterilisere ved for høyt trykk eller for mange ganger for å unngå å påvirke kvaliteten på kulturmediet. Indikatorer, natrium deoksycholat, agar, etc. er generelt Legg det til etter justering av pH.
3. Kulturmediet må holdes klart for å lette observasjon av bakterievekst. Etter at kulturmediet er oppvarmet og kokt, kan det filtreres med absorberende bomull eller flanell for å fjerne sediment. Om nødvendig kan det klares med eggehvite. Agarstrimlene som brukes må vaskes og tørkes på forhånd. Før bruk, unngå å påvirke gjennomsiktigheten på grunn av urenheter i agaren.
4. Jern, kobber og andre beholdere skal ikke brukes til å holde kulturmediet. Det er bedre å bruke rene nøytrale, harde glassbeholdere.
5. Steriliseringen av kulturmediet må ikke bare oppnå formålet med fullstendig sterilisering, men også være oppmerksom på ikke å redusere næringsverdien på grunn av oppvarming. Generelt er 121°C i 15 minutter tilstrekkelig. For dyrkingsmedier som inneholder stoffer som ikke tåler høy varme, som sukker og serum, bør gelatin, etc., steriliseres ved lav temperatur eller periodisk metode. Noen reagenser som ikke kan varmes opp, slik som kaliumtelluritt, eggeplomme, TTC, antibiotika, etc., bør avkjøles til ca. 50°C etter at basisagaren er autoklaveret og deretter tilsatt;
6. Etter at hver batch av kulturmedier er klargjort, bør en steril veksttest og en veksttest av de testede stammene utføres. Hvis det er et biokjemisk kulturmedium, bruk standard bakteriestammer for inokulering og dyrking, og observer de biokjemiske reaksjonsresultatene. Det skal vise en normal reaksjon. Kulturmediet bør ikke oppbevares for lenge. Om nødvendig kan den oppbevares i 4°C kjøleskap.
7. For tiden finnes det mange typer tørre kulturmedier. Hver batch må bruke standardstammer for veksttest eller biokjemisk reaksjonsobservasjon. Ulike kulturmedier kan kun brukes etter at veksttesten av de tilsvarende stammene er god. Nyinnkjøpte eller tørkede som har vært lagret lenge kan brukes. pH i dyrkingsmediet bør også måles når det tilberedes, og dosering og metode bør følges i henhold til produktinstruksjonene.
8. De kjemiske reagensene, steriliseringsforholdene, testresultatene for stammevekst og produksjonspersonell som brukes i hver batch med forberedte dyrkingsmedier, bør registreres for forespørsel.
Krav til prøveinnsamling og behandling
1. De innsamlede kontrollprøvene skal være representative. Ved prøvetaking bør råvarene, bearbeidingen, transporten, lagringsmetodene og forholdene for matpartiet, de omgivende miljøhelseforholdene osv. undersøkes i detalj for å kontrollere om det er noen kilder til forurensning.
2. I henhold til type og mengde mat, bør prøvetakingsmengden og metoden utføres i samsvar med kravene til standard inspeksjonsmetoder.
3. Vær oppmerksom på aseptisk drift ved prøvetaking, og beholderen må steriliseres for å unngå mikrobiell kontaminering i miljøet. Beholderen må ikke steriliseres med creosal såpeløsning, sterilisering med klormetionin, alkohol og andre desinfeksjonsmidler, og den må ikke inneholde slike desinfeksjonsmidler eller antibiotika. For å unngå å drepe mikroorganismer i prøven, må saksene, knivene og skjeene som brukes også steriliseres før bruk.
4. Prøver sendes til inspeksjonsrommet for kontroll umiddelbart etter innsamling. Inspeksjonsprosessen overstiger vanligvis ikke 3 timer. Hvis avstanden er lang, kan den lagres i et miljø på 1 ~ 5 ℃. Hvis den skal fryses, bør den oppbevares i frossen tilstand. Send inn til befaring.
5. Etter å ha mottatt prøven vil inspeksjonsrommet registrere den (prøvenavn, enhet for kontroll, mengde, dato, antall osv.) og observere prøvens utseende. Hvis noen av følgende forhold blir funnet, kan inspeksjonen nektes:
(1) Prøver som er sterilisert ved spesielle høytrykks-, koke- eller andre metoder vil miste sin betydning for å representere det originale næringsmiddelet;
(2) Flasker og poser med mat har blitt åpnet, kokt kjøtt og dets produkter, kokt fjærfe og annen mat har blitt ødelagt og ufullstendig, det vil si at den opprinnelige matformen har gått tapt (bortsett fra matforgiftningsprøver);
(3) Prøvetakingsmengden er utilstrekkelig etter behov;
For prøver innlevert til kontroll som oppfyller kravene, bør inspeksjonsrommet umiddelbart foreta inspeksjon etter mottak. Hvis betingelsene ikke er oppfylt, bør de oppbevares i et 4°C kjøleskap, forberedes for å skape betingelser i tide, og deretter gjennomføre inspeksjon.
6. Når du inspiserer prøver, utfør passende behandling i henhold til deres forskjellige egenskaper.
(1) Ved inokulering av væskeprøver bør de blandes grundig og inokuleres i henhold til mengden.
(2) For faste prøver, bruk en sterilisert kniv til å kutte ut 25 g av forskjellige deler, plasser dem i 225 ml sterilisert saltvann eller andre løsninger, knus og bland med en homogenisator, og inokuler i henhold til mengden.
(3) Flasker og poser med mat bør åpnes ved sterilisering, og metodene ovenfor bør velges i henhold til egenskapene før inokulering.
Prøvekrav til inspeksjon, registrering og rapportering
1. Etter å ha mottatt prøven, vil inspeksjonsrommet først gjennomføre en utseendeinspeksjon og umiddelbart gjennomføre inspeksjonen i samsvar med nasjonale standard inspeksjonsmetoder. Under inspeksjonsprosessen må aseptiske operasjoner utføres nøye, ansvarlig og strengt for å unngåmikrobielt testresultatforurensning i miljøet.
2. Metodene som er brukt under prøvekontrollprosessen, fenomener og resultater som har oppstått etc. skal skrives inn i skriftlige prøveprotokoller som grunnlag for analyse og vurdering av resultatene. Dokumentene må være detaljerte, klare, autentiske, objektive og må ikke endres eller forfalskes.
?
?
Krav til aseptisk drift:
1.Du må bruke arbeidsklær og arbeidshette ved inokulering av bakterier.
2. Ved inokulering av matprøver skal det brukes spesielle arbeidsklær, capser og tøfler som skal plasseres i bufferrommet til sterilrommet og brukes etter UV-desinfeksjon før arbeid.
3. Når du inokulerer matprøver, vask hendene med såpe før du går inn i det sterile rommet, og tørk deretter hendene rene med en bomullsdott med 75 % alkohol.
4. Sugerørene, flate skålene og kulturmediene som brukes til inokulering, må steriliseres og steriliseres. Ubrukte beholdere skal ikke stå ubrukte etter at pakken er åpnet. Metallredskaper bør autoklaveres eller brennes tre ganger med 95 % alkohol før bruk.
5. Når sugerøret tas ut av pakken, må ikke tuppen av sugerøret berøre de utsatte delene. Når du bruker sugerøret til å inokulere reagensrøret eller platen, må tuppen av sugerøret ikke berøre kanten av reagensrøret eller platen.
6. Inokulering av prøver og overføring av bakterier skal gjøres foran en spritlampe. Ved inokulering av bakterier eller prøver skal sugerøret flammesteriliseres etter at det er tatt ut av pakken og åpnet reagensglass-proppen.
7. Før du inokulerer bakterier, bør alle metalltråder til inokulasjonsløkken og nålen brennes med en flamme, og om nødvendig bør forbindelsen mellom løkken, nål og stang brennes. Inokulasjonssløyfen for inokulering av tuberkulosebakterier og virulente bakterier skal kokes i kokende vann i 5 minutter, og deretter brennes av flamme.
8. Når du suger bakterievæske eller prøver med sugerør, bruk den tilsvarende gummituppen til å suge den, og ikke sug den direkte med munnen.
Krav til bruk av sterile rom:
1. Vinduene som fører til utsiden av det sterile rommet bør være dobbeltglass og forseglet. De bør ikke åpnes etter eget ønske. Det skal være bufferrom og skyvedør tilsvarende størrelsen på sterilrommet. Det skal også være et lite vindu på 0,5~0,7m2. Som forberedelse til å sende gjenstander etter å ha kommet inn i det sterile rommet.
2. Det sterile rommet skal holdes rent. Etter arbeid skal den desinfiseres med 2 % til 3 % kresolsåpeløsning, arbeidsflaten bør tørkes av, og gjenstander som ikke er relatert til eksperimentet bør ikke lagres.
3. Døren til det sterile rommet skal lukkes tett før og etter bruk, og den ultrafiolette lampen skal slås på. Hvis en innendørs hengende ultrafiolett lampe brukes til desinfeksjon, kreves en 30W ultrafiolett lampe. Avstanden er 1,0 m, og bestrålingstiden er ikke mindre enn 30 minutter. Når du bruker ultrafiolette lamper, bør du være oppmerksom på å operere direkte under ultrafiolett lys for å unngå skade. Lampen må tørkes forsiktig med en bomullsdott annenhver uke for å fjerne støv og fett for å redusere virkningen av ultrafiolett penetrering.
4. Når du behandler og inokulerer matprøver, må du gå inn i det sterile rommet for operasjon og ikke ha lov til å gå inn eller ut etter ønske. Hvis gjenstander må sendes videre, kan de føres gjennom det lille vinduet.
5. Hvis luftkondisjonering må installeres i det sterile rommet, bør det være en filtreringsanordning.
Krav til desinfeksjon og sterilisering
Glass, metallredskaper og kulturmedier som brukes tilmikrobiologisk testing, kontaminerte og inokulerte kulturer osv. må steriliseres før bruk. Tørr varme og fuktig varmetrykk dampsteriliseringsmetoder.
1. Forberedelse før sterilisering
(1) Alle gjenstander som må steriliseres bør vaskes og tørkes først. Glassvarer som sugerør og flate tallerkener bør pakkes tett med papir. Hvis det brukes metallrør, bør ventilasjonshullene på dem åpnes.
(2) Pakk inn proppen til den trekantede kolben som inneholder dyrkingsmediet i papir, dekk til reagensrøret og trekk ut kjernen av sprøyten, og pakk den inn med gasbind.
2. installere
(1) Tørrvarmesterilisator: Varene må ikke være overfylte og kan ikke berøre de fire veggene i esken.
(2) Stor høytrykksdampkoker: Plasser steriliserte gjenstander, pakk dem inn separat og legg dem direkte i steriliseringssylinderen. Ikke overbefolk varene.
3. Inspeksjon av utstyr
(1) Sjekk om dørbryteren er fleksibel, om gummiringen er skadet og om den er flat.
(2) Sjekk om trykkmåleren forblir i nullstilling når dampen er uttømt, lukk døren og dekselet, ventiler ut damp eller varme, og observer om det er luftlekkasje, om forholdene merket av trykkmåleren og termometeret stemmer overens, og om rørledningen er blokkert.
(3) For sterilisatorer med automatisk elektronisk programkontroll, bør det angitte programmet kontrolleres før bruk for å se om det oppfyller kravene til sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Tørrvarmesteriliseringsmetode:
Denne metoden er egnet for gjenstander som ikke skader, forringes eller fordamper under tørre varmeforhold. Det er mer vanlig brukt til sterilisering av glassvarer, metallprodukter, keramiske produkter, etc.
①Instrumenter og redskaper bør vaskes før tørrbaking for å forhindre at smuss som er festet til overflaten karboniseres.
② Under sterilisering må ikke gjenstandene være overfylte, ikke komme i direkte kontakt med bunnen og veggen av esken, og la det være mellomrom mellom gjenstandene.
③ Under sterilisering, lukk døren godt, koble til strømforsyningen, åpne avtrekkshullet i ca. 30 minutter for å fjerne den kalde luften i sterilisatoren, juster indikatorlyset når temperaturen stiger til 160°C, og hold det i 1,5 til 2 timer.
④Etter steriliseringen er fullført eller under temperaturøkningsprosessen, må døren åpnes under 60°C.
(2) Følgende trinn bør følges når du bruker en bærbar trykkoker eller vertikal trykkdampsterilisator:
① Tilsett 3L vann til hoveddelen av den bærbare trykkokeren, og 16L vann til den vertikale trykkokeren (vannmengden bør etterfylles ved gjenbruk, og vannet må skiftes ut hvis det blir grumset);
② For en bærbar trykkoker, sett inn eksosrøret på toppdekselet inn i firkantrøret på den indre veggen av steriliseringsfatet (sterilisatorer uten slanger eller de med korroderte og sprukne slanger må ikke brukes);
③ Dekk til toppdekselet og stram det godt for å forhindre luftlekkasje; Plasser sterilisatoren på brannkilden for å varme opp, slå på strømmen til den vertikale trykkokeren, og åpne avtrekksventilen på toppdekselet for å slippe ut luften (avtrekksluft i 10 til 15 minutter etter at vannet koker) );
④Steng eksosventilen for å heve damptrykket til de spesifiserte kravene og opprettholde det i den angitte tiden (avhengig av arten av de steriliserte gjenstandene og relevante omstendigheter);
⑤ Etter at den angitte tiden er nådd, for gjenstander som må tørkes, åpne umiddelbart eksosventilen for å slippe ut dampen. Når trykket går tilbake til null, avkjøl det naturlig til 60°C og åpne deretter lokket for å ta ut gjenstandene. Hvis det er en flytende gjenstand, må du ikke åpne eksosventilen. Kjelen bør fjernes fra varmekilden umiddelbart og la den avkjøles naturlig til trykket kommer tilbake til null og temperaturen faller under 60°C før lokket åpnes for å ta ut innholdet for å forhindre plutselig dekompresjon av væsken fra voldsom koking eller eksplosjon av beholderen.
(3) Følg disse trinnene for å bruke den horisontale trykkokerens dampsterilisator:
①Lukk grytedøren tett, åpne luftinntaksventilen, introduser damp i mesaninen for forvarming, og den kalde luften i mesaninen vil automatisk slippes ut gjennom luftbarrieren;
②Etter at mellomlaget når den forhåndsbestemte temperaturen, åpner du luftinntaksventilen til grytekammeret, introduserer dampen i grytekammeret, og den kalde luften i grytekammeret vil automatisk slippes ut gjennom grytekammerets luftstopper;
③Når trykket og temperaturen i grytekammeret når spesifisert trykk, juster luftinntaksventilen for å holde den konstant;
④ Avkjøl temperaturen naturlig eller kunstig til 60 ℃ før du åpner døren for å ta ut gjenstandene. Ikke bruk metoden for hurtig damputslipp for å forhindre plutselig trykkfall, voldsom koking av væsken eller eksplosjon av beholderen;
⑤ Når du bruker et automatisk program-kontrollert trykkdampsterilisator, etter å ha plassert gjenstandene og lukket døren godt, skal den tilsvarende bryteren trykkes inn i henhold til varekategorien slik at steriliseringen kan utføres automatisk i henhold til de nødvendige prosedyrene. Under sterilisering må det vedlagte instrumentet brukes til å registrere temperatur og tid. For fremtidig referanse bør driftskravene være strengt i samsvar med produsentens instruksjoner;
5. Steriliseringstemperatur og tid
(1) Steriliseringstemperaturen til tørrvarmesterilisatoren er 160 ℃, 1,5 ~ 2 timer.
(2) Steriliseringstemperatur og tid for trykkdampsterilisator
Intermitterende steriliseringsmetode
1. Steriliseringsmetode:
Bruk dampsterilisering uten trykk. Noen stoffer blir lett ødelagt ved høytrykksdampsterilisering, så denne metoden kan brukes til sterilisering.
(1) Plasser gjenstandene som skal steriliseres i gryten, dekk til toppdekselet, åpne avløpsutløpet og tøm bort det gjenværende vannet i gryten.
(2) Lukk dreneringsutløpet, åpne luftinntaksdøren og desinfiser i 10 til 20 minutter etter behov.
(3) Etter at steriliseringen er fullført, lukk luftinntaksdøren, ta ut gjenstandene og vent til avkjøling til romtemperatur, sett dem i en 37°C inkubator over natten, og fortsett å sterilisere i henhold til metoden ovenfor neste dag. Gjør dette tre ganger for å oppnå hensikten med sterilisering.
2. Slik bruker du serumkoagulatoren:
Når kulturmediet inneholder spesielle ingredienser som serum eller egg, vil høy varme ødelegge næringsstoffene. Derfor kan lav temperatur brukes til å koagulere serumet og oppnå steriliseringsformål:
(1) Ved bruk av serum sterilisert med denne metoden til alikvotering, må aseptiske operasjoner følges strengt, og prøverør og plater må også steriliseres før bruk;
(2) Gjør kulturmediet til en skråning eller høyt lag etter behov. Etter å ha tilsatt nok vann, koble til strømforsyningen, øk temperaturen til 75~90°C i én time og steriliser den deretter. Plasser den i en 37°C inkubator over natten, og steriliser den deretter tre ganger.
3. Kok og desinfiser:
Du kan bruke en kokende gryte eller kokende sterilisator. Etter at vannet koker, kok det i 5 til 15 minutter. Du kan også tilsette 2% karbonsyre i vannet og koke det i 5 minutter. Tilsett 0,02 % formaldehyd og kok det ved 80°C i 60 minutter for å oppnå hensikten med sterilisering. Kokende sterilisering kan imidlertid oppnås. Når du bruker forsterkere, bør du være oppmerksom på korrosiviteten til gjenstander.
4. Steriliseringsbehandling:
Etter sterilisering er gjenstandene allerede sterile under normale omstendigheter. De bør inspiseres nøye og plasseres når de tas ut av sterilisatoren for å unngå re-kontaminering;
(1) Ta ut varene og kontroller emballasjens integritet umiddelbart. Hvis det er skade eller tampongen fjernes, kan den ikke brukes som sterile gjenstander;
(2) Gjenstandene som tas ut kan ikke brukes som sterile gjenstander hvis emballasjen åpenbart er gjennomvåt i vann;
(3) Kulturmediet eller reagensene bør kontrolleres for å se om de oppfyller fargen eller tilstanden etter sterilisering. De som ikke oppfyller kravene bør kasseres;
(4) For åpne-lukkede beholdere bør skjermhullene lukkes når de tas ut;
(5) Hvis de fjernede gjenstandene faller til bakken, blir feilplassert på et urent sted, eller er farget med vann, anses de som forurenset og kan ikke brukes som sterile gjenstander;
(6) De kvalifiserte steriliserte gjenstandene som tas ut bør oppbevares i lagerrommet eller støvtette skap, og det er strengt forbudt å blande dem med usteriliserte gjenstander;
(7) Alle kvalifiserte varer skal merkes med steriliseringsdato og utløpsdato;
(8) Etter at hver batch med steriliseringsbehandling er fullført, noter navn, mengde, temperatur, tid og operatør for de steriliserte produktene.
Krav til behandling av giftig og bakterielt avfall
Eksperimentelt utstyr og kulturer som brukes i mikrobiologiske forsøk må ikke tas ut av laboratoriet uten desinfeksjon.
1. Kulturelt forurenset materiale og avfall skal plasseres i tette beholdere eller trådkurver og lagres sentralt på anviste steder til de er jevnt autoklaveret.
2. Kulturer kontaminert av mikroorganismer må autoklaveres ved 121°C i 30 minutter.
3. Etter bruk skal de forurensede sugerørene legges i 5 % kreolsåpeløsning eller karbolsyreløsning, bløtlegges i minst 24 timer (desinfeksjonsvæsken må ikke være lavere enn bløtleggingshøyden), og deretter steriliseres ved høyt trykk ved 121°C i 30 minutter.
4. Væsken for flekker og skylling av flekker kan generelt skylles direkte i kloakken. Skyllevæsken for virulente bakterier må spyles i et beger og steriliseres med høyt trykk før den helles i kloakken. De fargede objektglassene legges i 5 % kresolsåpeløsning. Etter bløtlegging i vann i 24 timer, kok og vask. Objektglassene eller skålene som brukes til agglutinasjonstesting må autoklaveres og deretter vaskes.
5. Etter å ha brutt kulturen, spray og bløt umiddelbart de forurensede delene med 5 % kresol såpeløsning eller karbonsyreløsning, bløtlegg i en halv time og tørk deretter rent.
Forurenset arbeidstøy eller arbeidstøy, capser, masker osv. som bæres for voldelige prøver, skal legges i spesielle desinfeksjonsposer og steriliseres ved høytrykk før det vaskes.
Middels krav til forberedelse
Kvaliteten på tilberedning av kulturmedium vil direkte påvirke veksten av mikroorganismer, fordi ulike mikroorganismer har ulike ernæringsmessige krav og ulike kulturformål. Forberedelseskravene for ulike kulturmedier er som følger:
1. Vei ingrediensene i henhold til medium-formelen, og løs dem deretter i destillert vann. Kvaliteten på de påførte reagensene og legemidlene bør inspiseres før bruk.
2. pH-måling og justering: pH-måling bør utføres når kulturmediet er avkjølt til romtemperatur, fordi det er en viss forskjell i pH under varme eller kalde forhold. Når målingen er fullført, tilsett alkali eller syre i henhold til beregnet mengde og bland godt. Bør testes på nytt. pH-verdien til kulturmediet må være nøyaktig, ellers vil det påvirke veksten av mikroorganismer eller påvirke observasjonen av resultater. Det skal imidlertid bemerkes at høytrykkssterilisering kan påvirke reduksjonen eller økningen av pH-verdien til enkelte kulturmedier, så det er ikke tilrådelig å sterilisere ved for høyt trykk eller for mange ganger for å unngå å påvirke kvaliteten på kulturmediet. Indikatorer, natrium deoksycholat, agar, etc. er generelt Legg det til etter justering av pH.
3. Kulturmediet må holdes klart for å lette observasjon av bakterievekst. Etter at kulturmediet er oppvarmet og kokt, kan det filtreres med absorberende bomull eller flanell for å fjerne sediment. Om nødvendig kan det klares med eggehvite. Agarstrimlene som brukes må vaskes og tørkes på forhånd. Før bruk, unngå å påvirke gjennomsiktigheten på grunn av urenheter i agaren.
4. Jern, kobber og andre beholdere skal ikke brukes til å holde kulturmediet. Det er bedre å bruke rene nøytrale, harde glassbeholdere.
5. Steriliseringen av kulturmediet må ikke bare oppnå formålet med fullstendig sterilisering, men også være oppmerksom på ikke å redusere næringsverdien på grunn av oppvarming. Generelt er 121°C i 15 minutter tilstrekkelig. For dyrkingsmedier som inneholder stoffer som ikke tåler høy varme, som sukker og serum, bør gelatin, etc., steriliseres ved lav temperatur eller periodisk metode. Noen reagenser som ikke kan varmes opp, slik som kaliumtelluritt, eggeplomme, TTC, antibiotika, etc., bør avkjøles til ca. 50°C etter at basisagaren er autoklaveret og deretter tilsatt;
6. Etter at hver batch av kulturmedier er klargjort, bør en steril veksttest og en veksttest av de testede stammene utføres. Hvis det er et biokjemisk kulturmedium, bruk standard bakteriestammer for inokulering og dyrking, og observer de biokjemiske reaksjonsresultatene. Det skal vise en normal reaksjon. Kulturmediet bør ikke oppbevares for lenge. Om nødvendig kan den oppbevares i 4°C kjøleskap.
7. For tiden finnes det mange typer tørre kulturmedier. Hver batch må bruke standardstammer for veksttest eller biokjemisk reaksjonsobservasjon. Ulike kulturmedier kan kun brukes etter at veksttesten av de tilsvarende stammene er god. Nyinnkjøpte eller tørkede som har vært lagret lenge kan brukes. pH i dyrkingsmediet bør også måles når det tilberedes, og dosering og metode bør følges i henhold til produktinstruksjonene.
8. De kjemiske reagensene, steriliseringsforholdene, testresultatene for stammevekst og produksjonspersonell som brukes i hver batch med forberedte dyrkingsmedier, bør registreres for forespørsel.
Krav til prøveinnsamling og behandling
1. De innsamlede kontrollprøvene skal være representative. Ved prøvetaking bør råvarene, bearbeidingen, transporten, lagringsmetodene og forholdene for matpartiet, de omgivende miljøhelseforholdene osv. undersøkes i detalj for å kontrollere om det er noen kilder til forurensning.
2. I henhold til type og mengde mat, bør prøvetakingsmengden og metoden utføres i samsvar med kravene til standard inspeksjonsmetoder.
3. Vær oppmerksom på aseptisk drift ved prøvetaking, og beholderen må steriliseres for å unngå mikrobiell kontaminering i miljøet. Beholderen må ikke steriliseres med creosal såpeløsning, sterilisering med klormetionin, alkohol og andre desinfeksjonsmidler, og den må ikke inneholde slike desinfeksjonsmidler eller antibiotika. For å unngå å drepe mikroorganismer i prøven, må saksene, knivene og skjeene som brukes også steriliseres før bruk.
4. Prøver sendes til inspeksjonsrommet for kontroll umiddelbart etter innsamling. Inspeksjonsprosessen overstiger vanligvis ikke 3 timer. Hvis avstanden er lang, kan den lagres i et miljø på 1 ~ 5 ℃. Hvis den skal fryses, bør den oppbevares i frossen tilstand. Send inn til befaring.
5. Etter å ha mottatt prøven vil inspeksjonsrommet registrere den (prøvenavn, enhet for kontroll, mengde, dato, antall osv.) og observere prøvens utseende. Hvis noen av følgende forhold blir funnet, kan inspeksjonen nektes:
(1) Prøver som er sterilisert ved spesielle høytrykks-, koke- eller andre metoder vil miste sin betydning for å representere det originale næringsmiddelet;
(2) Flasker og poser med mat har blitt åpnet, kokt kjøtt og dets produkter, kokt fjærfe og annen mat har blitt ødelagt og ufullstendig, det vil si at den opprinnelige matformen har gått tapt (bortsett fra matforgiftningsprøver);
(3) Prøvetakingsmengden er utilstrekkelig etter behov;
For prøver innlevert til kontroll som oppfyller kravene, bør inspeksjonsrommet umiddelbart foreta inspeksjon etter mottak. Hvis betingelsene ikke er oppfylt, bør de oppbevares i et 4°C kjøleskap, forberedes for å skape betingelser i tide, og deretter gjennomføre inspeksjon.
6. Når du inspiserer prøver, utfør passende behandling i henhold til deres forskjellige egenskaper.
(1) Ved inokulering av væskeprøver bør de blandes grundig og inokuleres i henhold til mengden.
(2) For faste prøver, bruk en sterilisert kniv til å kutte ut 25 g av forskjellige deler, plasser dem i 225 ml sterilisert saltvann eller andre løsninger, knus og bland med en homogenisator, og inokuler i henhold til mengden.
(3) Flasker og poser med mat bør åpnes ved sterilisering, og metodene ovenfor bør velges i henhold til egenskapene før inokulering.
Prøvekrav til inspeksjon, registrering og rapportering
1. Etter å ha mottatt prøven, vil inspeksjonsrommet først gjennomføre en utseendeinspeksjon og umiddelbart gjennomføre inspeksjonen i samsvar med nasjonale standard inspeksjonsmetoder. Under inspeksjonsprosessen må aseptiske operasjoner utføres nøye, ansvarlig og strengt for å unngåmikrobielt testresultatforurensning i miljøet.
2. Metodene som er brukt under prøvekontrollprosessen, fenomener og resultater som har oppstått etc. skal skrives inn i skriftlige prøveprotokoller som grunnlag for analyse og vurdering av resultatene. Dokumentene må være detaljerte, klare, autentiske, objektive og må ikke endres eller forfalskes.
?
?
