미생물학적 테스트 요구사항 요약
2024-01-24 15:14:33
요구 사항 및 단계미생물학적 테스트다음과 같습니다:
무균 작업 요구 사항:
1.균 접종 시에는 반드시 작업복과 작업모를 착용해야 합니다.
2. 식품검체 접종 시에는 반드시 특수 작업복, 모자, 슬리퍼를 착용하여야 하며, 멸균실 완충실에 비치하고 작업 전 UV 소독 후 사용하여야 한다.
3. 식품검체 접종 시, 멸균실 입실 전 비누로 손을 씻은 후, 알코올 75% 화장솜으로 손을 깨끗이 닦아주세요.
4. 접종에 사용되는 빨대, 납작한 접시, 배양액 등은 반드시 소독 및 소독하여야 한다. 사용하지 않은 용기는 포장을 개봉한 후 그대로 두어서는 안 됩니다. 금속 기구는 사용하기 전에 고압멸균 처리하거나 95% 알코올로 3회 소각해야 합니다.
5. 빨대를 포장에서 꺼낼 때 빨대 끝부분이 노출된 부분에 닿지 않도록 해주세요. 시험관이나 접시에 접종하기 위해 빨대를 사용할 때, 빨대의 끝부분이 시험관이나 접시의 가장자리에 닿아서는 안 된다.
6. 검체접종 및 세균이송은 반드시 알코올 램프 앞에서 이루어져야 합니다. 세균이나 검체를 접종할 때에는 빨대를 포장에서 꺼내어 시험관 마개를 연 후 반드시 화염멸균을 해야 합니다.
7. 균을 접종하기 전에 접종 루프와 바늘의 금속선을 모두 불꽃으로 태워야 하며, 필요한 경우 루프와 바늘, 막대 사이의 연결 부위도 태워야 한다. 결핵균 및 악성균을 접종하기 위한 접종루프는 끓는 물에 5분간 끓인 후 불에 태워야 합니다.
8. 빨대로 세균액이나 검체를 빨 때 해당 고무팁을 사용하여 빨고 입으로 직접 빨지 마십시오.
멸균실 사용 요구 사항:
1. 무균실 외부로 통하는 창문은 이중으로 밀봉하여 밀봉하여야 한다. 임의로 열어서는 안됩니다. 멸균실 규모에 맞는 완충실과 미닫이문이 있어야 한다. 0.5~0.7㎡ 정도의 작은 창문도 있어야 한다. 무균실 입실 후 물품 전달을 위한 준비입니다.
2. 무균실은 청결하게 유지되어야 한다. 작업 후에는 2~3% 크레졸 비눗물로 소독하고, 작업대 표면을 닦아야 하며, 실험과 관련 없는 물건을 보관해서는 안 됩니다.
3. 멸균실의 문은 사용 전후에 꼭 닫아야 하며, 자외선 램프를 켜야 합니다. 소독을 위해 실내 매달린 자외선 램프를 사용하는 경우 30W 자외선 램프가 필요합니다. 거리는 1.0m, 조사시간은 30분 이상이다. 자외선 램프를 사용할 때는 손상을 방지하기 위해 자외선 아래에서 직접 작동하도록 주의해야 합니다. 램프는 2주마다 알코올 면봉으로 부드럽게 닦아 먼지와 기름을 제거하여 자외선 침투의 영향을 줄여야 합니다.
4. 식품 검체를 가공 및 접종하는 경우에는 무균실에 들어가 작업하여야 하며 임의로 출입을 금한다. 물건을 전달해야 할 경우 작은 창을 통해 전달할 수 있습니다.
5. 무균실에 에어컨을 설치해야 하는 경우에는 필터링 장치가 있어야 합니다.
소독 및 멸균 요구 사항
유리제품, 금속기구, 배양액 등미생물학적 테스트, 오염되고 접종된 배양물 등은 사용하기 전에 반드시 멸균해야 합니다. 건열 및 습열압력 증기멸균 방식.
1. 멸균 전 준비사항
(1) 멸균이 필요한 모든 물품은 먼저 세척하고 건조시켜야 합니다. 빨대, 납작한 접시 등 유리제품은 종이로 단단히 포장해야 합니다. 금속 튜브를 사용하는 경우에는 환기 구멍을 열어야 합니다.
(2) 배양액이 담긴 삼각플라스크의 마개를 종이로 감싸고 시험관을 덮은 후 주사기의 심지를 빼내고 거즈로 감싼다.
2. 설치
(1) 건열 멸균기: 품목이 너무 빽빽하지 않아야 하며 상자의 네 벽에 닿아서는 안 됩니다.
(2) 대형 고압증기조리기 : 멸균물을 넣고 따로 포장하여 멸균통에 직접 넣는다. 항목을 너무 많이 채우지 마십시오.
3. 장비 점검
(1) 도어 스위치가 유연한지, 고무 링이 손상되었는지, 평평한지 확인하십시오.
(2) 증기가 배출되면 압력계가 영점 위치에 있는지 확인하고 문과 덮개를 닫고 증기 또는 열을 환기시켜 공기 누출 여부, 압력계와 온도계의 표시 조건이 일치하는지, 배관이 막혔는지 여부를 관찰하십시오.
(3) 자동 전자 프로그램 제어 장치를 갖춘 멸균기의 경우, 사용 전에 지정된 프로그램을 확인하여 멸균 요구 사항을 충족하는지 확인해야 합니다.
4. 살균처리
(1) 건열멸균 방법 :
이 방법은 건열 조건에서도 손상, 변질, 증발하지 않는 품목에 적합합니다. 유리 제품, 금속 제품, 세라믹 제품 등을 살균하는 데 더 일반적으로 사용됩니다.
①기구 및 기구는 표면에 부착된 먼지가 탄화되는 것을 방지하기 위해 건조하기 전에 반드시 세척해야 합니다.
② 멸균 시 물품이 너무 과밀하지 않도록 하고, 상자 바닥과 벽면에 직접 닿지 않도록 하며, 물품 사이에 틈을 남겨두어야 합니다.
③ 살균 중에는 문을 꼭 닫고 전원을 연결한 후 배기구를 30분 정도 열어 살균기 내부의 찬 공기를 빼내고, 온도가 160°C가 되면 표시등을 조절하여 1.5~2시간 동안 유지합니다.
④멸균 완료 후 또는 온도 상승 과정 중에는 60°C 이하에서 도어를 열어야 합니다.
(2) 휴대용 압력밥솥이나 수직형 압력증기멸균기를 사용하는 경우에는 다음의 단계를 따라야 한다.
① 휴대용 압력밥솥 본체에 물 3L, 세로형 압력밥솥에 16L의 물을 추가합니다. (재사용 시 물의 양을 보충해야 하며, 탁해지면 교체해야 합니다.)
② 휴대용 압력밥솥의 경우, 상부커버에 있는 배기관을 멸균통 내벽에 있는 사각관에 삽입한다(호스가 없거나 호스가 부식되거나 갈라진 멸균기는 사용하지 않는다).
③ 공기 누출을 방지하기 위해 상단 덮개를 덮고 단단히 조이십시오. 살균기를 화원 위에 올려 가열한 후 수직형 압력밥솥의 전원을 켜고 윗뚜껑 배기밸브를 열어 공기를 빼준다(물이 끓은 후 10~15분간 배기).
④배기 밸브를 닫아 증기압을 규정된 요구사항까지 높이고 규정된 시간 동안 유지합니다(멸균 물품의 성격 및 관련 상황에 따라 다름).
⑤ 지정시간이 경과한 후, 건조가 필요한 품목은 즉시 배기밸브를 열어 증기를 배출시켜 주십시오. 압력이 0으로 돌아오면 60°C까지 자연 식힌 후 뚜껑을 열어 내용물을 꺼냅니다. 액체류인 경우 배기밸브를 열지 마십시오. 즉시 냄비를 열원에서 꺼내 압력이 0으로 돌아가고 온도가 60°C 아래로 떨어질 때까지 자연 식힌 후 뚜껑을 열어 내용물을 꺼내야 합니다. 이는 용기가 격렬하게 끓거나 폭발하여 액체가 갑자기 감압되는 것을 방지하기 위함입니다.
(3) 수평형 압력솥 증기멸균기를 사용하려면 다음 단계를 따르십시오.
①냄비 문을 단단히 닫고 공기 흡입 밸브를 열고 메자닌에 증기를 넣어 예열하면 메자닌의 차가운 공기가 자동으로 공기 장벽을 통해 배출됩니다.
②중간층이 미리 정해진 온도에 도달한 후 포트 챔버의 공기 흡입 밸브를 열고 포트 챔버에 증기를 도입하면 포트 챔버의 차가운 공기가 포트 챔버 공기 방지 장치를 통해 자동으로 배출됩니다.
③포트 챔버의 압력과 온도가 지정된 압력에 도달하면 공기 흡입 밸브를 조정하여 일정하게 유지합니다.
④ 물품을 꺼내기 위해 문을 열기 전에 자연 또는 인위적으로 온도를 60℃로 식혀 주십시오. 급격한 압력 강하, 액체의 격렬한 비등 또는 용기 폭발을 방지하기 위해 급속 증기 배출 방법을 사용하지 마십시오.
⑤ 자동프로그램식 고압증기멸균기를 사용할 경우 물품을 올려놓고 문을 단단히 닫은 후 물품의 종류에 따라 해당 스위치를 눌러야 필요한 절차에 따라 자동으로 멸균이 진행된다. 멸균 중에는 반드시 부착된 기구를 사용하여 온도와 시간을 기록해야 합니다. 나중에 참조할 수 있도록 작동 요구 사항은 제조업체의 지침을 엄격히 준수해야 합니다.
5. 멸균온도 및 시간
(1) 건열멸균기의 멸균온도는 160℃, 1.5~2h이다.
(2) 가압증기멸균기의 멸균온도 및 시간
간헐살균방식
1. 살균 방법:
압력을 가하지 않고 증기 멸균을 사용합니다. 고압 증기 멸균에 의해 일부 물질은 쉽게 파괴되므로 이 방법을 멸균에 사용할 수 있다.
(1) 냄비에 소독할 물건을 넣고 윗뚜껑을 덮은 후 배수구를 열어 냄비에 남은 물을 빼냅니다.
(2) 배수구를 닫고 공기 흡입구를 열어 필요에 따라 10~20분간 소독합니다.
(3) 멸균이 완료되면 공기주입구 문을 닫고 물품을 꺼내어 실온으로 냉각될 때까지 기다린 후 37°C 인큐베이터에 하룻밤 넣어두고 다음날 위의 방법으로 멸균을 계속합니다. 살균 목적을 달성하려면 이 작업을 세 번 수행하십시오.
2. 혈청 응고제 사용 방법:
배양 배지에 혈청이나 계란과 같은 특수 성분이 포함되어 있는 경우 높은 열로 인해 영양분이 파괴됩니다. 따라서 저온을 사용하여 혈청을 응고시키고 멸균 목적을 달성할 수 있습니다.
(1) 본 방법으로 멸균한 혈청을 분주하여 사용할 경우에는 무균작업을 엄격히 준수하여야 하며, 시험관 및 플레이트도 멸균한 후 사용하여야 한다.
(2) 필요에 따라 배지를 경사지나 높은 층으로 만든다. 물을 충분히 넣은 후 전원을 연결하고 75~90°C까지 1시간 동안 온도를 올린 후 멸균해주세요. 37°C 인큐베이터에 하룻밤 넣어둔 후 3회 소독합니다.
3. 끓여서 소독합니다.
끓는 냄비나 끓는 소독기를 사용할 수 있습니다. 물이 끓으면 5~15분 정도 삶아주세요. 물에 2% 석탄산을 넣고 5분간 끓여도 됩니다. 0.02% 포름알데히드를 첨가하고 80°C에서 60분간 끓여 살균 목적을 달성한다. 그러나 끓는점멸균은 달성될 수 있다. 강화제를 사용할 때에는 물품의 부식성에 주의해야 합니다.
4. 살균 처리:
멸균 후 품목은 일반적인 상황에서 이미 멸균 상태입니다. 재오염을 방지하기 위해 멸균기에서 꺼낼 때 주의 깊게 검사하고 배치해야 합니다.
(1) 물품을 꺼내고 즉시 포장 상태를 확인하십시오. 손상이 있거나 탐폰을 제거한 경우에는 멸균용품으로 사용할 수 없습니다.
(2) 꺼낸 품목은 포장이 물에 완전히 젖어 있는 경우 멸균 품목으로 사용할 수 없습니다.
(3) 배양액이나 시약은 멸균 후 색상이나 상태에 맞는지 확인한다. 요구 사항을 충족하지 않는 것은 폐기되어야 합니다.
(4) 개방형 용기의 경우, 꺼낼 때 스크린 구멍을 닫아야 합니다.
(5) 제거된 물품이 땅에 떨어지거나, 불결한 곳에 잘못 놓였거나, 물에 더러워진 경우 오염된 것으로 간주되어 멸균 물품으로 사용할 수 없습니다.
(6) 꺼낸 적격 멸균 품목은 보관실 또는 방진 캐비닛에 보관해야하며 멸균되지 않은 품목과 혼합하는 것을 엄격히 금지합니다.
(7) 모든 적격 품목에는 멸균 날짜와 만료 날짜가 표시되어야 합니다.
(8) 각 일괄 멸균 처리가 완료된 후 멸균 제품의 명칭, 수량, 온도, 시간 및 작업자를 기록합니다.
독성 및 박테리아 폐기물 처리 요구 사항
미생물 실험에 사용되는 실험 장비 및 배양균은 소독 없이 실험실 밖으로 반출되어서는 안 됩니다.
1. 배양된 오염물질 및 폐기물은 밀폐용기나 철망바구니에 담아 균일하게 고압멸균될 때까지 지정된 장소에 중앙에 보관해야 합니다.
2. 미생물에 오염된 배양물은 121°C에서 30분간 고압멸균해야 합니다.
3. 사용 후 오염된 빨대를 5% 크레올비누액 또는 석탄산용액에 넣어 최소 24시간 동안 담가둔 후(소독액이 담그는 높이보다 낮아서는 안 된다) 121℃에서 30분간 고압멸균해야 한다.
4. 얼룩 염색 및 헹굼용 액체는 일반적으로 하수구로 직접 흘러 들어갈 수 있습니다. 악성 박테리아에 대한 헹굼액은 하수구에 부어지기 전에 비이커에 담아 고압으로 멸균해야 합니다. 염색된 슬라이드를 5% 크레졸 비눗물에 담급니다. 24시간 동안 물에 담가둔 후 끓여서 씻어주세요. 응집 테스트에 사용되는 슬라이드나 접시는 고압멸균 후 세척해야 합니다.
5. 배양균을 파쇄한 후 즉시 오염된 부위에 5% 크레졸비누액 또는 석탄산용액을 뿌려 담근 후 30분 정도 담근 후 깨끗이 닦아주세요.
오염된 작업복이나 폭력적인 실험에 착용한 작업복, 모자, 마스크 등은 특수소독백에 넣어 고압멸균한 후 세탁하여야 한다.
매체 준비 요구 사항
다양한 미생물은 서로 다른 영양 요구사항과 배양 목적을 갖고 있기 때문에 배양 배지 준비의 품질은 미생물의 성장에 직접적인 영향을 미칩니다. 다양한 배양 배지의 준비 요건은 다음과 같습니다.
1. 중배합에 따라 재료의 무게를 잰 후 증류수에 녹입니다. 적용되는 시약 및 약물의 품질을 사용 전에 검사해야 합니다.
2. pH 측정 및 조정: pH 측정은 배양액을 실온으로 식힌 상태에서 수행해야 합니다. 이는 뜨겁거나 차가운 조건에서 pH에 일정한 차이가 있기 때문입니다. 계량이 완료되면 계산된 양에 따라 알칼리 또는 산을 첨가하고 잘 섞는다. 다시 테스트해야합니다. 배양 배지의 pH 값은 정확해야 합니다. 그렇지 않으면 미생물의 성장이나 결과 관찰에 영향을 미칠 수 있습니다. 다만, 고압살균은 일부 배양액의 pH의 감소 또는 증가에 영향을 미칠 수 있으므로, 배양액의 품질에 영향을 미치는 것을 피하기 위해 너무 높은 압력이나 너무 많은 횟수로 살균하는 것은 바람직하지 않다는 점에 유의해야 한다. 지시약, 데옥시콜산나트륨, 한천 등은 일반적으로 pH를 조정한 후 첨가한다.
3. 세균 증식을 쉽게 관찰할 수 있도록 배양배지를 깨끗하게 유지해야 합니다. 배양 배지를 가열하고 끓인 후 흡수성 면이나 플란넬로 여과하여 침전물을 제거할 수 있습니다. 필요한 경우 달걀 흰자로 명확하게 할 수 있습니다. 사용된 한천 스트립은 미리 세척하고 건조해야 합니다. 사용하기 전에 한천의 불순물로 인해 투명성에 영향을 미치지 마십시오.
4. 철, 구리 및 기타 용기를 사용하여 배양액을 담지 마십시오. 깨끗한 중성 경질유리 용기를 사용하는 것이 좋습니다.
5. 배양액의 멸균은 완전한 멸균의 목적을 달성할 뿐만 아니라 가열로 인해 배지의 영양가가 저하되지 않도록 주의해야 한다. 일반적으로 121°C에서 15분이면 충분합니다. 당류, 혈청, 젤라틴 등 고열에 견디지 못하는 물질을 함유한 배양액은 저온살균 또는 간헐적인 방법으로 멸균하여야 한다. 텔루르산칼륨, 난황, TTC, 항생제 등과 같이 가열할 수 없는 일부 시약은 기본 한천을 고압멸균한 후 약 50°C로 냉각한 후 첨가해야 합니다.
6. 각 배치의 배양액을 준비한 후 멸균증식시험과 시험균주의 생육시험을 실시한다. 생화학배양배지인 경우 표준균주를 사용하여 접종 및 배양하고 생화학반응 결과를 관찰한다. 정상적인 반응을 보여야 합니다. 배양 배지를 너무 오랫동안 보관하면 안 됩니다. 필요한 경우 4°C 냉장고에 보관할 수 있습니다.
7. 현재 건조배지의 종류는 다양하다. 각 배치는 성장 테스트 또는 생화학 반응 관찰을 위해 표준 균주를 사용해야 합니다. 다양한 배양배지는 해당 균주의 생장시험이 양호해야 사용할 수 있습니다. 새로 구입한 것이나 오랫동안 보관한 것을 건조시킨 것을 사용할 수 있습니다. 배양액을 조제할 때에도 배양액의 pH를 측정해야 하며, 용량과 방법은 제품 설명서에 따라야 한다.
8. 조제된 배양배지의 각 배치에 사용된 화학시약, 멸균조건, 균주증식시험결과, 생산인력 등을 기록하여 조회하여야 한다.
시료 수집 및 처리 요구 사항
1. 수집된 검사 샘플은 대표적인 것이어야 합니다. 검체 채취 시 식품 배치의 원재료, 가공, 운송, 보관 방법 및 상태, 주변 환경보건 상태 등을 자세히 조사하여 오염원이 있는지 확인해야 합니다.
2. 식품의 종류와 수량에 따라 샘플링 수량과 방법은 표준검사방법의 요구사항에 따라 실시해야 한다.
3. 검체채취 시 무균작업에 주의하고, 환경미생물 오염을 방지하기 위해 용기를 멸균해야 합니다. 용기는 크레오살 비누 용액, 클로르메티오닌, 알코올 및 기타 소독제를 사용한 소독을 해서는 안 되며, 이러한 소독제나 항생제를 함유해서는 안 됩니다. 검체 내 미생물이 죽는 것을 방지하기 위해 사용하는 가위, 칼, 숟가락도 사용하기 전에 소독해야 합니다.
4. 검체는 채취 후 즉시 검사실로 보내 검사를 받아야 합니다. 검사 과정은 일반적으로 3시간을 초과하지 않습니다. 거리가 긴 경우에는 1~5℃ 환경에서 보관 가능합니다. 냉동해야 할 경우에는 냉동 상태로 보관해야 합니다. 검사를 위해 제출하세요.
5. 검사실에서는 시료를 접수한 후 이를 등록(시료명, 검사단위, 수량, 날짜, 번호 등)하고 시료의 외관을 관찰합니다. 다음 중 하나에 해당하는 경우 검사가 거부될 수 있습니다.
(1) 특수 고압살균, 삶기 또는 기타 방법으로 멸균된 샘플은 원래 식품을 대표하는 의미를 상실합니다.
(2) 식품의 병, 봉지가 개봉되었거나 조리된 육류 및 그 제품, 조리된 가금류 및 기타 식품이 파손되거나 불완전하여 원래의 식품 형태가 손실된 경우(식중독 샘플 제외)
(3) 샘플링 수량이 요구되는 만큼 충분하지 않습니다.
검사실은 검사를 위해 제출된 샘플이 요구사항을 충족하는 경우 수령 후 즉시 검사를 실시해야 합니다. 조건에 맞지 않을 경우에는 4℃ 냉장고에 보관하고, 제때에 조건을 만들 수 있도록 준비한 후 검사를 실시한다.
6. 시료를 검사할 때에는 시료의 성질에 따라 적절한 처리를 하여 주십시오.
(1) 액상검체를 접종할 때에는 충분히 혼합하여 그 양에 따라 접종하여야 한다.
(2) 고형검체의 경우 멸균칼을 이용하여 각 부분 25g을 잘라내어 멸균식염수 또는 기타 용액 225mL에 넣고 호모지나이저로 분쇄 혼합한 후 양에 따라 접종한다.
(3) 식품이 담긴 병, 봉지는 소독하여 개봉하여야 하며, 접종 전 특성에 따라 위의 방법을 선택하여야 한다.
샘플 검사, 기록 및 보고 요구 사항
1. 검사실은 샘플을 받은 후 우선 외관검사를 실시하고, 국가표준 검사방법에 따라 신속하게 검사를 실시합니다. 검사 과정에서 무균 작업은 주의 깊게, 책임감 있게, 엄격하게 수행되어야 합니다.미생물 테스트 결과환경 오염.
2. 시료검사 과정에서 사용된 방법, 발생한 현상 및 결과 등은 결과 분석 및 판단의 근거로 시험기록부에 기재되어야 한다. 기록은 상세하고, 명확하고, 진실되고, 객관적이어야 하며, 변경되거나 위조되어서는 안 됩니다.
무균 작업 요구 사항:
1.균 접종 시에는 반드시 작업복과 작업모를 착용해야 합니다.
2. 식품검체 접종 시에는 반드시 특수 작업복, 모자, 슬리퍼를 착용하여야 하며, 멸균실 완충실에 비치하고 작업 전 UV 소독 후 사용하여야 한다.
3. 식품검체 접종 시, 멸균실 입실 전 비누로 손을 씻은 후, 알코올 75% 화장솜으로 손을 깨끗이 닦아주세요.
4. 접종에 사용되는 빨대, 납작한 접시, 배양액 등은 반드시 소독 및 소독하여야 한다. 사용하지 않은 용기는 포장을 개봉한 후 그대로 두어서는 안 됩니다. 금속 기구는 사용하기 전에 고압멸균 처리하거나 95% 알코올로 3회 소각해야 합니다.
5. 빨대를 포장에서 꺼낼 때 빨대 끝부분이 노출된 부분에 닿지 않도록 해주세요. 시험관이나 접시에 접종하기 위해 빨대를 사용할 때, 빨대의 끝부분이 시험관이나 접시의 가장자리에 닿아서는 안 된다.
6. 검체접종 및 세균이송은 반드시 알코올 램프 앞에서 이루어져야 합니다. 세균이나 검체를 접종할 때에는 빨대를 포장에서 꺼내어 시험관 마개를 연 후 반드시 화염멸균을 해야 합니다.
7. 균을 접종하기 전에 접종 루프와 바늘의 금속선을 모두 불꽃으로 태워야 하며, 필요한 경우 루프와 바늘, 막대 사이의 연결 부위도 태워야 한다. 결핵균 및 악성균을 접종하기 위한 접종루프는 끓는 물에 5분간 끓인 후 불에 태워야 합니다.
8. 빨대로 세균액이나 검체를 빨 때 해당 고무팁을 사용하여 빨고 입으로 직접 빨지 마십시오.
멸균실 사용 요구 사항:
1. 무균실 외부로 통하는 창문은 이중으로 밀봉하여 밀봉하여야 한다. 임의로 열어서는 안됩니다. 멸균실 규모에 맞는 완충실과 미닫이문이 있어야 한다. 0.5~0.7㎡ 정도의 작은 창문도 있어야 한다. 무균실 입실 후 물품 전달을 위한 준비입니다.
2. 무균실은 청결하게 유지되어야 한다. 작업 후에는 2~3% 크레졸 비눗물로 소독하고, 작업대 표면을 닦아야 하며, 실험과 관련 없는 물건을 보관해서는 안 됩니다.
3. 멸균실의 문은 사용 전후에 꼭 닫아야 하며, 자외선 램프를 켜야 합니다. 소독을 위해 실내 매달린 자외선 램프를 사용하는 경우 30W 자외선 램프가 필요합니다. 거리는 1.0m, 조사시간은 30분 이상이다. 자외선 램프를 사용할 때는 손상을 방지하기 위해 자외선 아래에서 직접 작동하도록 주의해야 합니다. 램프는 2주마다 알코올 면봉으로 부드럽게 닦아 먼지와 기름을 제거하여 자외선 침투의 영향을 줄여야 합니다.
4. 식품 검체를 가공 및 접종하는 경우에는 무균실에 들어가 작업하여야 하며 임의로 출입을 금한다. 물건을 전달해야 할 경우 작은 창을 통해 전달할 수 있습니다.
5. 무균실에 에어컨을 설치해야 하는 경우에는 필터링 장치가 있어야 합니다.
소독 및 멸균 요구 사항
유리제품, 금속기구, 배양액 등미생물학적 테스트, 오염되고 접종된 배양물 등은 사용하기 전에 반드시 멸균해야 합니다. 건열 및 습열압력 증기멸균 방식.
1. 멸균 전 준비사항
(1) 멸균이 필요한 모든 물품은 먼저 세척하고 건조시켜야 합니다. 빨대, 납작한 접시 등 유리제품은 종이로 단단히 포장해야 합니다. 금속 튜브를 사용하는 경우에는 환기 구멍을 열어야 합니다.
(2) 배양액이 담긴 삼각플라스크의 마개를 종이로 감싸고 시험관을 덮은 후 주사기의 심지를 빼내고 거즈로 감싼다.
2. 설치
(1) 건열 멸균기: 품목이 너무 빽빽하지 않아야 하며 상자의 네 벽에 닿아서는 안 됩니다.
(2) 대형 고압증기조리기 : 멸균물을 넣고 따로 포장하여 멸균통에 직접 넣는다. 항목을 너무 많이 채우지 마십시오.
3. 장비 점검
(1) 도어 스위치가 유연한지, 고무 링이 손상되었는지, 평평한지 확인하십시오.
(2) 증기가 배출되면 압력계가 영점 위치에 있는지 확인하고 문과 덮개를 닫고 증기 또는 열을 환기시켜 공기 누출 여부, 압력계와 온도계의 표시 조건이 일치하는지, 배관이 막혔는지 여부를 관찰하십시오.
(3) 자동 전자 프로그램 제어 장치를 갖춘 멸균기의 경우, 사용 전에 지정된 프로그램을 확인하여 멸균 요구 사항을 충족하는지 확인해야 합니다.
4. 살균처리
(1) 건열멸균 방법 :
이 방법은 건열 조건에서도 손상, 변질, 증발하지 않는 품목에 적합합니다. 유리 제품, 금속 제품, 세라믹 제품 등을 살균하는 데 더 일반적으로 사용됩니다.
①기구 및 기구는 표면에 부착된 먼지가 탄화되는 것을 방지하기 위해 건조하기 전에 반드시 세척해야 합니다.
② 멸균 시 물품이 너무 과밀하지 않도록 하고, 상자 바닥과 벽면에 직접 닿지 않도록 하며, 물품 사이에 틈을 남겨두어야 합니다.
③ 살균 중에는 문을 꼭 닫고 전원을 연결한 후 배기구를 30분 정도 열어 살균기 내부의 찬 공기를 빼내고, 온도가 160°C가 되면 표시등을 조절하여 1.5~2시간 동안 유지합니다.
④멸균 완료 후 또는 온도 상승 과정 중에는 60°C 이하에서 도어를 열어야 합니다.
(2) 휴대용 압력밥솥이나 수직형 압력증기멸균기를 사용하는 경우에는 다음의 단계를 따라야 한다.
① 휴대용 압력밥솥 본체에 물 3L, 세로형 압력밥솥에 16L의 물을 추가합니다. (재사용 시 물의 양을 보충해야 하며, 탁해지면 교체해야 합니다.)
② 휴대용 압력밥솥의 경우, 상부커버에 있는 배기관을 멸균통 내벽에 있는 사각관에 삽입한다(호스가 없거나 호스가 부식되거나 갈라진 멸균기는 사용하지 않는다).
③ 공기 누출을 방지하기 위해 상단 덮개를 덮고 단단히 조이십시오. 살균기를 화원 위에 올려 가열한 후 수직형 압력밥솥의 전원을 켜고 윗뚜껑 배기밸브를 열어 공기를 빼준다(물이 끓은 후 10~15분간 배기).
④배기 밸브를 닫아 증기압을 규정된 요구사항까지 높이고 규정된 시간 동안 유지합니다(멸균 물품의 성격 및 관련 상황에 따라 다름).
⑤ 지정시간이 경과한 후, 건조가 필요한 품목은 즉시 배기밸브를 열어 증기를 배출시켜 주십시오. 압력이 0으로 돌아오면 60°C까지 자연 식힌 후 뚜껑을 열어 내용물을 꺼냅니다. 액체류인 경우 배기밸브를 열지 마십시오. 즉시 냄비를 열원에서 꺼내 압력이 0으로 돌아가고 온도가 60°C 아래로 떨어질 때까지 자연 식힌 후 뚜껑을 열어 내용물을 꺼내야 합니다. 이는 용기가 격렬하게 끓거나 폭발하여 액체가 갑자기 감압되는 것을 방지하기 위함입니다.
(3) 수평형 압력솥 증기멸균기를 사용하려면 다음 단계를 따르십시오.
①냄비 문을 단단히 닫고 공기 흡입 밸브를 열고 메자닌에 증기를 넣어 예열하면 메자닌의 차가운 공기가 자동으로 공기 장벽을 통해 배출됩니다.
②중간층이 미리 정해진 온도에 도달한 후 포트 챔버의 공기 흡입 밸브를 열고 포트 챔버에 증기를 도입하면 포트 챔버의 차가운 공기가 포트 챔버 공기 방지 장치를 통해 자동으로 배출됩니다.
③포트 챔버의 압력과 온도가 지정된 압력에 도달하면 공기 흡입 밸브를 조정하여 일정하게 유지합니다.
④ 물품을 꺼내기 위해 문을 열기 전에 자연 또는 인위적으로 온도를 60℃로 식혀 주십시오. 급격한 압력 강하, 액체의 격렬한 비등 또는 용기 폭발을 방지하기 위해 급속 증기 배출 방법을 사용하지 마십시오.
⑤ 자동프로그램식 고압증기멸균기를 사용할 경우 물품을 올려놓고 문을 단단히 닫은 후 물품의 종류에 따라 해당 스위치를 눌러야 필요한 절차에 따라 자동으로 멸균이 진행된다. 멸균 중에는 반드시 부착된 기구를 사용하여 온도와 시간을 기록해야 합니다. 나중에 참조할 수 있도록 작동 요구 사항은 제조업체의 지침을 엄격히 준수해야 합니다.
5. 멸균온도 및 시간
(1) 건열멸균기의 멸균온도는 160℃, 1.5~2h이다.
(2) 가압증기멸균기의 멸균온도 및 시간
간헐살균방식
1. 살균 방법:
압력을 가하지 않고 증기 멸균을 사용합니다. 고압 증기 멸균에 의해 일부 물질은 쉽게 파괴되므로 이 방법을 멸균에 사용할 수 있다.
(1) 냄비에 소독할 물건을 넣고 윗뚜껑을 덮은 후 배수구를 열어 냄비에 남은 물을 빼냅니다.
(2) 배수구를 닫고 공기 흡입구를 열어 필요에 따라 10~20분간 소독합니다.
(3) 멸균이 완료되면 공기주입구 문을 닫고 물품을 꺼내어 실온으로 냉각될 때까지 기다린 후 37°C 인큐베이터에 하룻밤 넣어두고 다음날 위의 방법으로 멸균을 계속합니다. 살균 목적을 달성하려면 이 작업을 세 번 수행하십시오.
2. 혈청 응고제 사용 방법:
배양 배지에 혈청이나 계란과 같은 특수 성분이 포함되어 있는 경우 높은 열로 인해 영양분이 파괴됩니다. 따라서 저온을 사용하여 혈청을 응고시키고 멸균 목적을 달성할 수 있습니다.
(1) 본 방법으로 멸균한 혈청을 분주하여 사용할 경우에는 무균작업을 엄격히 준수하여야 하며, 시험관 및 플레이트도 멸균한 후 사용하여야 한다.
(2) 필요에 따라 배지를 경사지나 높은 층으로 만든다. 물을 충분히 넣은 후 전원을 연결하고 75~90°C까지 1시간 동안 온도를 올린 후 멸균해주세요. 37°C 인큐베이터에 하룻밤 넣어둔 후 3회 소독합니다.
3. 끓여서 소독합니다.
끓는 냄비나 끓는 소독기를 사용할 수 있습니다. 물이 끓으면 5~15분 정도 삶아주세요. 물에 2% 석탄산을 넣고 5분간 끓여도 됩니다. 0.02% 포름알데히드를 첨가하고 80°C에서 60분간 끓여 살균 목적을 달성한다. 그러나 끓는점멸균은 달성될 수 있다. 강화제를 사용할 때에는 물품의 부식성에 주의해야 합니다.
4. 살균 처리:
멸균 후 품목은 일반적인 상황에서 이미 멸균 상태입니다. 재오염을 방지하기 위해 멸균기에서 꺼낼 때 주의 깊게 검사하고 배치해야 합니다.
(1) 물품을 꺼내고 즉시 포장 상태를 확인하십시오. 손상이 있거나 탐폰을 제거한 경우에는 멸균용품으로 사용할 수 없습니다.
(2) 꺼낸 품목은 포장이 물에 완전히 젖어 있는 경우 멸균 품목으로 사용할 수 없습니다.
(3) 배양액이나 시약은 멸균 후 색상이나 상태에 맞는지 확인한다. 요구 사항을 충족하지 않는 것은 폐기되어야 합니다.
(4) 개방형 용기의 경우, 꺼낼 때 스크린 구멍을 닫아야 합니다.
(5) 제거된 물품이 땅에 떨어지거나, 불결한 곳에 잘못 놓였거나, 물에 더러워진 경우 오염된 것으로 간주되어 멸균 물품으로 사용할 수 없습니다.
(6) 꺼낸 적격 멸균 품목은 보관실 또는 방진 캐비닛에 보관해야하며 멸균되지 않은 품목과 혼합하는 것을 엄격히 금지합니다.
(7) 모든 적격 품목에는 멸균 날짜와 만료 날짜가 표시되어야 합니다.
(8) 각 일괄 멸균 처리가 완료된 후 멸균 제품의 명칭, 수량, 온도, 시간 및 작업자를 기록합니다.
독성 및 박테리아 폐기물 처리 요구 사항
미생물 실험에 사용되는 실험 장비 및 배양균은 소독 없이 실험실 밖으로 반출되어서는 안 됩니다.
1. 배양된 오염물질 및 폐기물은 밀폐용기나 철망바구니에 담아 균일하게 고압멸균될 때까지 지정된 장소에 중앙에 보관해야 합니다.
2. 미생물에 오염된 배양물은 121°C에서 30분간 고압멸균해야 합니다.
3. 사용 후 오염된 빨대를 5% 크레올비누액 또는 석탄산용액에 넣어 최소 24시간 동안 담가둔 후(소독액이 담그는 높이보다 낮아서는 안 된다) 121℃에서 30분간 고압멸균해야 한다.
4. 얼룩 염색 및 헹굼용 액체는 일반적으로 하수구로 직접 흘러 들어갈 수 있습니다. 악성 박테리아에 대한 헹굼액은 하수구에 부어지기 전에 비이커에 담아 고압으로 멸균해야 합니다. 염색된 슬라이드를 5% 크레졸 비눗물에 담급니다. 24시간 동안 물에 담가둔 후 끓여서 씻어주세요. 응집 테스트에 사용되는 슬라이드나 접시는 고압멸균 후 세척해야 합니다.
5. 배양균을 파쇄한 후 즉시 오염된 부위에 5% 크레졸비누액 또는 석탄산용액을 뿌려 담근 후 30분 정도 담근 후 깨끗이 닦아주세요.
오염된 작업복이나 폭력적인 실험에 착용한 작업복, 모자, 마스크 등은 특수소독백에 넣어 고압멸균한 후 세탁하여야 한다.
매체 준비 요구 사항
다양한 미생물은 서로 다른 영양 요구사항과 배양 목적을 갖고 있기 때문에 배양 배지 준비의 품질은 미생물의 성장에 직접적인 영향을 미칩니다. 다양한 배양 배지의 준비 요건은 다음과 같습니다.
1. 중배합에 따라 재료의 무게를 잰 후 증류수에 녹입니다. 적용되는 시약 및 약물의 품질을 사용 전에 검사해야 합니다.
2. pH 측정 및 조정: pH 측정은 배양액을 실온으로 식힌 상태에서 수행해야 합니다. 이는 뜨겁거나 차가운 조건에서 pH에 일정한 차이가 있기 때문입니다. 계량이 완료되면 계산된 양에 따라 알칼리 또는 산을 첨가하고 잘 섞는다. 다시 테스트해야합니다. 배양 배지의 pH 값은 정확해야 합니다. 그렇지 않으면 미생물의 성장이나 결과 관찰에 영향을 미칠 수 있습니다. 다만, 고압살균은 일부 배양액의 pH의 감소 또는 증가에 영향을 미칠 수 있으므로, 배양액의 품질에 영향을 미치는 것을 피하기 위해 너무 높은 압력이나 너무 많은 횟수로 살균하는 것은 바람직하지 않다는 점에 유의해야 한다. 지시약, 데옥시콜산나트륨, 한천 등은 일반적으로 pH를 조정한 후 첨가한다.
3. 세균 증식을 쉽게 관찰할 수 있도록 배양배지를 깨끗하게 유지해야 합니다. 배양 배지를 가열하고 끓인 후 흡수성 면이나 플란넬로 여과하여 침전물을 제거할 수 있습니다. 필요한 경우 달걀 흰자로 명확하게 할 수 있습니다. 사용된 한천 스트립은 미리 세척하고 건조해야 합니다. 사용하기 전에 한천의 불순물로 인해 투명성에 영향을 미치지 마십시오.
4. 철, 구리 및 기타 용기를 사용하여 배양액을 담지 마십시오. 깨끗한 중성 경질유리 용기를 사용하는 것이 좋습니다.
5. 배양액의 멸균은 완전한 멸균의 목적을 달성할 뿐만 아니라 가열로 인해 배지의 영양가가 저하되지 않도록 주의해야 한다. 일반적으로 121°C에서 15분이면 충분합니다. 당류, 혈청, 젤라틴 등 고열에 견디지 못하는 물질을 함유한 배양액은 저온살균 또는 간헐적인 방법으로 멸균하여야 한다. 텔루르산칼륨, 난황, TTC, 항생제 등과 같이 가열할 수 없는 일부 시약은 기본 한천을 고압멸균한 후 약 50°C로 냉각한 후 첨가해야 합니다.
6. 각 배치의 배양액을 준비한 후 멸균증식시험과 시험균주의 생육시험을 실시한다. 생화학배양배지인 경우 표준균주를 사용하여 접종 및 배양하고 생화학반응 결과를 관찰한다. 정상적인 반응을 보여야 합니다. 배양 배지를 너무 오랫동안 보관하면 안 됩니다. 필요한 경우 4°C 냉장고에 보관할 수 있습니다.
7. 현재 건조배지의 종류는 다양하다. 각 배치는 성장 테스트 또는 생화학 반응 관찰을 위해 표준 균주를 사용해야 합니다. 다양한 배양배지는 해당 균주의 생장시험이 양호해야 사용할 수 있습니다. 새로 구입한 것이나 오랫동안 보관한 것을 건조시킨 것을 사용할 수 있습니다. 배양액을 조제할 때에도 배양액의 pH를 측정해야 하며, 용량과 방법은 제품 설명서에 따라야 한다.
8. 조제된 배양배지의 각 배치에 사용된 화학시약, 멸균조건, 균주증식시험결과, 생산인력 등을 기록하여 조회하여야 한다.
시료 수집 및 처리 요구 사항
1. 수집된 검사 샘플은 대표적인 것이어야 합니다. 검체 채취 시 식품 배치의 원재료, 가공, 운송, 보관 방법 및 상태, 주변 환경보건 상태 등을 자세히 조사하여 오염원이 있는지 확인해야 합니다.
2. 식품의 종류와 수량에 따라 샘플링 수량과 방법은 표준검사방법의 요구사항에 따라 실시해야 한다.
3. 검체채취 시 무균작업에 주의하고, 환경미생물 오염을 방지하기 위해 용기를 멸균해야 합니다. 용기는 크레오살 비누 용액, 클로르메티오닌, 알코올 및 기타 소독제를 사용한 소독을 해서는 안 되며, 이러한 소독제나 항생제를 함유해서는 안 됩니다. 검체 내 미생물이 죽는 것을 방지하기 위해 사용하는 가위, 칼, 숟가락도 사용하기 전에 소독해야 합니다.
4. 검체는 채취 후 즉시 검사실로 보내 검사를 받아야 합니다. 검사 과정은 일반적으로 3시간을 초과하지 않습니다. 거리가 긴 경우에는 1~5℃ 환경에서 보관 가능합니다. 냉동해야 할 경우에는 냉동 상태로 보관해야 합니다. 검사를 위해 제출하세요.
5. 검사실에서는 시료를 접수한 후 이를 등록(시료명, 검사단위, 수량, 날짜, 번호 등)하고 시료의 외관을 관찰합니다. 다음 중 하나에 해당하는 경우 검사가 거부될 수 있습니다.
(1) 특수 고압살균, 삶기 또는 기타 방법으로 멸균된 샘플은 원래 식품을 대표하는 의미를 상실합니다.
(2) 식품의 병, 봉지가 개봉되었거나 조리된 육류 및 그 제품, 조리된 가금류 및 기타 식품이 파손되거나 불완전하여 원래의 식품 형태가 손실된 경우(식중독 샘플 제외)
(3) 샘플링 수량이 요구되는 만큼 충분하지 않습니다.
검사실은 검사를 위해 제출된 샘플이 요구사항을 충족하는 경우 수령 후 즉시 검사를 실시해야 합니다. 조건에 맞지 않을 경우에는 4℃ 냉장고에 보관하고, 제때에 조건을 만들 수 있도록 준비한 후 검사를 실시한다.
6. 시료를 검사할 때에는 시료의 성질에 따라 적절한 처리를 하여 주십시오.
(1) 액상검체를 접종할 때에는 충분히 혼합하여 그 양에 따라 접종하여야 한다.
(2) 고형검체의 경우 멸균칼을 이용하여 각 부분 25g을 잘라내어 멸균식염수 또는 기타 용액 225mL에 넣고 호모지나이저로 분쇄 혼합한 후 양에 따라 접종한다.
(3) 식품이 담긴 병, 봉지는 소독하여 개봉하여야 하며, 접종 전 특성에 따라 위의 방법을 선택하여야 한다.
샘플 검사, 기록 및 보고 요구 사항
1. 검사실은 샘플을 받은 후 우선 외관검사를 실시하고, 국가표준 검사방법에 따라 신속하게 검사를 실시합니다. 검사 과정에서 무균 작업은 주의 깊게, 책임감 있게, 엄격하게 수행되어야 합니다.미생물 테스트 결과환경 오염.
2. 시료검사 과정에서 사용된 방법, 발생한 현상 및 결과 등은 결과 분석 및 판단의 근거로 시험기록부에 기재되어야 한다. 기록은 상세하고, 명확하고, 진실되고, 객관적이어야 하며, 변경되거나 위조되어서는 안 됩니다.
