Ringkesan syarat tés mikrobiologis
2024-01-24 15:14:33
Sarat jeung léngkah pikeuntés mikrobiologisnyaéta kieu:
Syarat operasi aseptik:
1. Anjeun kudu maké baju gawé jeung cap gawé nalika inokulasi baktéri.
2. Nalika inokulasi sampel kadaharan, baju gawé husus, caps na slippers kudu dipaké, nu kudu ditempatkeun di kamar panyangga kamar steril sarta dipaké sanggeus disinfection UV saméméh gawé.
3. Nalika inokulasi sampel kadaharan, ngumbah leungeun Anjeun ku sabun saméméh asup ka kamar steril, lajeng usap leungeun Anjeun beresih jeung 75% bal kapas alkohol.
4. Jarami, piring datar sareng média budaya anu dianggo pikeun inokulasi kedah disterilisasi sareng disterilisasi. Wadah anu henteu kapake teu kedah ditinggalkeun henteu dianggo saatos muka bungkusan. Parabot logam kedah diautoklaf atanapi dibakar tilu kali nganggo alkohol 95% sateuacan dianggo.
5. Nalika nyandak jarami kaluar tina bungkusan, ujung jarami henteu kedah nyabak bagian anu kakeunaan. Nalika nganggo jarami pikeun inokulasi tabung uji atanapi piring, ujung jarami henteu kedah nyabak kana ujung tabung uji atanapi piring.
6. Inoculating sampel sarta mindahkeun baktéri kudu dipigawé di hareup lampu alkohol. Nalika inokulasi baktéri atanapi conto, jarami kedah disterilisasi ku seuneu saatos nyandak kaluar tina bungkusan sareng muka tutup tabung uji.
7. Sateuacan inokulasi baktéri, sadaya kawat logam tina loop inokulasi jeung jarum kudu dibeuleum ku seuneu, sarta lamun perlu, sambungan antara loop, jarum jeung rod kudu dibeuleum. Gelung inokulasi pikeun inokulasi baktéri tuberkulosis sareng baktéri virulen kedah digodog dina cai anu ngagolak salami 5 menit, teras Diduruk ku seuneu.
8. Nalika nyusu cair baktéri atawa sampel kalawan jarami a, make ujung karét pakait pikeun nyedot eta, sarta ulah nyeuseup eta langsung jeung sungut anjeun.
Syarat pamakéan kamar steril:
1. Jandela nu nuju ka luar kamar steril kudu ganda-glazed tur disegel. Aranjeunna teu kedah dibuka di will. Kedah aya kamar panyangga sareng panto geser anu cocog sareng ukuran kamar steril. Ogé kudu aya jandela leutik 0,5 ~ 0,7m2. Dina préparasi ngaliwatan item sanggeus asup ka kamar steril.
2. Kamar steril kudu tetep beresih. Saatos damel, éta kedah disinfeksi ku 2% dugi ka 3% larutan sabun cresol, permukaan padamelan kedah diusap, sareng barang-barang anu teu aya hubunganana sareng percobaan henteu kedah disimpen.
3. Panto kamar steril kudu ditutup pageuh saméméh jeung sanggeus pamakéan, sarta lampu ultraviolét kudu dihurungkeun. Upami lampu ultraviolét digantung di jero ruangan dianggo pikeun disinfeksi, lampu ultraviolét 30W diperyogikeun. Jarakna 1.0m, sareng waktos iradiasi henteu kirang ti 30 menit. Lamun maké lampu ultraviolet, perhatian kudu dibayar ka Beroperasi langsung dina sinar ultraviolét pikeun ngahindarkeun karuksakan. Lampu kudu diusap lembut ku bal kapas alkohol unggal dua minggu pikeun ngaleungitkeun lebu sareng gajih pikeun ngirangan dampak penetrasi sinar ultraviolét.
4. Nalika ngolah jeung inokulasi spésimén dahareun, asupkeun kamar steril pikeun operasi sarta teu diwenangkeun pikeun asup atawa kaluar di will. Upami barang-barang kedah disalurkeun, aranjeunna tiasa dialirkeun kana jandela leutik.
5. Upami AC kedah dipasang di kamar steril, kedah aya alat nyaring.
Syarat Disinfeksi sareng Sterilisasi
Glassware, utensils logam jeung média budaya dipaké pikeuntés mikrobiologis, budaya anu kacemar sareng inokulasi, sareng sajabana kedah disterilisasi sateuacan dianggo. Panas garing sareng metode sterilisasi uap tekanan panas beueus.
1. Persiapan saméméh sterilization
(1) Sadaya barang anu kedah disterilisasi kedah dikumbah sareng digaringkeun heula. Barang gelas sapertos jarami sareng piring datar kedah dibungkus pageuh sareng kertas. Upami tabung logam dianggo, liang ventilasi dina éta kedah dibuka.
(2) Bungkus stopper tina flask triangular ngandung medium budaya dina kertas, nutupan tube test, sarta tarik kaluar inti jarum suntik, sarta mungkus eta kalawan gauze.
2. masang
(1) Sterilizer panas garing: Barang-barangna henteu kedah rame sareng henteu tiasa nyabak opat témbok kotak.
(2) Kompor uap tekanan tinggi: Tempatkeun barang-barang anu disterilisasi, bungkus sacara misah, teras pasang langsung kana silinder sterilisasi. Ulah overcrowd barang.
3. Inspeksi parabot
(1) Pariksa naha switch panto téh fléksibel, naha ring karét ruksak jeung naha éta datar.
(2) Mariksa naha gauge tekanan tetep dina posisi nol nalika uap geus exhausted, nutup panto jeung panutup, ventilate uap atawa panas, sarta nitenan naha aya leakage hawa, naha kaayaan ditandaan ku gauge tekanan jeung thermometer cocog, sarta naha pipa nu geus diblokir.
(3) Pikeun sterilizers sareng alat kontrol program éléktronik otomatis, program nu tangtu kudu dipariksa saméméh pamakéan pikeun nempo naha éta meets sarat pikeun sterilization.
4. perlakuan sterilization
(1) Métode sterilisasi panas garing:
Metoda ieu cocog pikeun barang anu henteu ngaruksak, buruk, atanapi menguap dina kaayaan panas garing. Éta langkung sering dianggo pikeun sterilisasi gelas, produk logam, produk keramik, jsb.
①Instrumén jeung parabot kudu dikumbah saméméh garing-baking pikeun nyegah kokotor napel na beungeut ti keur carbonized.
② Salila sterilization, item teu kudu overcrowded, ulah langsung ngahubungan handap jeung témbok kotak, sarta ninggalkeun sela antara item.
③ Salila sterilization, nutup panto pageuh, sambungkeun catu daya, buka liang knalpot salila kira 30 menit pikeun miceun hawa tiis dina sterilizer nu, saluyukeun lampu indikator lamun hawa naek ka 160 ° C, sarta ngajaga eta pikeun 1,5 nepi ka 2 jam.
④Saatos sterilization réngsé atawa salila prosés naékna hawa, panto kudu dibuka handap 60 ° C.
(2) Léngkah-léngkah di handap ieu kedah dilaksanakeun nalika nganggo panci tekanan portabel atanapi sterilizer uap tekanan nangtung:
① Tambihkeun 3L cai kana awak utama kompor tekanan portabel, sareng 16L cai kana kompor tekanan nangtung (jumlah cai kedah dieusi deui nalika dianggo deui, sareng caina kedah diganti upami janten keruh);
② Pikeun kompor tekanan portabel, selapkeun pipa knalpot dina panutup luhur kana pipah pasagi dina témbok jero laras sterilisasi (sterilizers tanpa hoses atawa selang corroded tur retak teu kudu dipaké);
③ Panutup panutup luhur jeung tighten eta pageuh pikeun nyegah leakage hawa; nempatkeun sterilizer dina sumber seuneu panas, hurungkeun kakuatan tina cooker tekanan nangtung, sarta buka klep knalpot dina panutup luhur mun ngantep kaluar hawa (hawa knalpot pikeun 10 nepi ka 15 menit sanggeus cai bisul) );
④Tutup klep knalpot pikeun naekeun tekanan uap kana sarat anu ditangtukeun sareng ngajaga pikeun waktos anu ditangtukeun (gumantung kana sifat barang anu disterilisasi sareng kaayaan anu relevan);
⑤ Saatos waktos anu ditangtukeun, kanggo barang-barang anu kedah digaringkeun, langsung buka klep knalpot pikeun ngaluarkeun uap. Nalika tekanan balik deui ka nol, niiskeun sacara alami ka 60 ° C teras buka tutupna pikeun ngaluarkeun barang-barang. Upami éta barang cair, ulah muka klep knalpot. Panci kedah dipiceun langsung tina sumber panas sareng diidinan niiskeun sacara alami dugi tekanan balik deui ka enol sareng suhu turun di handap 60 ° C sateuacan muka tutupna pikeun ngaluarkeun eusi pikeun nyegah dekompresi ngadadak cairan tina ngagolak atanapi ngabeledug tina wadahna.
(3) Turutan léngkah-léngkah ieu pikeun ngagunakeun sterilizer uap kompor tekanan horizontal:
①Tutup panto pot pageuh, buka klep inlet hawa, ngenalkeun uap kana mezzanine pikeun preheating, sarta hawa tiis dina mezzanine bakal otomatis discharged ngaliwatan panghalang hawa;
②After interlayer ngahontal suhu predetermined, buka klep inlet hawa tina chamber pot, ngenalkeun uap kana chamber pot, sarta hawa tiis dina chamber pot bakal otomatis discharged ngaliwatan arrester hawa chamber pot;
③Nalika tekanan sarta hawa dina chamber pot ngahontal tekanan dieusian, saluyukeun klep inlet hawa tetep konstan;
④ Niiskeun suhu sacara alami atanapi sacara artifisial dugi ka 60 ℃ sateuacan muka panto pikeun nyandak barang-barang. Entong nganggo metode ngaleupaskeun uap gancang pikeun nyegah turunna tekanan anu ngadadak, ngagolak cair atanapi ngabeledug wadahna;
⑤ Lamun maké program otomatis-kontrol tekanan uap sterilizer, sanggeus nempatkeun barang jeung nutup panto pageuh, switch pakait kudu dipencet nurutkeun kategori item supados sterilization bisa otomatis dilaksanakeun nurutkeun prosedur diperlukeun. Nalika sterilisasi, alat anu napel kedah dianggo pikeun ngarékam suhu sareng waktos. Pikeun rujukan hareup, sarat operasi kudu mastikeun luyu jeung parentah produsén urang;
5. Sterilization hawa jeung waktu
(1) Suhu sterilisasi sterilizer panas garing nyaéta 160 ℃, 1.5 ~ 2h.
(2) Suhu sterilisasi sareng waktos sterilisasi uap tekanan
Métode sterilisasi intermittent
1. Métode sterilisasi:
Anggo sterilisasi uap tanpa tekanan. Sababaraha zat gampang ancur ku sterilisasi uap tekanan tinggi, ku kituna metode ieu tiasa dianggo pikeun sterilisasi.
(1) Teundeun barang-barang anu badé disterilisasi dina pot, tutup panutup luhur, buka saluran pembuangan, sareng solokan sésa cai dina pot.
(2) Tutup outlet solokan, buka panto inlet hawa, sarta disinfect pikeun 10 nepi ka 20 menit sakumaha diperlukeun.
(3) Saatos sterilization réngsé, nutup panto inlet hawa, nyandak kaluar barang sarta antosan pikeun niiskeun ka suhu kamar, nempatkeun eta dina incubator 37 ° C sapeuting, sarta neruskeun sterilize nurutkeun métode di luhur poé saterusna. Ngalakukeun ieu tilu kali pikeun ngahontal tujuan sterilization.
2. Kumaha ngagunakeun coagulator sérum:
Lamun medium budaya ngandung bahan husus kayaning sérum atawa endog, panas tinggi bakal ngancurkeun gizi na. Ku alatan éta, suhu low bisa dipaké pikeun koagulasi sérum jeung ngahontal tujuan sterilization:
(1) Lamun maké sérum sterilized ku metoda ieu aliquot, operasi aseptic kudu mastikeun dituturkeun, sarta tabung test na piring ogé kudu sterilized saméméh pamakéan;
(2) Jieun medium budaya jadi lamping atawa lapisan luhur sakumaha diperlukeun. Saatos nambihan cai anu cekap, sambungkeun catu daya, naékkeun suhu ka 75 ~ 90 ° C salami sajam teras sterilisasi. Teundeun dina incubator 37 ° C sapeuting, teras sterilize tilu kali.
3. Kulub jeung disinfect:
Anjeun tiasa nganggo pot ngagolak atanapi sterilizer ngagolak. Sanggeus cai kulub, kulub salila 5 nepi ka 15 menit. Anjeun ogé tiasa nambihan 2% asam karbol dina cai sareng kulub salami 5 menit. Tambahkeun 0,02% formaldehida jeung kulub eta dina 80 ° C salila 60 menit pikeun ngahontal tujuan sterilization. Nanging, sterilisasi ngagolak tiasa dihontal. Nalika nganggo panambah, perhatian kedah dibayar ka corrosiveness barang.
4. perlakuan sterilization:
Saatos sterilisasi, barang-barang parantos steril dina kaayaan normal. Éta kudu taliti mariksa jeung disimpen nalika dikaluarkeun tina sterilizer pikeun nyegah re-kontaminasi;
(1) Candak kaluar barang sareng pariksa integritas bungkusan langsung. Upami aya karusakan atanapi tamponna dipiceun, éta henteu tiasa dianggo salaku barang steril;
(2) Barang anu dikaluarkeun henteu tiasa dianggo salaku barang steril upami bungkusanna écés direndam dina cai;
(3) Médium budaya atanapi réagen kedah dipariksa pikeun ningali naha aranjeunna nyumponan warna atanapi kaayaan saatos sterilisasi. Anu henteu nyumponan sarat kedah dipiceun;
(4) Pikeun wadah anu kabuka-tutup, liang layarna kedah ditutup nalika nyandak kaluar;
(5) Upami barang anu dipiceun murag kana taneuh, dileungitkeun dina tempat anu najis, atanapi dikotoran ku cai, éta dianggap kacemar sareng henteu tiasa dianggo salaku barang steril;
(6) Barang anu disterilisasi anu mumpuni anu dicandak kedah disimpen di kamar panyimpen atanapi lebu - kabinét buktina, sareng dilarang pisan nyampur sareng barang anu henteu disterilisasi;
(7) Sadaya barang anu mumpuni kedah ditandaan tanggal sterilisasi sareng tanggal kadaluwarsa;
(8) Saatos unggal angkatan pamrosésan sterilisasi réngsé, catetan nami, kuantitas, suhu, waktos, sareng operator produk anu disterilisasi.
Sarat pikeun pengobatan runtah toksik sareng baktéri
Alat sareng budaya ékspérimén anu dianggo dina ékspérimén mikrobiologis henteu kedah dikaluarkeun tina laboratorium tanpa disinfeksi.
1. Bahan sareng runtah anu kacemar dibudidaya kedah disimpen dina wadah anu ketat atanapi karanjang kawat sareng disimpen sacara terpusat di tempat anu ditunjuk dugi ka diautoklaf sacara seragam.
2. Kultur anu kacemar ku mikroorganisme kudu diautoklaf dina suhu 121°C salila 30 menit.
3. Sanggeus dipaké, jarami nu kacemar kudu ditempatkeun dina 5% larutan sabun kreol atawa larutan asam carbolic, soaked salila sahenteuna 24 jam (cairan disinféktan teu kudu leuwih handap tina jangkungna soaking), lajeng sterilized ku tekanan tinggi dina 121 ° C salila 30 menit.
4. Cairan pikeun staining na rinsing smears umumna bisa flushed langsung kana solokan nu. Cairan rinsing pikeun baktéri virulent kudu flushed dina beaker jeung sterilized ku tekanan tinggi saméméh dituang kana solokan. Slide anu diwarnaan dilebetkeun kana larutan sabun kresol 5%. Saatos soaking dina cai salila 24 jam, kulub jeung ngumbah. Geser atanapi piring anu dianggo pikeun uji aglutinasi kedah diautoklaf teras dikumbah.
5. Sanggeus ngarecah biakan, geuwat nyemprot sareng soak bagian anu kacemar ku larutan sabun kresol 5% atanapi larutan asam karbolat, soak satengah jam teras usap bersih.
Baju kerja atanapi baju kerja anu kacemar, topi, masker, jsb anu dianggo pikeun tés kekerasan kedah disimpen dina kantong disinfeksi khusus sareng disterilisasi ku tekanan tinggi sateuacan dikumbah.
Sarat persiapan sedeng
Kualitas persiapan medium budaya bakal langsung mangaruhan tumuwuhna mikroorganisme, sabab rupa mikroorganisme boga syarat gizi béda jeung tujuan budaya béda. Sarat pikeun nyiapkeun rupa-rupa média budaya nyaéta kieu:
1. Beurat bahan nurutkeun rumus sedeng, lajeng ngaleyurkeun aranjeunna dina cai sulingan. Kualitas réagen anu diterapkeun sareng ubar kedah dipariksa sateuacan dianggo.
2. Pangukuran pH sareng pangaturan: Pangukuran pH kedah dilakukeun nalika medium budaya dicoo dina suhu kamar, sabab aya bédana pH dina kaayaan panas atanapi tiis. Nalika pangukuran réngsé, tambahkeun alkali atanapi asam numutkeun jumlah anu diitung sareng aduk rata. Kudu diuji deui. Nilai pH medium kultur kedah akurat, upami henteu bakal mangaruhan kana kamekaran mikroorganisme atanapi mangaruhan hasil observasi. Nanging, kedah diperhatoskeun yén sterilisasi tekanan tinggi tiasa mangaruhan panurunan atanapi paningkatan pH sababaraha média kultur, janten henteu disarankeun pikeun ngasterilisasi dina tekanan anu luhur teuing atanapi sababaraha kali supados henteu mangaruhan kualitas medium budaya. Indikator, natrium deoxycholate, agar-agar, jeung sajabana umumna Tambahkeun deui sanggeus nyaluyukeun pH.
3. Médium kultur perlu tetep jelas pikeun mempermudah observasi tumuwuhna baktéri. Saatos medium budaya dipanaskeun sareng digodog, éta tiasa disaring nganggo katun penyerap atanapi flanel pikeun ngaleungitkeun sédimén. Upami diperlukeun, éta bisa clarified jeung bodas endog. Strip agar-agar anu dianggo kedah dikumbah sareng garing sateuacanna. Sateuacan dianggo, ulah mangaruhan transparansi kusabab najis dina agar.
4. Beusi, tambaga jeung wadah sejenna teu kudu dipaké pikeun nahan medium budaya. Éta hadé ngagunakeun wadah kaca teuas nétral bersih.
5. The sterilization tina medium budaya kedah teu ukur ngahontal tujuan sterilization lengkep, tapi ogé nengetan teu ngurangan nilai gizi na alatan pemanasan. Sacara umum, 121 ° C pikeun 15 menit cukup. Pikeun média kultur anu ngandung zat anu teu toléran kana panas anu luhur sapertos gula sareng sérum, gelatin, sareng sajabana, kedah disterilisasi ku suhu rendah atanapi metode intermittent. Sababaraha réagen nu teu bisa dipanaskeun, kayaning kalium tellurite, konéng endog, TTC, antibiotik, jeung sajabana, kudu leuwih tiis nepi ka kira 50 ° C sanggeus agar dasar ieu autoclaved lajeng ditambahkeun;
6. Sanggeus unggal angkatan média kultur disiapkeun, tés pertumbuhan steril sarta uji pertumbuhan galur diuji kudu dipigawé. Upami éta mangrupikeun médium kultur biokimiawi, paké galur baktéri standar pikeun inokulasi sareng kultur, sareng perhatikeun hasil réaksi biokimia. Éta kedah nunjukkeun réaksi normal. Médium budaya henteu kedah disimpen lami teuing. Upami diperlukeun, éta tiasa disimpen dina kulkas 4 ° C.
7. Kiwari, aya rupa-rupa média budaya garing. Unggal angkatan kedah nganggo galur standar pikeun uji pertumbuhan atanapi observasi réaksi biokimia. Rupa-rupa média budaya ngan ukur tiasa dianggo saatos uji pertumbuhan galur anu saluyu saé. Nu anyar dibeuli atawa garing nu geus disimpen pikeun lila bisa dipaké. pH medium budaya ogé kedah diukur nalika nyiapkeun, sareng dosis sareng metodena kedah diturutan numutkeun petunjuk produk.
8. Réagen kimiawi, kaayaan sterilisasi, hasil uji pertumbuhan galur, sareng tanaga produksi anu dianggo dina unggal angkatan média budaya anu disiapkeun kedah dirékam pikeun panalungtikan.
Sampel ngumpulkeun jeung ngolah syarat
1. Sampel inspeksi anu dikumpulkeun kedah ngawakilan. Nalika sampling, bahan baku, pamrosésan, transportasi, metode panyimpen sareng kaayaan bets dahareun, kaayaan kaséhatan lingkungan sakurilingna, sareng sajabana kedah ditaliti sacara rinci pikeun mariksa naha aya sumber kontaminasi.
2. Nurutkeun kana jenis jeung kuantitas dahareun, kuantitas sampling jeung métode kudu dilaksanakeun luyu jeung sarat métode inspeksi baku.
3. Nengetan operasi aseptic nalika sampling, sarta wadahna kudu sterilized ulah kontaminasi mikroba di lingkungan. Wadahna teu kedah disterilisasi ku larutan sabun kreosal, sterilisasi ku klormethionin, alkohol sareng disinféktan sanés, sareng teu kedah ngandung disinféktan atanapi antibiotik sapertos kitu. Pikeun ngahindarkeun maéhan mikroorganisme dina conto, gunting, péso, sareng sendok anu dianggo ogé kedah disterilisasi sateuacan dianggo.
4. Sampel kudu dikirim ka kamar inspeksi pikeun inspeksi langsung saatos kempelan. Prosés pamariksaan umumna henteu langkung ti 3 jam. Upami jarakna panjang, éta tiasa disimpen dina lingkungan 1 ~ 5 ℃. Upami éta kedah beku, éta kedah disimpen dina kaayaan beku. Kirimkeun pikeun pamariksaan.
5. Sanggeus narima sampel, kamar inspeksi bakal ngadaptar eta (ngaran sampel, Unit pikeun inspeksi, kuantitas, tanggal, nomer, jsb) jeung niténan penampilan sampel. Upami aya salah sahiji kaayaan di handap ieu, pamariksaan tiasa ditolak:
(1) Sampel nu geus sterilized ku tekanan tinggi husus, ngagolakkeun atawa métode séjénna bakal leungit significance maranéhanana dina ngagambarkeun kadaharan aslina;
(2) Botol jeung kantong dahareun geus dibuka, daging asak jeung produk na, asak jangjangan jeung kadaharan lianna geus pegat jeung teu lengkep, nyaeta, bentuk kadaharan aslina geus leungit (iwal sampel karacunan pangan);
(3) Jumlah sampling teu cukup sakumaha diperlukeun;
Pikeun conto anu dikintunkeun pikeun pamariksaan anu nyumponan sarat, kamar pamariksaan kedah langsung ngalaksanakeun pamariksaan saatos nampi. Upami kaayaan henteu kacumponan, aranjeunna kedah disimpen dina kulkas 4 ° C, nyiapkeun kaayaan dina waktosna, teras ngalaksanakeun pamariksaan.
6. Nalika inspecting sampel, ngalakukeun processing luyu nurutkeun sipat béda maranéhanana.
(1) Nalika inokulasi sampel cair, maranéhanana kudu tuntas dicampurkeun jeung inoculated nurutkeun jumlah.
(2) Pikeun sampel padet, make péso sterilized pikeun motong kaluar 25g bagian béda, nempatkeun eta dina 225mL saline sterilized atawa solusi séjén, naksir jeung campur jeung homogenizer, sarta inoculate nurutkeun jumlah.
(3) Botol sareng kantong tuangeun kedah dibuka ku sterilisasi, sareng metode di luhur kedah dipilih dumasar kana karakteristik sateuacan inokulasi.
Sampel pamariksaan, ngarékam sareng ngalaporkeun syarat
1. Sanggeus narima sampel, kamar inspeksi kahiji bakal ngalaksanakeun inspeksi penampilan jeung promptly ngalaksanakeun inspeksi luyu jeung métode inspeksi standar nasional. Salila prosés pamariksaan, operasi aseptik kedah dilaksanakeun sacara saksama, tanggung jawab, sareng sacara ketat pikeun nyegah.hasil tés mikrobakontaminasi di lingkungan.
2. Métode anu digunakeun dina prosés inspeksi sampel, fénoména jeung hasil anu lumangsung, jeung sajabana kudu ditulis dina catetan tés tinulis salaku dadasar pikeun analisis jeung judgment hasil. Catetan kudu lengkep, jelas, otentik, obyektif, sarta teu kudu dirobah atawa dipalsukan.
.
.
Syarat operasi aseptik:
1. Anjeun kudu maké baju gawé jeung cap gawé nalika inokulasi baktéri.
2. Nalika inokulasi sampel kadaharan, baju gawé husus, caps na slippers kudu dipaké, nu kudu ditempatkeun di kamar panyangga kamar steril sarta dipaké sanggeus disinfection UV saméméh gawé.
3. Nalika inokulasi sampel kadaharan, ngumbah leungeun Anjeun ku sabun saméméh asup ka kamar steril, lajeng usap leungeun Anjeun beresih jeung 75% bal kapas alkohol.
4. Jarami, piring datar sareng média budaya anu dianggo pikeun inokulasi kedah disterilisasi sareng disterilisasi. Wadah anu henteu kapake teu kedah ditinggalkeun henteu dianggo saatos muka bungkusan. Parabot logam kedah diautoklaf atanapi dibakar tilu kali nganggo alkohol 95% sateuacan dianggo.
5. Nalika nyandak jarami kaluar tina bungkusan, ujung jarami henteu kedah nyabak bagian anu kakeunaan. Nalika nganggo jarami pikeun inokulasi tabung uji atanapi piring, ujung jarami henteu kedah nyabak kana ujung tabung uji atanapi piring.
6. Inoculating sampel sarta mindahkeun baktéri kudu dipigawé di hareup lampu alkohol. Nalika inokulasi baktéri atanapi conto, jarami kedah disterilisasi ku seuneu saatos nyandak kaluar tina bungkusan sareng muka tutup tabung uji.
7. Sateuacan inokulasi baktéri, sadaya kawat logam tina loop inokulasi jeung jarum kudu dibeuleum ku seuneu, sarta lamun perlu, sambungan antara loop, jarum jeung rod kudu dibeuleum. Gelung inokulasi pikeun inokulasi baktéri tuberkulosis sareng baktéri virulen kedah digodog dina cai anu ngagolak salami 5 menit, teras Diduruk ku seuneu.
8. Nalika nyusu cair baktéri atawa sampel kalawan jarami a, make ujung karét pakait pikeun nyedot eta, sarta ulah nyeuseup eta langsung jeung sungut anjeun.
Syarat pamakéan kamar steril:
1. Jandela nu nuju ka luar kamar steril kudu ganda-glazed tur disegel. Aranjeunna teu kedah dibuka di will. Kedah aya kamar panyangga sareng panto geser anu cocog sareng ukuran kamar steril. Ogé kudu aya jandela leutik 0,5 ~ 0,7m2. Dina préparasi ngaliwatan item sanggeus asup ka kamar steril.
2. Kamar steril kudu tetep beresih. Saatos damel, éta kedah disinfeksi ku 2% dugi ka 3% larutan sabun cresol, permukaan padamelan kedah diusap, sareng barang-barang anu teu aya hubunganana sareng percobaan henteu kedah disimpen.
3. Panto kamar steril kudu ditutup pageuh saméméh jeung sanggeus pamakéan, sarta lampu ultraviolét kudu dihurungkeun. Upami lampu ultraviolét digantung di jero ruangan dianggo pikeun disinfeksi, lampu ultraviolét 30W diperyogikeun. Jarakna 1.0m, sareng waktos iradiasi henteu kirang ti 30 menit. Lamun maké lampu ultraviolet, perhatian kudu dibayar ka Beroperasi langsung dina sinar ultraviolét pikeun ngahindarkeun karuksakan. Lampu kudu diusap lembut ku bal kapas alkohol unggal dua minggu pikeun ngaleungitkeun lebu sareng gajih pikeun ngirangan dampak penetrasi sinar ultraviolét.
4. Nalika ngolah jeung inokulasi spésimén dahareun, asupkeun kamar steril pikeun operasi sarta teu diwenangkeun pikeun asup atawa kaluar di will. Upami barang-barang kedah disalurkeun, aranjeunna tiasa dialirkeun kana jandela leutik.
5. Upami AC kedah dipasang di kamar steril, kedah aya alat nyaring.
Syarat Disinfeksi sareng Sterilisasi
Glassware, utensils logam jeung média budaya dipaké pikeuntés mikrobiologis, budaya anu kacemar sareng inokulasi, sareng sajabana kedah disterilisasi sateuacan dianggo. Panas garing sareng metode sterilisasi uap tekanan panas beueus.
1. Persiapan saméméh sterilization
(1) Sadaya barang anu kedah disterilisasi kedah dikumbah sareng digaringkeun heula. Barang gelas sapertos jarami sareng piring datar kedah dibungkus pageuh sareng kertas. Upami tabung logam dianggo, liang ventilasi dina éta kedah dibuka.
(2) Bungkus stopper tina flask triangular ngandung medium budaya dina kertas, nutupan tube test, sarta tarik kaluar inti jarum suntik, sarta mungkus eta kalawan gauze.
2. masang
(1) Sterilizer panas garing: Barang-barangna henteu kedah rame sareng henteu tiasa nyabak opat témbok kotak.
(2) Kompor uap tekanan tinggi: Tempatkeun barang-barang anu disterilisasi, bungkus sacara misah, teras pasang langsung kana silinder sterilisasi. Ulah overcrowd barang.
3. Inspeksi parabot
(1) Pariksa naha switch panto téh fléksibel, naha ring karét ruksak jeung naha éta datar.
(2) Mariksa naha gauge tekanan tetep dina posisi nol nalika uap geus exhausted, nutup panto jeung panutup, ventilate uap atawa panas, sarta nitenan naha aya leakage hawa, naha kaayaan ditandaan ku gauge tekanan jeung thermometer cocog, sarta naha pipa nu geus diblokir.
(3) Pikeun sterilizers sareng alat kontrol program éléktronik otomatis, program nu tangtu kudu dipariksa saméméh pamakéan pikeun nempo naha éta meets sarat pikeun sterilization.
4. perlakuan sterilization
(1) Métode sterilisasi panas garing:
Metoda ieu cocog pikeun barang anu henteu ngaruksak, buruk, atanapi menguap dina kaayaan panas garing. Éta langkung sering dianggo pikeun sterilisasi gelas, produk logam, produk keramik, jsb.
①Instrumén jeung parabot kudu dikumbah saméméh garing-baking pikeun nyegah kokotor napel na beungeut ti keur carbonized.
② Salila sterilization, item teu kudu overcrowded, ulah langsung ngahubungan handap jeung témbok kotak, sarta ninggalkeun sela antara item.
③ Salila sterilization, nutup panto pageuh, sambungkeun catu daya, buka liang knalpot salila kira 30 menit pikeun miceun hawa tiis dina sterilizer nu, saluyukeun lampu indikator lamun hawa naek ka 160 ° C, sarta ngajaga eta pikeun 1,5 nepi ka 2 jam.
④Saatos sterilization réngsé atawa salila prosés naékna hawa, panto kudu dibuka handap 60 ° C.
(2) Léngkah-léngkah di handap ieu kedah dilaksanakeun nalika nganggo panci tekanan portabel atanapi sterilizer uap tekanan nangtung:
① Tambihkeun 3L cai kana awak utama kompor tekanan portabel, sareng 16L cai kana kompor tekanan nangtung (jumlah cai kedah dieusi deui nalika dianggo deui, sareng caina kedah diganti upami janten keruh);
② Pikeun kompor tekanan portabel, selapkeun pipa knalpot dina panutup luhur kana pipah pasagi dina témbok jero laras sterilisasi (sterilizers tanpa hoses atawa selang corroded tur retak teu kudu dipaké);
③ Panutup panutup luhur jeung tighten eta pageuh pikeun nyegah leakage hawa; nempatkeun sterilizer dina sumber seuneu panas, hurungkeun kakuatan tina cooker tekanan nangtung, sarta buka klep knalpot dina panutup luhur mun ngantep kaluar hawa (hawa knalpot pikeun 10 nepi ka 15 menit sanggeus cai bisul) );
④Tutup klep knalpot pikeun naekeun tekanan uap kana sarat anu ditangtukeun sareng ngajaga pikeun waktos anu ditangtukeun (gumantung kana sifat barang anu disterilisasi sareng kaayaan anu relevan);
⑤ Saatos waktos anu ditangtukeun, kanggo barang-barang anu kedah digaringkeun, langsung buka klep knalpot pikeun ngaluarkeun uap. Nalika tekanan balik deui ka nol, niiskeun sacara alami ka 60 ° C teras buka tutupna pikeun ngaluarkeun barang-barang. Upami éta barang cair, ulah muka klep knalpot. Panci kedah dipiceun langsung tina sumber panas sareng diidinan niiskeun sacara alami dugi tekanan balik deui ka enol sareng suhu turun di handap 60 ° C sateuacan muka tutupna pikeun ngaluarkeun eusi pikeun nyegah dekompresi ngadadak cairan tina ngagolak atanapi ngabeledug tina wadahna.
(3) Turutan léngkah-léngkah ieu pikeun ngagunakeun sterilizer uap kompor tekanan horizontal:
①Tutup panto pot pageuh, buka klep inlet hawa, ngenalkeun uap kana mezzanine pikeun preheating, sarta hawa tiis dina mezzanine bakal otomatis discharged ngaliwatan panghalang hawa;
②After interlayer ngahontal suhu predetermined, buka klep inlet hawa tina chamber pot, ngenalkeun uap kana chamber pot, sarta hawa tiis dina chamber pot bakal otomatis discharged ngaliwatan arrester hawa chamber pot;
③Nalika tekanan sarta hawa dina chamber pot ngahontal tekanan dieusian, saluyukeun klep inlet hawa tetep konstan;
④ Niiskeun suhu sacara alami atanapi sacara artifisial dugi ka 60 ℃ sateuacan muka panto pikeun nyandak barang-barang. Entong nganggo metode ngaleupaskeun uap gancang pikeun nyegah turunna tekanan anu ngadadak, ngagolak cair atanapi ngabeledug wadahna;
⑤ Lamun maké program otomatis-kontrol tekanan uap sterilizer, sanggeus nempatkeun barang jeung nutup panto pageuh, switch pakait kudu dipencet nurutkeun kategori item supados sterilization bisa otomatis dilaksanakeun nurutkeun prosedur diperlukeun. Nalika sterilisasi, alat anu napel kedah dianggo pikeun ngarékam suhu sareng waktos. Pikeun rujukan hareup, sarat operasi kudu mastikeun luyu jeung parentah produsén urang;
5. Sterilization hawa jeung waktu
(1) Suhu sterilisasi sterilizer panas garing nyaéta 160 ℃, 1.5 ~ 2h.
(2) Suhu sterilisasi sareng waktos sterilisasi uap tekanan
Métode sterilisasi intermittent
1. Métode sterilisasi:
Anggo sterilisasi uap tanpa tekanan. Sababaraha zat gampang ancur ku sterilisasi uap tekanan tinggi, ku kituna metode ieu tiasa dianggo pikeun sterilisasi.
(1) Teundeun barang-barang anu badé disterilisasi dina pot, tutup panutup luhur, buka saluran pembuangan, sareng solokan sésa cai dina pot.
(2) Tutup outlet solokan, buka panto inlet hawa, sarta disinfect pikeun 10 nepi ka 20 menit sakumaha diperlukeun.
(3) Saatos sterilization réngsé, nutup panto inlet hawa, nyandak kaluar barang sarta antosan pikeun niiskeun ka suhu kamar, nempatkeun eta dina incubator 37 ° C sapeuting, sarta neruskeun sterilize nurutkeun métode di luhur poé saterusna. Ngalakukeun ieu tilu kali pikeun ngahontal tujuan sterilization.
2. Kumaha ngagunakeun coagulator sérum:
Lamun medium budaya ngandung bahan husus kayaning sérum atawa endog, panas tinggi bakal ngancurkeun gizi na. Ku alatan éta, suhu low bisa dipaké pikeun koagulasi sérum jeung ngahontal tujuan sterilization:
(1) Lamun maké sérum sterilized ku metoda ieu aliquot, operasi aseptic kudu mastikeun dituturkeun, sarta tabung test na piring ogé kudu sterilized saméméh pamakéan;
(2) Jieun medium budaya jadi lamping atawa lapisan luhur sakumaha diperlukeun. Saatos nambihan cai anu cekap, sambungkeun catu daya, naékkeun suhu ka 75 ~ 90 ° C salami sajam teras sterilisasi. Teundeun dina incubator 37 ° C sapeuting, teras sterilize tilu kali.
3. Kulub jeung disinfect:
Anjeun tiasa nganggo pot ngagolak atanapi sterilizer ngagolak. Sanggeus cai kulub, kulub salila 5 nepi ka 15 menit. Anjeun ogé tiasa nambihan 2% asam karbol dina cai sareng kulub salami 5 menit. Tambahkeun 0,02% formaldehida jeung kulub eta dina 80 ° C salila 60 menit pikeun ngahontal tujuan sterilization. Nanging, sterilisasi ngagolak tiasa dihontal. Nalika nganggo panambah, perhatian kedah dibayar ka corrosiveness barang.
4. perlakuan sterilization:
Saatos sterilisasi, barang-barang parantos steril dina kaayaan normal. Éta kudu taliti mariksa jeung disimpen nalika dikaluarkeun tina sterilizer pikeun nyegah re-kontaminasi;
(1) Candak kaluar barang sareng pariksa integritas bungkusan langsung. Upami aya karusakan atanapi tamponna dipiceun, éta henteu tiasa dianggo salaku barang steril;
(2) Barang anu dikaluarkeun henteu tiasa dianggo salaku barang steril upami bungkusanna écés direndam dina cai;
(3) Médium budaya atanapi réagen kedah dipariksa pikeun ningali naha aranjeunna nyumponan warna atanapi kaayaan saatos sterilisasi. Anu henteu nyumponan sarat kedah dipiceun;
(4) Pikeun wadah anu kabuka-tutup, liang layarna kedah ditutup nalika nyandak kaluar;
(5) Upami barang anu dipiceun murag kana taneuh, dileungitkeun dina tempat anu najis, atanapi dikotoran ku cai, éta dianggap kacemar sareng henteu tiasa dianggo salaku barang steril;
(6) Barang anu disterilisasi anu mumpuni anu dicandak kedah disimpen di kamar panyimpen atanapi lebu - kabinét buktina, sareng dilarang pisan nyampur sareng barang anu henteu disterilisasi;
(7) Sadaya barang anu mumpuni kedah ditandaan tanggal sterilisasi sareng tanggal kadaluwarsa;
(8) Saatos unggal angkatan pamrosésan sterilisasi réngsé, catetan nami, kuantitas, suhu, waktos, sareng operator produk anu disterilisasi.
Sarat pikeun pengobatan runtah toksik sareng baktéri
Alat sareng budaya ékspérimén anu dianggo dina ékspérimén mikrobiologis henteu kedah dikaluarkeun tina laboratorium tanpa disinfeksi.
1. Bahan sareng runtah anu kacemar dibudidaya kedah disimpen dina wadah anu ketat atanapi karanjang kawat sareng disimpen sacara terpusat di tempat anu ditunjuk dugi ka diautoklaf sacara seragam.
2. Kultur anu kacemar ku mikroorganisme kudu diautoklaf dina suhu 121°C salila 30 menit.
3. Sanggeus dipaké, jarami nu kacemar kudu ditempatkeun dina 5% larutan sabun kreol atawa larutan asam carbolic, soaked salila sahenteuna 24 jam (cairan disinféktan teu kudu leuwih handap tina jangkungna soaking), lajeng sterilized ku tekanan tinggi dina 121 ° C salila 30 menit.
4. Cairan pikeun staining na rinsing smears umumna bisa flushed langsung kana solokan nu. Cairan rinsing pikeun baktéri virulent kudu flushed dina beaker jeung sterilized ku tekanan tinggi saméméh dituang kana solokan. Slide anu diwarnaan dilebetkeun kana larutan sabun kresol 5%. Saatos soaking dina cai salila 24 jam, kulub jeung ngumbah. Geser atanapi piring anu dianggo pikeun uji aglutinasi kedah diautoklaf teras dikumbah.
5. Sanggeus ngarecah biakan, geuwat nyemprot sareng soak bagian anu kacemar ku larutan sabun kresol 5% atanapi larutan asam karbolat, soak satengah jam teras usap bersih.
Baju kerja atanapi baju kerja anu kacemar, topi, masker, jsb anu dianggo pikeun tés kekerasan kedah disimpen dina kantong disinfeksi khusus sareng disterilisasi ku tekanan tinggi sateuacan dikumbah.
Sarat persiapan sedeng
Kualitas persiapan medium budaya bakal langsung mangaruhan tumuwuhna mikroorganisme, sabab rupa mikroorganisme boga syarat gizi béda jeung tujuan budaya béda. Sarat pikeun nyiapkeun rupa-rupa média budaya nyaéta kieu:
1. Beurat bahan nurutkeun rumus sedeng, lajeng ngaleyurkeun aranjeunna dina cai sulingan. Kualitas réagen anu diterapkeun sareng ubar kedah dipariksa sateuacan dianggo.
2. Pangukuran pH sareng pangaturan: Pangukuran pH kedah dilakukeun nalika medium budaya dicoo dina suhu kamar, sabab aya bédana pH dina kaayaan panas atanapi tiis. Nalika pangukuran réngsé, tambahkeun alkali atanapi asam numutkeun jumlah anu diitung sareng aduk rata. Kudu diuji deui. Nilai pH medium kultur kedah akurat, upami henteu bakal mangaruhan kana kamekaran mikroorganisme atanapi mangaruhan hasil observasi. Nanging, kedah diperhatoskeun yén sterilisasi tekanan tinggi tiasa mangaruhan panurunan atanapi paningkatan pH sababaraha média kultur, janten henteu disarankeun pikeun ngasterilisasi dina tekanan anu luhur teuing atanapi sababaraha kali supados henteu mangaruhan kualitas medium budaya. Indikator, natrium deoxycholate, agar-agar, jeung sajabana umumna Tambahkeun deui sanggeus nyaluyukeun pH.
3. Médium kultur perlu tetep jelas pikeun mempermudah observasi tumuwuhna baktéri. Saatos medium budaya dipanaskeun sareng digodog, éta tiasa disaring nganggo katun penyerap atanapi flanel pikeun ngaleungitkeun sédimén. Upami diperlukeun, éta bisa clarified jeung bodas endog. Strip agar-agar anu dianggo kedah dikumbah sareng garing sateuacanna. Sateuacan dianggo, ulah mangaruhan transparansi kusabab najis dina agar.
4. Beusi, tambaga jeung wadah sejenna teu kudu dipaké pikeun nahan medium budaya. Éta hadé ngagunakeun wadah kaca teuas nétral bersih.
5. The sterilization tina medium budaya kedah teu ukur ngahontal tujuan sterilization lengkep, tapi ogé nengetan teu ngurangan nilai gizi na alatan pemanasan. Sacara umum, 121 ° C pikeun 15 menit cukup. Pikeun média kultur anu ngandung zat anu teu toléran kana panas anu luhur sapertos gula sareng sérum, gelatin, sareng sajabana, kedah disterilisasi ku suhu rendah atanapi metode intermittent. Sababaraha réagen nu teu bisa dipanaskeun, kayaning kalium tellurite, konéng endog, TTC, antibiotik, jeung sajabana, kudu leuwih tiis nepi ka kira 50 ° C sanggeus agar dasar ieu autoclaved lajeng ditambahkeun;
6. Sanggeus unggal angkatan média kultur disiapkeun, tés pertumbuhan steril sarta uji pertumbuhan galur diuji kudu dipigawé. Upami éta mangrupikeun médium kultur biokimiawi, paké galur baktéri standar pikeun inokulasi sareng kultur, sareng perhatikeun hasil réaksi biokimia. Éta kedah nunjukkeun réaksi normal. Médium budaya henteu kedah disimpen lami teuing. Upami diperlukeun, éta tiasa disimpen dina kulkas 4 ° C.
7. Kiwari, aya rupa-rupa média budaya garing. Unggal angkatan kedah nganggo galur standar pikeun uji pertumbuhan atanapi observasi réaksi biokimia. Rupa-rupa média budaya ngan ukur tiasa dianggo saatos uji pertumbuhan galur anu saluyu saé. Nu anyar dibeuli atawa garing nu geus disimpen pikeun lila bisa dipaké. pH medium budaya ogé kedah diukur nalika nyiapkeun, sareng dosis sareng metodena kedah diturutan numutkeun petunjuk produk.
8. Réagen kimiawi, kaayaan sterilisasi, hasil uji pertumbuhan galur, sareng tanaga produksi anu dianggo dina unggal angkatan média budaya anu disiapkeun kedah dirékam pikeun panalungtikan.
Sampel ngumpulkeun jeung ngolah syarat
1. Sampel inspeksi anu dikumpulkeun kedah ngawakilan. Nalika sampling, bahan baku, pamrosésan, transportasi, metode panyimpen sareng kaayaan bets dahareun, kaayaan kaséhatan lingkungan sakurilingna, sareng sajabana kedah ditaliti sacara rinci pikeun mariksa naha aya sumber kontaminasi.
2. Nurutkeun kana jenis jeung kuantitas dahareun, kuantitas sampling jeung métode kudu dilaksanakeun luyu jeung sarat métode inspeksi baku.
3. Nengetan operasi aseptic nalika sampling, sarta wadahna kudu sterilized ulah kontaminasi mikroba di lingkungan. Wadahna teu kedah disterilisasi ku larutan sabun kreosal, sterilisasi ku klormethionin, alkohol sareng disinféktan sanés, sareng teu kedah ngandung disinféktan atanapi antibiotik sapertos kitu. Pikeun ngahindarkeun maéhan mikroorganisme dina conto, gunting, péso, sareng sendok anu dianggo ogé kedah disterilisasi sateuacan dianggo.
4. Sampel kudu dikirim ka kamar inspeksi pikeun inspeksi langsung saatos kempelan. Prosés pamariksaan umumna henteu langkung ti 3 jam. Upami jarakna panjang, éta tiasa disimpen dina lingkungan 1 ~ 5 ℃. Upami éta kedah beku, éta kedah disimpen dina kaayaan beku. Kirimkeun pikeun pamariksaan.
5. Sanggeus narima sampel, kamar inspeksi bakal ngadaptar eta (ngaran sampel, Unit pikeun inspeksi, kuantitas, tanggal, nomer, jsb) jeung niténan penampilan sampel. Upami aya salah sahiji kaayaan di handap ieu, pamariksaan tiasa ditolak:
(1) Sampel nu geus sterilized ku tekanan tinggi husus, ngagolakkeun atawa métode séjénna bakal leungit significance maranéhanana dina ngagambarkeun kadaharan aslina;
(2) Botol jeung kantong dahareun geus dibuka, daging asak jeung produk na, asak jangjangan jeung kadaharan lianna geus pegat jeung teu lengkep, nyaeta, bentuk kadaharan aslina geus leungit (iwal sampel karacunan pangan);
(3) Jumlah sampling teu cukup sakumaha diperlukeun;
Pikeun conto anu dikintunkeun pikeun pamariksaan anu nyumponan sarat, kamar pamariksaan kedah langsung ngalaksanakeun pamariksaan saatos nampi. Upami kaayaan henteu kacumponan, aranjeunna kedah disimpen dina kulkas 4 ° C, nyiapkeun kaayaan dina waktosna, teras ngalaksanakeun pamariksaan.
6. Nalika inspecting sampel, ngalakukeun processing luyu nurutkeun sipat béda maranéhanana.
(1) Nalika inokulasi sampel cair, maranéhanana kudu tuntas dicampurkeun jeung inoculated nurutkeun jumlah.
(2) Pikeun sampel padet, make péso sterilized pikeun motong kaluar 25g bagian béda, nempatkeun eta dina 225mL saline sterilized atawa solusi séjén, naksir jeung campur jeung homogenizer, sarta inoculate nurutkeun jumlah.
(3) Botol sareng kantong tuangeun kedah dibuka ku sterilisasi, sareng metode di luhur kedah dipilih dumasar kana karakteristik sateuacan inokulasi.
Sampel pamariksaan, ngarékam sareng ngalaporkeun syarat
1. Sanggeus narima sampel, kamar inspeksi kahiji bakal ngalaksanakeun inspeksi penampilan jeung promptly ngalaksanakeun inspeksi luyu jeung métode inspeksi standar nasional. Salila prosés pamariksaan, operasi aseptik kedah dilaksanakeun sacara saksama, tanggung jawab, sareng sacara ketat pikeun nyegah.hasil tés mikrobakontaminasi di lingkungan.
2. Métode anu digunakeun dina prosés inspeksi sampel, fénoména jeung hasil anu lumangsung, jeung sajabana kudu ditulis dina catetan tés tinulis salaku dadasar pikeun analisis jeung judgment hasil. Catetan kudu lengkep, jelas, otentik, obyektif, sarta teu kudu dirobah atawa dipalsukan.
.
.
