Sammanfattning av krav på mikrobiologiska tester
2024-01-24 15:14:33
Kraven och stegen förmikrobiologisk testningär följande:
Krav på aseptisk drift:
1.Du måste bära arbetskläder och arbetsmössa när du ympar bakterier.
2. Vid ympning av livsmedelsprover ska speciella arbetskläder, kepsar och tofflor bäras som ska placeras i det sterila rummets buffertrum och användas efter UV-desinfektion före arbetet.
3. När du inokulerar matprover, tvätta händerna med tvål innan du går in i det sterila rummet och torka sedan händerna rena med en bomullstuss med 75 % alkohol.
4. Strån, platta skålar och odlingsmedier som används för ympning måste steriliseras och steriliseras. Oanvända behållare ska inte lämnas oanvända efter att förpackningen har öppnats. Metallredskap bör autoklaveras eller brännas tre gånger med 95 % alkohol före användning.
5. När sugröret tas ut ur förpackningen får sugrörets spets inte vidröra de utsatta delarna. När sugröret används för att inokulera provröret eller plattan får sugrörets spets inte vidröra kanten på provröret eller plattan.
6. Inokulering av prover och överföring av bakterier måste göras framför en alkohollampa. Vid inokulering av bakterier eller prover ska sugröret steriliseras med låga efter att det tagits ut ur förpackningen och provrörets propp har öppnats.
7. Innan inokulering av bakterier ska alla metalltrådar i ympslingan och nålen brännas med en låga, och vid behov ska anslutningen mellan öglan, nålen och staven brännas. Ympningsslingan för inokulering av tuberkulosbakterier och virulenta bakterier ska kokas i kokande vatten i 5 minuter och sedan brännas av låga.
8. När du suger bakterievätska eller prover med sugrör, använd motsvarande gummispets för att suga den, och sug den inte direkt med munnen.
Användningskrav för sterila rum:
1. Fönstren som leder till utsidan av det sterila rummet bör vara dubbelglasade och tätade. De ska inte öppnas efter behag. Det ska finnas ett buffertrum och skjutdörr som motsvarar storleken på sterilrummet. Det bör också finnas ett litet fönster på 0,5~0,7m2. Som förberedelse för att skicka föremål efter att ha kommit in i det sterila rummet.
2. Det sterila rummet ska hållas rent. Efter arbetet ska den desinficeras med 2 % till 3 % kresol tvållösning, arbetsytan ska torkas av och föremål som inte är relaterade till experimentet ska inte förvaras.
3. Dörren till det sterila rummet ska stängas ordentligt före och efter användning, och den ultravioletta lampan ska tändas. Om en inomhus upphängd ultraviolett lampa används för desinfektion krävs en 30W ultraviolett lampa. Avståndet är 1,0 m, och bestrålningstiden är inte mindre än 30 minuter. När du använder ultravioletta lampor bör du vara uppmärksam på att arbeta direkt under ultraviolett ljus för att undvika skador. Lampan måste torkas försiktigt med en bomullstuss i alkohol varannan vecka för att ta bort damm och fett för att minska effekten av ultraviolett penetration.
4. Vid bearbetning och inokulering av livsmedelsprover, gå in i det sterila rummet för drift och får inte gå in eller ut efter behag. Om föremål behöver skickas vidare kan de passeras genom det lilla fönstret.
5. Om luftkonditionering behöver installeras i det sterila rummet, bör det finnas en filtreringsanordning.
Krav på desinfektion och sterilisering
Glasvaror, metallredskap och odlingsmedier som används förmikrobiologisk testning, kontaminerade och inokulerade kulturer etc. måste steriliseras före användning. Torr värme och fuktig värme tryck ångsteriliseringsmetoder.
1. Förberedelse före sterilisering
(1) Alla föremål som behöver steriliseras bör tvättas och torkas först. Glas som sugrör och platta fat bör vara tätt packade med papper. Om metallrör används ska ventilationshålen på dem öppnas.
(2) Linda in proppen på den triangulära kolven som innehåller odlingsmediet i papper, täck provröret och dra ut kärnan av sprutan och slå in den med gasväv.
2. installera
(1) Torrvärmesterilisator: Föremålen får inte vara överfulla och får inte vidröra lådans fyra väggar.
(2) Stor högtrycksångkokare: Placera steriliserade föremål, slå in dem separat och lägg dem direkt i steriliseringscylindern. Överfulla inte föremålen.
3. Utrustningsinspektion
(1) Kontrollera om dörrbrytaren är flexibel, om gummiringen är skadad och om den är platt.
(2) Kontrollera om tryckmätaren stannar i nollläget när ångan är uttömd, stäng dörren och locket, ventilera ut ånga eller värme, och observera om det finns luftläckage, om förhållandena markerade av tryckmätaren och termometern matchar och om rörledningen är blockerad.
(3) För sterilisatorer med automatiska elektroniska programkontrollanordningar bör det specificerade programmet kontrolleras före användning för att se om det uppfyller kraven för sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Metod för torr värmesterilisering:
Denna metod är lämplig för föremål som inte skadas, försämras eller avdunstar under torra värmeförhållanden. Det används oftare för att sterilisera glas, metallprodukter, keramiska produkter etc.
①Instrument och redskap bör tvättas före torrgräddning för att förhindra att smutsen som fästs på ytan förkolas.
② Under sterilisering får föremålen inte vara överfulla, kontakta inte botten och väggen på lådan direkt och lämna mellanrum mellan föremålen.
③ Under steriliseringen, stäng dörren ordentligt, anslut strömförsörjningen, öppna utblåsningshålet i cirka 30 minuter för att avlägsna den kalla luften i sterilisatorn, justera indikatorlampan när temperaturen stiger till 160°C och håll den i 1,5 till 2 timmar.
④Efter avslutad sterilisering eller under temperaturstegringsprocessen måste dörren öppnas under 60°C.
(2) Följande steg bör följas när du använder en bärbar tryckkokare eller vertikal tryckångsterilisator:
① Tillsätt 3L vatten till den bärbara tryckkokarens huvuddel och 16L vatten till den vertikala tryckkokaren (mängden vatten ska fyllas på när det återanvänds och vattnet måste bytas ut om det blir grumligt);
② För en bärbar tryckkokare, för in avgasröret på topplocket i fyrkantsröret på steriliseringskärlets innervägg (sterilisatorer utan slangar eller sådana med korroderade och spruckna slangar får inte användas);
③ Täck topplocket och dra åt det ordentligt för att förhindra luftläckage; placera sterilisatorn på eldkällan för att värma upp, slå på strömmen till den vertikala tryckkokaren och öppna avgasventilen på det övre locket för att släppa ut luften (utblåsluft i 10 till 15 minuter efter att vattnet kokar) );
④Stäng avgasventilen för att höja ångtrycket till de specificerade kraven och bibehåll det under den specificerade tiden (beroende på de steriliserade föremålens karaktär och relevanta omständigheter);
⑤ När den angivna tiden har uppnåtts, för föremål som behöver torkas, öppna omedelbart avgasventilen för att släppa ut ångan. När trycket återgår till noll, kyl det naturligt till 60°C och öppna sedan locket för att ta ut föremålen. Om det är ett flytande föremål, öppna inte avgasventilen. Grytan ska omedelbart tas bort från värmekällan och tillåtas svalna naturligt tills trycket återgår till noll och temperaturen sjunker under 60°C innan locket öppnas för att ta ut innehållet för att förhindra plötslig dekompression av vätskan från våldsam kokning eller explosion av behållaren.
(3) Följ följande steg för att använda den horisontella tryckkokarens ångsterilisator:
①Stäng grytdörren ordentligt, öppna luftinloppsventilen, för in ånga i mezzaninen för förvärmning, och den kalla luften i mezzaninen kommer automatiskt att släppas ut genom luftbarriären;
②Efter att mellanskiktet har nått den förutbestämda temperaturen, öppna grytkammarens luftinloppsventil, för in ångan i grytkammaren, och den kalla luften i grytkammaren kommer automatiskt att släppas ut genom grytkammarens luftavledare;
③När trycket och temperaturen i grytkammaren når det specificerade trycket, justera luftinloppsventilen för att hålla den konstant;
④ Kyl temperaturen naturligt eller artificiellt till 60 ℃ innan du öppnar dörren för att ta ut föremålen. Använd inte metoden för snabb ångutmatning för att förhindra plötsligt tryckfall, våldsam kokning av vätskan eller explosion av behållaren;
⑤ När du använder ett automatiskt program-kontrollerat tryck ångsterilisator, efter att ha placerat föremålen och stängt dörren ordentligt, ska motsvarande strömbrytare tryckas in enligt kategorin av föremålen så att steriliseringen kan utföras automatiskt enligt de nödvändiga procedurerna. Under steriliseringen måste det bifogade instrumentet användas för att registrera temperatur och tid. För framtida referens bör driftkraven vara strikt i enlighet med tillverkarens instruktioner;
5. Steriliseringstemperatur och tid
(1) Steriliseringstemperaturen för torr värmesterilisator är 160 ℃, 1,5 ~ 2 timmar.
(2) Steriliseringstemperatur och tid för tryckångsterilisator
Intermittent steriliseringsmetod
1. Steriliseringsmetod:
Använd ångsterilisering utan tryck. Vissa ämnen förstörs lätt genom högtrycksångsterilisering, så denna metod kan användas för sterilisering.
(1) Placera föremålen som ska steriliseras i krukan, täck över locket, öppna avloppsutloppet och töm bort det återstående vattnet i krukan.
(2) Stäng avloppsutloppet, öppna luftintagsluckan och desinficera i 10 till 20 minuter efter behov.
(3) När steriliseringen är klar, stäng luftintagsluckan, ta ut föremålen och vänta tills de svalnar till rumstemperatur, lägg dem i en 37°C inkubator över natten och fortsätt att sterilisera enligt ovanstående metod nästa dag. Gör detta tre gånger för att uppnå syftet med sterilisering.
2. Hur man använder serumkoagulatorn:
När odlingsmediet innehåller speciella ingredienser som serum eller ägg kommer hög värme att förstöra dess näringsämnen. Därför kan låg temperatur användas för att koagulera serumet och uppnå steriliseringsändamål:
(1) När serum som steriliserats med denna metod används för att alikvotera, måste aseptiska operationer följas strikt, och provrör och plattor måste också steriliseras före användning;
(2) Gör odlingsmediet till en sluttning eller högt lager efter behov. Efter att ha tillsatt tillräckligt med vatten, anslut strömförsörjningen, höj temperaturen till 75~90°C i en timme och sterilisera den sedan. Placera den i en 37°C inkubator över natten och sterilisera den sedan tre gånger.
3. Koka och desinficera:
Du kan använda en kokande kastrull eller kokande sterilisator. När vattnet kokar, koka det i 5 till 15 minuter. Du kan också tillsätta 2% karbolsyra i vattnet och koka det i 5 minuter. Tillsätt 0,02 % formaldehyd och koka den vid 80°C i 60 minuter för att uppnå syftet med sterilisering. Koksterilisering kan dock uppnås. När du använder förstärkare bör du vara uppmärksam på föremålens frätande egenskaper.
4. Steriliseringsbehandling:
Efter sterilisering är föremål redan sterila under normala omständigheter. De bör inspekteras noggrant och placeras när de tas ut ur sterilisatorn för att undvika återkontamination;
(1) Ta ut föremålen och kontrollera omedelbart förpackningens integritet. Om det finns skador eller tampongen tas bort kan den inte användas som sterila föremål;
(2) Föremålen som tas ut kan inte användas som sterila föremål om deras förpackning uppenbarligen är indränkt i vatten;
(3) Odlingsmediet eller reagenserna bör kontrolleras för att se om de uppfyller färgen eller tillståndet efter sterilisering. De som inte uppfyller kraven ska kasseras;
(4) För öppna-stängda behållare bör silhålen vara stängda när de tas ut;
(5) Om de borttagna föremålen faller till marken, förläggs på en oren plats eller är fläckiga med vatten, anses de vara förorenade och kan inte användas som sterila föremål;
(6) De kvalificerade steriliserade föremålen som tas ut bör förvaras i förvaringsrummet eller det dammsäkra skåpet, och det är strängt förbjudet att blanda dem med oseriliserade föremål;
(7) Alla kvalificerade föremål ska märkas med steriliseringsdatum och utgångsdatum;
(8) När varje sats av steriliseringsbearbetning har slutförts, registrera namn, kvantitet, temperatur, tid och operatör för de steriliserade produkterna.
Krav för behandling av giftigt och bakteriellt avfall
Experimentell utrustning och kulturer som används i mikrobiologiska experiment får inte tas ut från laboratoriet utan desinfektion.
1. Odlat förorenat material och avfall bör placeras i täta behållare eller trådkorgar och förvaras centralt på anvisade platser tills de är enhetligt autoklaverade.
2. Kulturer kontaminerade av mikroorganismer måste autoklaveras vid 121°C i 30 minuter.
3. Efter användning ska de kontaminerade sugrören läggas i 5 % kreol-tvållösning eller karbolsyralösning, blötläggas i minst 24 timmar (desinfektionsvätskan får inte vara lägre än blötläggningshöjden), och sedan steriliseras med högt tryck vid 121°C i 30 minuter.
4. Vätskan för färgning och sköljning av fläckar kan i allmänhet spolas direkt i avloppet. Sköljvätskan för virulenta bakterier ska spolas i en bägare och steriliseras med högt tryck innan den hälls i avloppet. De färgade objektglasen läggs i 5% kresol tvållösning. Efter blötläggning i vatten i 24 timmar, koka och tvätta. Objektglasen eller skålarna som används för agglutinationstestning måste autoklaveras och sedan tvättas.
5. Efter att ha brutit odlingen, spraya och blötlägg omedelbart de kontaminerade delarna med 5 % kresol tvållösning eller karbolsyralösning, blöt i en halvtimme och torka sedan rent.
Förorenade arbetskläder eller arbetskläder, kepsar, masker etc. som bärs för våldsamma tester bör läggas i speciella desinfektionspåsar och steriliseras med högtryck innan de tvättas.
Medium förberedelsekrav
Kvaliteten på beredningen av odlingsmedium kommer direkt att påverka tillväxten av mikroorganismer, eftersom olika mikroorganismer har olika näringsbehov och olika odlingsändamål. Beredningskraven för olika odlingsmedier är följande:
1. Väg ingredienserna enligt mediumformeln och lös dem sedan i destillerat vatten. Kvaliteten på de applicerade reagenserna och läkemedlen bör inspekteras före användning.
2. pH-mätning och -justering: pH-mätning bör utföras när odlingsmediet kyls till rumstemperatur, eftersom det finns en viss skillnad i pH under varma eller kalla förhållanden. När mätningen är klar, tillsätt alkali eller syra enligt den beräknade mängden och blanda väl. Bör testas igen. Odlingsmediets pH-värde måste vara korrekt, annars kommer det att påverka tillväxten av mikroorganismer eller påverka observationen av resultat. Det bör dock noteras att högtryckssterilisering kan påverka sänkningen eller ökningen av pH i vissa odlingsmedier, så det är inte tillrådligt att sterilisera vid för högt tryck eller för många gånger för att undvika att påverka kvaliteten på odlingsmediet. Indikatorer, natrium deoxycholat, agar, etc. är i allmänhet Lägg till det efter justering av pH.
3. Odlingsmediet måste hållas rent för att underlätta observation av bakterietillväxt. Efter att odlingsmediet har värmts upp och kokat kan det filtreras med absorberande bomull eller flanell för att avlägsna sediment. Vid behov kan det klaras med äggvita. De använda agarremsorna måste tvättas och torkas i förväg. Före användning, undvik att påverka transparensen på grund av föroreningar i agaren.
4. Järn, koppar och andra behållare bör inte användas för att hålla odlingsmediet. Det är bättre att använda rena neutrala hårdglasbehållare.
5. Steriliseringen av odlingsmediet måste inte bara uppnå syftet med fullständig sterilisering, utan också vara uppmärksam på att inte minska dess näringsvärde på grund av uppvärmning. I allmänhet är 121°C i 15 minuter tillräckligt. För odlingsmedier som innehåller ämnen som är intoleranta mot hög värme, såsom socker och serum, bör gelatin etc. steriliseras med låg temperatur eller intermittent metod. Vissa reagenser som inte kan värmas, såsom kaliumtellurit, äggula, TTC, antibiotika, etc., bör kylas till cirka 50°C efter att den grundläggande agaren autoklaverats och sedan tillsatts;
6. Efter att varje sats av odlingsmedier har preparerats, bör ett sterilt tillväxttest och ett tillväxttest av de testade stammarna utföras. Om det är ett biokemiskt odlingsmedium, använd standardbakteriestammar för inokulering och odling, och observera de biokemiska reaktionsresultaten. Det bör visa en normal reaktion. Odlingsmediet bör inte förvaras för länge. Vid behov kan den förvaras i 4°C kyl.
7. För närvarande finns det många typer av torrodlingsmedier. Varje batch måste använda standardstammar för tillväxttest eller biokemisk reaktionsobservation. Olika odlingsmedier kan användas först efter att tillväxttestet för motsvarande stammar är bra. Nyinköpta eller torkade som lagrats länge kan användas. Odlingsmediets pH bör också mätas vid beredningen, och dosering och metod ska följas enligt produktinstruktionerna.
8. De kemiska reagenserna, steriliseringsförhållandena, resultat från stamtillväxttest och produktionspersonal som används i varje sats av förberedda odlingsmedier bör registreras för förfrågningar.
Krav på provinsamling och bearbetning
1. De insamlade kontrollproverna måste vara representativa. Vid provtagning bör råvarorna, bearbetningen, transporten, lagringsmetoderna och förhållandena för partiet av livsmedel, de omgivande miljöförhållandena etc. undersökas i detalj för att kontrollera om det finns några kontamineringskällor.
2. Beroende på typ och kvantitet av livsmedel bör provtagningsmängden och -metoden utföras i enlighet med kraven för standardinspektionsmetoder.
3. Var uppmärksam på aseptisk drift vid provtagning, och behållaren måste steriliseras för att undvika mikrobiell kontaminering i miljön. Behållaren får inte steriliseras med creosal tvållösning, sterilisering med klormetionin, alkohol och andra desinfektionsmedel, och den får inte innehålla sådana desinfektionsmedel eller antibiotika. För att undvika att mikroorganismer i provet dödas måste saxar, knivar och skedar också steriliseras före användning.
4. Prover ska skickas till kontrollrummet för kontroll omedelbart efter insamling. Inspektionsprocessen överstiger vanligtvis inte 3 timmar. Om avståndet är långt kan det förvaras i en miljö på 1 ~ 5 ℃. Om den behöver frysas bör den förvaras i fryst tillstånd. Lämna in för besiktning.
5. Efter att ha mottagit provet kommer kontrollrummet att registrera det (provnamn, enhet för kontroll, kvantitet, datum, antal etc.) och observera provets utseende. Om något av följande villkor upptäcks kan inspektionen vägras:
(1) Prover som har steriliserats med särskilda högtrycks-, koknings- eller andra metoder kommer att förlora sin betydelse för att representera det ursprungliga livsmedlet;
(2) Flaskor och påsar med mat har öppnats, tillagat kött och dess produkter, tillagat fjäderfä och andra livsmedel har gått sönder och ofullständiga, det vill säga den ursprungliga matformen har gått förlorad (förutom matförgiftningsprover);
(3) Provtagningskvantiteten är otillräcklig som krävs.
För prover som lämnas in för besiktning som uppfyller kraven bör besiktningsrummet omedelbart genomföra besiktning efter mottagandet. Om villkoren inte uppfylls bör de förvaras i ett 4°C kylskåp, förbereda för att skapa förutsättningar i tid och sedan genomföra inspektion.
6. När du inspekterar prover, utför lämplig bearbetning enligt deras olika egenskaper.
(1) Vid inokulering av flytande prover bör de blandas noggrant och inokuleras enligt mängden.
(2) För fasta prover, använd en steriliserad kniv för att skära ut 25 g av olika delar, placera dem i 225 ml steriliserad koksaltlösning eller andra lösningar, krossa och blanda med en homogenisator och inokulera enligt mängden.
(3) Flaskor och påsar med mat bör öppnas genom sterilisering, och ovanstående metoder bör väljas enligt egenskaperna före ympning.
Provbesiktning, registrering och rapporteringskrav
1. Efter att ha tagit emot provet kommer inspektionsrummet först att genomföra en utseendeinspektion och omedelbart utföra inspektionen i enlighet med nationella standardinspektionsmetoder. Under inspektionsprocessen måste aseptiska operationer utföras noggrant, ansvarsfullt och strikt för att undvikamikrobiellt testresultatförorening i miljön.
2. De metoder som använts under provbesiktningsprocessen, företeelser och resultat som inträffat etc. ska skrivas in i skriftliga provprotokoll som underlag för analys och bedömning av resultaten. Dokumenten måste vara detaljerade, tydliga, autentiska, objektiva och får inte ändras eller förfalskas.
.
.
Krav på aseptisk drift:
1.Du måste bära arbetskläder och arbetsmössa när du ympar bakterier.
2. Vid ympning av livsmedelsprover ska speciella arbetskläder, kepsar och tofflor bäras som ska placeras i det sterila rummets buffertrum och användas efter UV-desinfektion före arbetet.
3. När du inokulerar matprover, tvätta händerna med tvål innan du går in i det sterila rummet och torka sedan händerna rena med en bomullstuss med 75 % alkohol.
4. Strån, platta skålar och odlingsmedier som används för ympning måste steriliseras och steriliseras. Oanvända behållare ska inte lämnas oanvända efter att förpackningen har öppnats. Metallredskap bör autoklaveras eller brännas tre gånger med 95 % alkohol före användning.
5. När sugröret tas ut ur förpackningen får sugrörets spets inte vidröra de utsatta delarna. När sugröret används för att inokulera provröret eller plattan får sugrörets spets inte vidröra kanten på provröret eller plattan.
6. Inokulering av prover och överföring av bakterier måste göras framför en alkohollampa. Vid inokulering av bakterier eller prover ska sugröret steriliseras med låga efter att det tagits ut ur förpackningen och provrörets propp har öppnats.
7. Innan inokulering av bakterier ska alla metalltrådar i ympslingan och nålen brännas med en låga, och vid behov ska anslutningen mellan öglan, nålen och staven brännas. Ympningsslingan för inokulering av tuberkulosbakterier och virulenta bakterier ska kokas i kokande vatten i 5 minuter och sedan brännas av låga.
8. När du suger bakterievätska eller prover med sugrör, använd motsvarande gummispets för att suga den, och sug den inte direkt med munnen.
Användningskrav för sterila rum:
1. Fönstren som leder till utsidan av det sterila rummet bör vara dubbelglasade och tätade. De ska inte öppnas efter behag. Det ska finnas ett buffertrum och skjutdörr som motsvarar storleken på sterilrummet. Det bör också finnas ett litet fönster på 0,5~0,7m2. Som förberedelse för att skicka föremål efter att ha kommit in i det sterila rummet.
2. Det sterila rummet ska hållas rent. Efter arbetet ska den desinficeras med 2 % till 3 % kresol tvållösning, arbetsytan ska torkas av och föremål som inte är relaterade till experimentet ska inte förvaras.
3. Dörren till det sterila rummet ska stängas ordentligt före och efter användning, och den ultravioletta lampan ska tändas. Om en inomhus upphängd ultraviolett lampa används för desinfektion krävs en 30W ultraviolett lampa. Avståndet är 1,0 m, och bestrålningstiden är inte mindre än 30 minuter. När du använder ultravioletta lampor bör du vara uppmärksam på att arbeta direkt under ultraviolett ljus för att undvika skador. Lampan måste torkas försiktigt med en bomullstuss i alkohol varannan vecka för att ta bort damm och fett för att minska effekten av ultraviolett penetration.
4. Vid bearbetning och inokulering av livsmedelsprover, gå in i det sterila rummet för drift och får inte gå in eller ut efter behag. Om föremål behöver skickas vidare kan de passeras genom det lilla fönstret.
5. Om luftkonditionering behöver installeras i det sterila rummet, bör det finnas en filtreringsanordning.
Krav på desinfektion och sterilisering
Glasvaror, metallredskap och odlingsmedier som används förmikrobiologisk testning, kontaminerade och inokulerade kulturer etc. måste steriliseras före användning. Torr värme och fuktig värme tryck ångsteriliseringsmetoder.
1. Förberedelse före sterilisering
(1) Alla föremål som behöver steriliseras bör tvättas och torkas först. Glas som sugrör och platta fat bör vara tätt packade med papper. Om metallrör används ska ventilationshålen på dem öppnas.
(2) Linda in proppen på den triangulära kolven som innehåller odlingsmediet i papper, täck provröret och dra ut kärnan av sprutan och slå in den med gasväv.
2. installera
(1) Torrvärmesterilisator: Föremålen får inte vara överfulla och får inte vidröra lådans fyra väggar.
(2) Stor högtrycksångkokare: Placera steriliserade föremål, slå in dem separat och lägg dem direkt i steriliseringscylindern. Överfulla inte föremålen.
3. Utrustningsinspektion
(1) Kontrollera om dörrbrytaren är flexibel, om gummiringen är skadad och om den är platt.
(2) Kontrollera om tryckmätaren stannar i nollläget när ångan är uttömd, stäng dörren och locket, ventilera ut ånga eller värme, och observera om det finns luftläckage, om förhållandena markerade av tryckmätaren och termometern matchar och om rörledningen är blockerad.
(3) För sterilisatorer med automatiska elektroniska programkontrollanordningar bör det specificerade programmet kontrolleras före användning för att se om det uppfyller kraven för sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Metod för torr värmesterilisering:
Denna metod är lämplig för föremål som inte skadas, försämras eller avdunstar under torra värmeförhållanden. Det används oftare för att sterilisera glas, metallprodukter, keramiska produkter etc.
①Instrument och redskap bör tvättas före torrgräddning för att förhindra att smutsen som fästs på ytan förkolas.
② Under sterilisering får föremålen inte vara överfulla, kontakta inte botten och väggen på lådan direkt och lämna mellanrum mellan föremålen.
③ Under steriliseringen, stäng dörren ordentligt, anslut strömförsörjningen, öppna utblåsningshålet i cirka 30 minuter för att avlägsna den kalla luften i sterilisatorn, justera indikatorlampan när temperaturen stiger till 160°C och håll den i 1,5 till 2 timmar.
④Efter avslutad sterilisering eller under temperaturstegringsprocessen måste dörren öppnas under 60°C.
(2) Följande steg bör följas när du använder en bärbar tryckkokare eller vertikal tryckångsterilisator:
① Tillsätt 3L vatten till den bärbara tryckkokarens huvuddel och 16L vatten till den vertikala tryckkokaren (mängden vatten ska fyllas på när det återanvänds och vattnet måste bytas ut om det blir grumligt);
② För en bärbar tryckkokare, för in avgasröret på topplocket i fyrkantsröret på steriliseringskärlets innervägg (sterilisatorer utan slangar eller sådana med korroderade och spruckna slangar får inte användas);
③ Täck topplocket och dra åt det ordentligt för att förhindra luftläckage; placera sterilisatorn på eldkällan för att värma upp, slå på strömmen till den vertikala tryckkokaren och öppna avgasventilen på det övre locket för att släppa ut luften (utblåsluft i 10 till 15 minuter efter att vattnet kokar) );
④Stäng avgasventilen för att höja ångtrycket till de specificerade kraven och bibehåll det under den specificerade tiden (beroende på de steriliserade föremålens karaktär och relevanta omständigheter);
⑤ När den angivna tiden har uppnåtts, för föremål som behöver torkas, öppna omedelbart avgasventilen för att släppa ut ångan. När trycket återgår till noll, kyl det naturligt till 60°C och öppna sedan locket för att ta ut föremålen. Om det är ett flytande föremål, öppna inte avgasventilen. Grytan ska omedelbart tas bort från värmekällan och tillåtas svalna naturligt tills trycket återgår till noll och temperaturen sjunker under 60°C innan locket öppnas för att ta ut innehållet för att förhindra plötslig dekompression av vätskan från våldsam kokning eller explosion av behållaren.
(3) Följ följande steg för att använda den horisontella tryckkokarens ångsterilisator:
①Stäng grytdörren ordentligt, öppna luftinloppsventilen, för in ånga i mezzaninen för förvärmning, och den kalla luften i mezzaninen kommer automatiskt att släppas ut genom luftbarriären;
②Efter att mellanskiktet har nått den förutbestämda temperaturen, öppna grytkammarens luftinloppsventil, för in ångan i grytkammaren, och den kalla luften i grytkammaren kommer automatiskt att släppas ut genom grytkammarens luftavledare;
③När trycket och temperaturen i grytkammaren når det specificerade trycket, justera luftinloppsventilen för att hålla den konstant;
④ Kyl temperaturen naturligt eller artificiellt till 60 ℃ innan du öppnar dörren för att ta ut föremålen. Använd inte metoden för snabb ångutmatning för att förhindra plötsligt tryckfall, våldsam kokning av vätskan eller explosion av behållaren;
⑤ När du använder ett automatiskt program-kontrollerat tryck ångsterilisator, efter att ha placerat föremålen och stängt dörren ordentligt, ska motsvarande strömbrytare tryckas in enligt kategorin av föremålen så att steriliseringen kan utföras automatiskt enligt de nödvändiga procedurerna. Under steriliseringen måste det bifogade instrumentet användas för att registrera temperatur och tid. För framtida referens bör driftkraven vara strikt i enlighet med tillverkarens instruktioner;
5. Steriliseringstemperatur och tid
(1) Steriliseringstemperaturen för torr värmesterilisator är 160 ℃, 1,5 ~ 2 timmar.
(2) Steriliseringstemperatur och tid för tryckångsterilisator
Intermittent steriliseringsmetod
1. Steriliseringsmetod:
Använd ångsterilisering utan tryck. Vissa ämnen förstörs lätt genom högtrycksångsterilisering, så denna metod kan användas för sterilisering.
(1) Placera föremålen som ska steriliseras i krukan, täck över locket, öppna avloppsutloppet och töm bort det återstående vattnet i krukan.
(2) Stäng avloppsutloppet, öppna luftintagsluckan och desinficera i 10 till 20 minuter efter behov.
(3) När steriliseringen är klar, stäng luftintagsluckan, ta ut föremålen och vänta tills de svalnar till rumstemperatur, lägg dem i en 37°C inkubator över natten och fortsätt att sterilisera enligt ovanstående metod nästa dag. Gör detta tre gånger för att uppnå syftet med sterilisering.
2. Hur man använder serumkoagulatorn:
När odlingsmediet innehåller speciella ingredienser som serum eller ägg kommer hög värme att förstöra dess näringsämnen. Därför kan låg temperatur användas för att koagulera serumet och uppnå steriliseringsändamål:
(1) När serum som steriliserats med denna metod används för att alikvotera, måste aseptiska operationer följas strikt, och provrör och plattor måste också steriliseras före användning;
(2) Gör odlingsmediet till en sluttning eller högt lager efter behov. Efter att ha tillsatt tillräckligt med vatten, anslut strömförsörjningen, höj temperaturen till 75~90°C i en timme och sterilisera den sedan. Placera den i en 37°C inkubator över natten och sterilisera den sedan tre gånger.
3. Koka och desinficera:
Du kan använda en kokande kastrull eller kokande sterilisator. När vattnet kokar, koka det i 5 till 15 minuter. Du kan också tillsätta 2% karbolsyra i vattnet och koka det i 5 minuter. Tillsätt 0,02 % formaldehyd och koka den vid 80°C i 60 minuter för att uppnå syftet med sterilisering. Koksterilisering kan dock uppnås. När du använder förstärkare bör du vara uppmärksam på föremålens frätande egenskaper.
4. Steriliseringsbehandling:
Efter sterilisering är föremål redan sterila under normala omständigheter. De bör inspekteras noggrant och placeras när de tas ut ur sterilisatorn för att undvika återkontamination;
(1) Ta ut föremålen och kontrollera omedelbart förpackningens integritet. Om det finns skador eller tampongen tas bort kan den inte användas som sterila föremål;
(2) Föremålen som tas ut kan inte användas som sterila föremål om deras förpackning uppenbarligen är indränkt i vatten;
(3) Odlingsmediet eller reagenserna bör kontrolleras för att se om de uppfyller färgen eller tillståndet efter sterilisering. De som inte uppfyller kraven ska kasseras;
(4) För öppna-stängda behållare bör silhålen vara stängda när de tas ut;
(5) Om de borttagna föremålen faller till marken, förläggs på en oren plats eller är fläckiga med vatten, anses de vara förorenade och kan inte användas som sterila föremål;
(6) De kvalificerade steriliserade föremålen som tas ut bör förvaras i förvaringsrummet eller det dammsäkra skåpet, och det är strängt förbjudet att blanda dem med oseriliserade föremål;
(7) Alla kvalificerade föremål ska märkas med steriliseringsdatum och utgångsdatum;
(8) När varje sats av steriliseringsbearbetning har slutförts, registrera namn, kvantitet, temperatur, tid och operatör för de steriliserade produkterna.
Krav för behandling av giftigt och bakteriellt avfall
Experimentell utrustning och kulturer som används i mikrobiologiska experiment får inte tas ut från laboratoriet utan desinfektion.
1. Odlat förorenat material och avfall bör placeras i täta behållare eller trådkorgar och förvaras centralt på anvisade platser tills de är enhetligt autoklaverade.
2. Kulturer kontaminerade av mikroorganismer måste autoklaveras vid 121°C i 30 minuter.
3. Efter användning ska de kontaminerade sugrören läggas i 5 % kreol-tvållösning eller karbolsyralösning, blötläggas i minst 24 timmar (desinfektionsvätskan får inte vara lägre än blötläggningshöjden), och sedan steriliseras med högt tryck vid 121°C i 30 minuter.
4. Vätskan för färgning och sköljning av fläckar kan i allmänhet spolas direkt i avloppet. Sköljvätskan för virulenta bakterier ska spolas i en bägare och steriliseras med högt tryck innan den hälls i avloppet. De färgade objektglasen läggs i 5% kresol tvållösning. Efter blötläggning i vatten i 24 timmar, koka och tvätta. Objektglasen eller skålarna som används för agglutinationstestning måste autoklaveras och sedan tvättas.
5. Efter att ha brutit odlingen, spraya och blötlägg omedelbart de kontaminerade delarna med 5 % kresol tvållösning eller karbolsyralösning, blöt i en halvtimme och torka sedan rent.
Förorenade arbetskläder eller arbetskläder, kepsar, masker etc. som bärs för våldsamma tester bör läggas i speciella desinfektionspåsar och steriliseras med högtryck innan de tvättas.
Medium förberedelsekrav
Kvaliteten på beredningen av odlingsmedium kommer direkt att påverka tillväxten av mikroorganismer, eftersom olika mikroorganismer har olika näringsbehov och olika odlingsändamål. Beredningskraven för olika odlingsmedier är följande:
1. Väg ingredienserna enligt mediumformeln och lös dem sedan i destillerat vatten. Kvaliteten på de applicerade reagenserna och läkemedlen bör inspekteras före användning.
2. pH-mätning och -justering: pH-mätning bör utföras när odlingsmediet kyls till rumstemperatur, eftersom det finns en viss skillnad i pH under varma eller kalla förhållanden. När mätningen är klar, tillsätt alkali eller syra enligt den beräknade mängden och blanda väl. Bör testas igen. Odlingsmediets pH-värde måste vara korrekt, annars kommer det att påverka tillväxten av mikroorganismer eller påverka observationen av resultat. Det bör dock noteras att högtryckssterilisering kan påverka sänkningen eller ökningen av pH i vissa odlingsmedier, så det är inte tillrådligt att sterilisera vid för högt tryck eller för många gånger för att undvika att påverka kvaliteten på odlingsmediet. Indikatorer, natrium deoxycholat, agar, etc. är i allmänhet Lägg till det efter justering av pH.
3. Odlingsmediet måste hållas rent för att underlätta observation av bakterietillväxt. Efter att odlingsmediet har värmts upp och kokat kan det filtreras med absorberande bomull eller flanell för att avlägsna sediment. Vid behov kan det klaras med äggvita. De använda agarremsorna måste tvättas och torkas i förväg. Före användning, undvik att påverka transparensen på grund av föroreningar i agaren.
4. Järn, koppar och andra behållare bör inte användas för att hålla odlingsmediet. Det är bättre att använda rena neutrala hårdglasbehållare.
5. Steriliseringen av odlingsmediet måste inte bara uppnå syftet med fullständig sterilisering, utan också vara uppmärksam på att inte minska dess näringsvärde på grund av uppvärmning. I allmänhet är 121°C i 15 minuter tillräckligt. För odlingsmedier som innehåller ämnen som är intoleranta mot hög värme, såsom socker och serum, bör gelatin etc. steriliseras med låg temperatur eller intermittent metod. Vissa reagenser som inte kan värmas, såsom kaliumtellurit, äggula, TTC, antibiotika, etc., bör kylas till cirka 50°C efter att den grundläggande agaren autoklaverats och sedan tillsatts;
6. Efter att varje sats av odlingsmedier har preparerats, bör ett sterilt tillväxttest och ett tillväxttest av de testade stammarna utföras. Om det är ett biokemiskt odlingsmedium, använd standardbakteriestammar för inokulering och odling, och observera de biokemiska reaktionsresultaten. Det bör visa en normal reaktion. Odlingsmediet bör inte förvaras för länge. Vid behov kan den förvaras i 4°C kyl.
7. För närvarande finns det många typer av torrodlingsmedier. Varje batch måste använda standardstammar för tillväxttest eller biokemisk reaktionsobservation. Olika odlingsmedier kan användas först efter att tillväxttestet för motsvarande stammar är bra. Nyinköpta eller torkade som lagrats länge kan användas. Odlingsmediets pH bör också mätas vid beredningen, och dosering och metod ska följas enligt produktinstruktionerna.
8. De kemiska reagenserna, steriliseringsförhållandena, resultat från stamtillväxttest och produktionspersonal som används i varje sats av förberedda odlingsmedier bör registreras för förfrågningar.
Krav på provinsamling och bearbetning
1. De insamlade kontrollproverna måste vara representativa. Vid provtagning bör råvarorna, bearbetningen, transporten, lagringsmetoderna och förhållandena för partiet av livsmedel, de omgivande miljöförhållandena etc. undersökas i detalj för att kontrollera om det finns några kontamineringskällor.
2. Beroende på typ och kvantitet av livsmedel bör provtagningsmängden och -metoden utföras i enlighet med kraven för standardinspektionsmetoder.
3. Var uppmärksam på aseptisk drift vid provtagning, och behållaren måste steriliseras för att undvika mikrobiell kontaminering i miljön. Behållaren får inte steriliseras med creosal tvållösning, sterilisering med klormetionin, alkohol och andra desinfektionsmedel, och den får inte innehålla sådana desinfektionsmedel eller antibiotika. För att undvika att mikroorganismer i provet dödas måste saxar, knivar och skedar också steriliseras före användning.
4. Prover ska skickas till kontrollrummet för kontroll omedelbart efter insamling. Inspektionsprocessen överstiger vanligtvis inte 3 timmar. Om avståndet är långt kan det förvaras i en miljö på 1 ~ 5 ℃. Om den behöver frysas bör den förvaras i fryst tillstånd. Lämna in för besiktning.
5. Efter att ha mottagit provet kommer kontrollrummet att registrera det (provnamn, enhet för kontroll, kvantitet, datum, antal etc.) och observera provets utseende. Om något av följande villkor upptäcks kan inspektionen vägras:
(1) Prover som har steriliserats med särskilda högtrycks-, koknings- eller andra metoder kommer att förlora sin betydelse för att representera det ursprungliga livsmedlet;
(2) Flaskor och påsar med mat har öppnats, tillagat kött och dess produkter, tillagat fjäderfä och andra livsmedel har gått sönder och ofullständiga, det vill säga den ursprungliga matformen har gått förlorad (förutom matförgiftningsprover);
(3) Provtagningskvantiteten är otillräcklig som krävs.
För prover som lämnas in för besiktning som uppfyller kraven bör besiktningsrummet omedelbart genomföra besiktning efter mottagandet. Om villkoren inte uppfylls bör de förvaras i ett 4°C kylskåp, förbereda för att skapa förutsättningar i tid och sedan genomföra inspektion.
6. När du inspekterar prover, utför lämplig bearbetning enligt deras olika egenskaper.
(1) Vid inokulering av flytande prover bör de blandas noggrant och inokuleras enligt mängden.
(2) För fasta prover, använd en steriliserad kniv för att skära ut 25 g av olika delar, placera dem i 225 ml steriliserad koksaltlösning eller andra lösningar, krossa och blanda med en homogenisator och inokulera enligt mängden.
(3) Flaskor och påsar med mat bör öppnas genom sterilisering, och ovanstående metoder bör väljas enligt egenskaperna före ympning.
Provbesiktning, registrering och rapporteringskrav
1. Efter att ha tagit emot provet kommer inspektionsrummet först att genomföra en utseendeinspektion och omedelbart utföra inspektionen i enlighet med nationella standardinspektionsmetoder. Under inspektionsprocessen måste aseptiska operationer utföras noggrant, ansvarsfullt och strikt för att undvikamikrobiellt testresultatförorening i miljön.
2. De metoder som använts under provbesiktningsprocessen, företeelser och resultat som inträffat etc. ska skrivas in i skriftliga provprotokoll som underlag för analys och bedömning av resultaten. Dokumenten måste vara detaljerade, tydliga, autentiska, objektiva och får inte ändras eller förfalskas.
.
.
