Sammenfatning af mikrobiologiske testkrav
2024-01-24 15:14:33
Kravene og trinene tilmikrobiologisk testninger som følger:
Krav til aseptisk drift:
1.Du skal have arbejdstøj og arbejdshætte på, når du poder bakterier.
2. Ved podning af fødevareprøver skal der bæres særligt arbejdstøj, kasketter og hjemmesko, som skal placeres i det sterile rums bufferrum og anvendes efter UV-desinfektion før arbejdet.
3. Når du inokulerer fødevareprøver, skal du vaske dine hænder med sæbe, før du går ind i det sterile rum, og derefter tørre dine hænder rene med en vatrondel med 75 % alkohol.
4. De sugerør, flade skåle og dyrkningsmedier, der anvendes til podning, skal steriliseres og steriliseres. Ubrugte beholdere bør ikke efterlades ubrugte efter åbning af pakken. Metalredskaber skal autoklaveres eller brændes tre gange med 95 % alkohol før brug.
5. Når sugerøret tages ud af pakken, må spidsen af sugerøret ikke røre de udsatte dele. Når sugerøret bruges til at pode reagensglasset eller pladen, må spidsen af sugerøret ikke røre kanten af reagensglasset eller pladen.
6. Podning af prøver og overførsel af bakterier skal ske foran en spritlampe. Ved podning af bakterier eller prøver skal sugerøret flammesteriliseres, efter at det er taget ud af pakken og åbnet reagensglasproppen.
7. Før inokulering af bakterier skal alle metaltråde i inokulationsløkken og nålen brændes med en flamme, og om nødvendigt skal forbindelsen mellem løkken, nål og stang brændes. Podningssløjfen til inokulering af tuberkulosebakterier og virulente bakterier skal koges i kogende vand i 5 minutter og derefter brændes af flamme.
8. Når du suger bakterievæske eller prøver med et sugerør, skal du bruge den tilsvarende gummispids til at suge den, og ikke suge den direkte med munden.
Krav til brug af sterilt rum:
1. Vinduerne, der fører til ydersiden af sterilrummet, skal være dobbeltglas og forseglet. De bør ikke åbnes efter behag. Der skal være bufferrum og skydedør svarende til sterilrummets størrelse. Der skal også være et lille vindue på 0,5~0,7m2. Som forberedelse til at passere genstande efter indtræden i det sterile rum.
2. Det sterile rum skal holdes rent. Efter arbejdet skal det desinficeres med 2 % til 3 % cresol sæbeopløsning, arbejdsfladen skal tørres af, og genstande, der ikke er relateret til forsøget, bør ikke opbevares.
3. Døren til det sterile rum skal lukkes tæt før og efter brug, og den ultraviolette lampe skal tændes. Hvis en indendørs ophængt ultraviolet lampe bruges til desinfektion, kræves en 30W ultraviolet lampe. Afstanden er 1,0m, og bestrålingstiden er ikke mindre end 30 minutter. Når du bruger ultraviolette lamper, skal du være opmærksom på at arbejde direkte under ultraviolet lys for at undgå beskadigelse. Lampen skal forsigtigt tørres af med en bomuldskugle hver anden uge for at fjerne støv og fedt for at reducere virkningen af ultraviolet indtrængning.
4. Når du behandler og inokulerer fødevareprøver, skal du gå ind i det sterile rum til drift og må ikke komme ind eller ud efter ønske. Hvis genstande skal videregives, kan de føres gennem det lille vindue.
5. Hvis der skal installeres aircondition i det sterile rum, skal der være en filtreringsanordning.
Krav til desinfektion og sterilisering
Glasvarer, metalredskaber og kulturmedier bruges tilmikrobiologisk testning, kontaminerede og inokulerede kulturer osv. skal steriliseres før brug. Tør varme og fugtige varmetryk dampsteriliseringsmetoder.
1. Forberedelse før sterilisering
(1) Alle genstande, der skal steriliseres, skal vaskes og tørres først. Glasvarer som sugerør og flade fade skal være tæt pakket med papir. Hvis der anvendes metalrør, skal ventilationshullerne på dem åbnes.
(2) Pak proppen på den trekantede kolbe, der indeholder dyrkningsmediet, ind i papir, dæk reagensglasset, og træk kernen af sprøjten ud, og pak den ind med gaze.
2. installere
(1) Tørvarmesterilisator: Genstandene må ikke være overfyldte og må ikke røre boksens fire vægge.
(2) Stor højtryksdampkoger: Placer steriliserede genstande, pak dem ind separat, og læg dem direkte i steriliseringscylinderen. Overfyld ikke varerne.
3. Udstyrsinspektion
(1) Tjek om dørkontakten er fleksibel, om gummiringen er beskadiget og om den er flad.
(2) Kontroller, om trykmåleren forbliver i nul-stillingen, når dampen er udtømt, luk lågen og dækslet, udluft damp eller varme, og observer, om der er luftlækage, om forholdene markeret af trykmåleren og termometeret stemmer overens, og om rørledningen er blokeret.
(3) For sterilisatorer med automatiske elektroniske programstyringsanordninger bør det specificerede program kontrolleres før brug for at se, om det opfylder kravene til sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Tør varmesteriliseringsmetode:
Denne metode er velegnet til genstande, der ikke beskadiger, forringes eller fordamper under tørre varmeforhold. Det er mere almindeligt brugt til sterilisering af glasvarer, metalprodukter, keramiske produkter osv.
①Instrumenter og redskaber skal vaskes før tørbagning for at forhindre, at snavs på overfladen bliver forkullet.
② Under steriliseringen må genstandene ikke være overfyldte, de må ikke komme i direkte kontakt med bunden og væggen af æsken, og efterlade mellemrum mellem emnerne.
③ Under sterilisering, luk døren tæt, tilslut strømforsyningen, åbn udstødningshullet i ca. 30 minutter for at fjerne den kolde luft i sterilisatoren, juster indikatorlyset, når temperaturen stiger til 160°C, og hold det i 1,5 til 2 timer.
④Efter steriliseringen er afsluttet eller under temperaturstigningsprocessen, skal døren åbnes under 60°C.
(2) Følgende trin skal følges, når du bruger en bærbar trykkoger eller vertikal trykdampsterilisator:
① Tilsæt 3L vand til hoveddelen af den bærbare trykkoger og 16L vand til den lodrette trykkoger (vandmængden skal efterfyldes, når den genbruges, og vandet skal udskiftes, hvis det bliver uklart);
② For en bærbar trykkoger skal udstødningsrøret på topdækslet indsættes i det firkantede rør på indervæggen af sterilisationsbeholderen (sterilisatorer uden slanger eller dem med korroderede og revnede slanger må ikke anvendes);
③ Dæk topdækslet til, og spænd det godt til for at forhindre luftlækage; anbring sterilisatoren på ildkilden for at varme, tænd for strømmen til den lodrette trykkoger, og åbn udstødningsventilen på topdækslet for at slippe luften ud (udblæsningsluft i 10 til 15 minutter efter vandet koger) );
④Luk udstødningsventilen for at hæve damptrykket til de specificerede krav og bibehold det i den specificerede tid (afhængigt af arten af de steriliserede genstande og relevante omstændigheder);
⑤ Når den angivne tid er nået, for emner, der skal tørres, skal du straks åbne udstødningsventilen for at udlede dampen. Når trykket vender tilbage til nul, afkøles det naturligt til 60°C og åbner derefter låget for at tage emnerne ud. Hvis det er en flydende genstand, må du ikke åbne udstødningsventilen. Gryden skal fjernes fra varmekilden med det samme og have lov til at afkøle naturligt, indtil trykket vender tilbage til nul, og temperaturen falder til under 60°C, før låget åbnes for at tage indholdet ud for at forhindre pludselig dekompression af væsken fra voldsom kogning eller eksplosion af beholderen.
(3) Følg følgende trin for at bruge den vandrette trykkoger dampsterilisator:
①Luk grydeløren tæt, åbn luftindtagsventilen, tilfør damp i mezzaninen til forvarmning, og den kolde luft i mezzaninen vil automatisk blive udledt gennem luftbarrieren;
②Efter at mellemlaget har nået den forudbestemte temperatur, skal du åbne grydekammerets luftindtagsventil, indføre dampen i grydekammeret, og den kolde luft i grydekammeret vil automatisk blive udledt gennem grydekammerets luftafleder;
③Når trykket og temperaturen i grydekammeret når det specificerede tryk, skal du justere luftindtagsventilen for at holde den konstant;
④ Afkøl temperaturen naturligt eller kunstigt til 60 ℃, før du åbner døren for at tage genstandene ud. Brug ikke den hurtige dampudledningsmetode for at forhindre pludseligt trykfald, voldsom kogning af væsken eller eksplosion af beholderen;
⑤ Når du bruger en automatisk program-kontrolleret trykdampsterilisator, efter at have anbragt emnerne og lukket døren tæt, skal den tilsvarende kontakt trykkes i overensstemmelse med kategorien af emnerne, så steriliseringen kan udføres automatisk i overensstemmelse med de nødvendige procedurer. Under steriliseringen skal det påsatte instrument bruges til at registrere temperatur og tid. Til fremtidig reference bør driftskravene være strengt i overensstemmelse med producentens instruktioner;
5. Steriliseringstemperatur og -tid
(1) Steriliseringstemperaturen for tørvarmesterilisator er 160 ℃, 1,5 ~ 2 timer.
(2) Steriliseringstemperatur og tid for trykdampsterilisator
Intermitterende steriliseringsmetode
1. Steriliseringsmetode:
Brug dampsterilisering uden tryk. Nogle stoffer ødelægges let ved højtryksdampsterilisering, så denne metode kan bruges til sterilisering.
(1) Anbring genstandene, der skal steriliseres, i gryden, dæk låget til, åbn afløbsåbningen, og dræn det resterende vand i gryden væk.
(2) Luk afløbsudløbet, åbn luftindtagslågen, og desinficer i 10 til 20 minutter efter behov.
(3) Når steriliseringen er afsluttet, lukkes luftindtagsdøren, tages emnerne ud og vente til afkøling til stuetemperatur, anbringes i en 37°C inkubator natten over og fortsætte med at sterilisere i henhold til ovenstående metode næste dag. Gør dette tre gange for at opnå formålet med sterilisering.
2. Sådan bruges serumkoagulatoren:
Når dyrkningsmediet indeholder specielle ingredienser såsom serum eller æg, vil høj varme ødelægge dets næringsstoffer. Derfor kan lav temperatur bruges til at koagulere serumet og opnå steriliseringsformål:
(1) Ved anvendelse af serum steriliseret ved denne metode til alikvotering, skal aseptiske operationer følges nøje, og reagensglas og plader skal også steriliseres før brug;
(2) Gør dyrkningsmediet til et skrånende eller højt lag efter behov. Efter tilsætning af nok vand skal du tilslutte strømforsyningen, hæve temperaturen til 75~90°C i en time og derefter sterilisere den. Placer det i en 37°C inkubator natten over, og steriliser det derefter tre gange.
3. Kog og desinficer:
Du kan bruge en kogende gryde eller kogende sterilisator. Når vandet koger, koges det i 5 til 15 minutter. Du kan også tilføje 2% carbolsyre til vandet og koge det i 5 minutter. Tilsæt 0,02% formaldehyd og kog det ved 80°C i 60 minutter for at opnå formålet med sterilisering. Kogende sterilisering kan dog opnås. Når du bruger forstærkere, skal du være opmærksom på genstandenes ætsningsevne.
4. Steriliseringsbehandling:
Efter sterilisering er genstande allerede sterile under normale omstændigheder. De skal omhyggeligt inspiceres og placeres, når de tages ud af sterilisatoren for at undgå genkontaminering;
(1) Tag genstandene ud og kontroller emballagens integritet med det samme. Hvis der er skader eller tamponen fjernes, kan den ikke bruges som sterile genstande;
(2) De udtagne genstande kan ikke bruges som sterile genstande, hvis deres emballage åbenlyst er gennemblødt i vand;
(3) Dyrkningsmediet eller reagenserne bør kontrolleres for at se, om de opfylder farven eller tilstanden efter sterilisering. Dem, der ikke opfylder kravene, skal kasseres;
(4) For åbne-lukke beholdere skal skærmhullerne lukkes, når de tages ud;
(5) Hvis de fjernede genstande falder til jorden, er forlagt et urent sted eller er plettet med vand, anses de for at være forurenede og kan ikke bruges som sterile genstande;
(6) De kvalificerede steriliserede genstande, der tages ud, skal opbevares i opbevaringsrummet eller i det støvtætte skab, og det er strengt forbudt at blande dem med usteriliserede genstande;
(7) Alle kvalificerede genstande skal mærkes med steriliseringsdatoen og udløbsdatoen;
(8) Efter hver batch af steriliseringsbehandling er afsluttet, noter navn, mængde, temperatur, tid og operatør af de steriliserede produkter.
Krav til behandling af giftigt og bakterielt affald
Eksperimentelt udstyr og kulturer anvendt i mikrobiologiske forsøg må ikke tages ud af laboratoriet uden desinfektion.
1. Kulturerede forurenede materialer og affald skal placeres i tætte beholdere eller trådkurve og opbevares centralt på udpegede steder, indtil de er ensartet autoklaveret.
2. Kulturer kontamineret med mikroorganismer skal autoklaveres ved 121°C i 30 minutter.
3. Efter brug skal de forurenede sugerør lægges i 5 % creol-sæbeopløsning eller carbolsyreopløsning, udblødes i mindst 24 timer (desinfektionsvæsken må ikke være lavere end iblødsætningshøjden), og derefter steriliseres ved højtryk ved 121°C i 30 minutter.
4. Væsken til farvning og skylning af udtværinger kan generelt skylles direkte i kloakken. Skyllevæsken til virulente bakterier skal skylles i et bægerglas og steriliseres ved højtryk, inden den hældes i kloakken. De farvede objektglas puttes i 5% cresol sæbeopløsning. Efter iblødsætning i vand i 24 timer, kog og vask. Objektglassene eller skålene, der anvendes til agglutinationstestning, skal autoklaveres og derefter vaskes.
5. Efter at kulturen er brudt, sprøjtes og blødgøres de kontaminerede dele straks med 5 % cresol-sæbeopløsning eller carbolsyreopløsning, lægges i blød i en halv time og derefter tørres af.
Forurenet arbejdstøj eller arbejdstøj, kasketter, masker osv., som bæres til voldsomme tests, skal anbringes i særlige desinfektionsposer og steriliseres ved højtryk, inden det vaskes.
Medium forberedelseskrav
Kvaliteten af dyrkningsmediet vil direkte påvirke væksten af mikroorganismer, fordi forskellige mikroorganismer har forskellige ernæringsmæssige krav og forskellige dyrkningsformål. Forberedelseskravene til forskellige kulturmedier er som følger:
1. Vej ingredienserne efter middelformlen, og opløs dem derefter i destilleret vand. Kvaliteten af de anvendte reagenser og lægemidler bør inspiceres før brug.
2. pH-måling og justering: pH-måling bør udføres, når dyrkningsmediet er afkølet til stuetemperatur, fordi der er en vis forskel i pH under varme eller kolde forhold. Når målingen er afsluttet, tilsæt alkali eller syre i henhold til den beregnede mængde og bland godt. Skal testes igen. Dyrkningsmediets pH-værdi skal være nøjagtig, ellers vil det påvirke væksten af mikroorganismer eller påvirke observationen af resultater. Det skal dog bemærkes, at højtrykssterilisering kan påvirke faldet eller stigningen af pH i nogle dyrkningsmedier, så det er ikke tilrådeligt at sterilisere ved for højt tryk eller for mange gange for at undgå at påvirke dyrkningsmediets kvalitet. Indikatorer, natrium deoxycholat, agar, etc. er generelt Tilføj det efter justering af pH.
3. Dyrkningsmediet skal holdes klart for at lette observation af bakterievækst. Efter at dyrkningsmediet er opvarmet og kogt, kan det filtreres med absorberende bomuld eller flannel for at fjerne sediment. Om nødvendigt kan den klares med æggehvide. De anvendte agarstrimler skal vaskes og tørres på forhånd. Før brug skal du undgå at påvirke gennemsigtigheden på grund af urenheder i agaren.
4. Jern, kobber og andre beholdere bør ikke bruges til at holde dyrkningsmediet. Det er bedre at bruge rene neutrale hårde glasbeholdere.
5. Steriliseringen af dyrkningsmediet skal ikke kun opnå formålet med fuldstændig sterilisering, men også være opmærksom på ikke at reducere dets næringsværdi på grund af opvarmning. Generelt er 121°C i 15 minutter tilstrækkeligt. Til dyrkningsmedier, der indeholder stoffer, der er intolerante over for høj varme, såsom sukker og serum, bør gelatine osv. steriliseres ved lav temperatur eller intermitterende metode. Nogle reagenser, der ikke kan opvarmes, såsom kaliumtellurit, æggeblomme, TTC, antibiotika osv., bør afkøles til ca. 50°C, efter at basisagaren er autoklaveret og derefter tilsat;
6. Efter hver batch af dyrkningsmedier er klargjort, skal der udføres en steril væksttest og en væksttest af de testede stammer. Hvis det er et biokemisk dyrkningsmedium, skal du bruge standard bakteriestammer til podning og dyrkning og observere de biokemiske reaktionsresultater. Det skal vise en normal reaktion. Dyrkningsmediet bør ikke opbevares for længe. Om nødvendigt kan den opbevares i et 4°C køleskab.
7. På nuværende tidspunkt findes der mange slags tørdyrkningsmedier. Hver batch skal bruge standardstammer til væksttest eller biokemisk reaktionsobservation. Forskellige dyrkningsmedier kan kun anvendes, efter at væksttesten af de tilsvarende stammer er god. Nyindkøbte eller tørrede, der har været opbevaret i lang tid, kan bruges. Dyrkningsmediets pH bør også måles, når det tilberedes, og doseringen og metoden skal følges i henhold til produktvejledningen.
8. De kemiske reagenser, steriliseringsbetingelser, stammevæksttestresultater og produktionspersonale, der anvendes i hver batch af forberedte dyrkningsmedier, skal registreres til forespørgsel.
Krav til prøveindsamling og behandling
1. De indsamlede kontrolprøver skal være repræsentative. Ved prøveudtagning bør råmaterialer, forarbejdning, transport, opbevaringsmetoder og betingelser for fødevarepartiet, de omgivende miljømæssige sundhedsforhold osv. undersøges i detaljer for at kontrollere, om der er kilder til forurening.
2. Afhængigt af typen og mængden af fødevarer skal prøveudtagningsmængden og -metoden udføres i overensstemmelse med kravene til standardinspektionsmetoder.
3. Vær opmærksom på aseptisk drift ved prøvetagning, og beholderen skal steriliseres for at undgå mikrobiel kontaminering i miljøet. Beholderen må ikke steriliseres med creosal sæbeopløsning, sterilisering med chlormethionin, alkohol og andre desinfektionsmidler, og den må ikke indeholde sådanne desinfektionsmidler eller antibiotika. For at undgå at dræbe mikroorganismer i prøven, skal de anvendte sakse, knive og skeer også steriliseres før brug.
4. Prøver skal sendes til inspektionslokalet til inspektion umiddelbart efter afhentning. Inspektionsprocessen overstiger generelt ikke 3 timer. Hvis afstanden er lang, kan den opbevares i et miljø på 1 ~ 5 ℃. Skal den fryses, skal den opbevares i frossen tilstand. Indsendes til eftersyn.
5. Efter modtagelse af prøven vil inspektionsrummet registrere den (prøvenavn, inspektionsenhed, mængde, dato, antal osv.) og observere prøvens udseende. Hvis en af følgende forhold konstateres, kan inspektionen afvises:
(1) Prøver, der er blevet steriliseret ved særlige højtryks-, koge- eller andre metoder, vil miste deres betydning for at repræsentere den originale fødevare;
(2) Flasker og poser med mad er blevet åbnet, kogt kød og dets produkter, kogt fjerkræ og andre fødevarer er blevet ødelagt og ufuldstændige, dvs. den oprindelige madform er gået tabt (undtagen madforgiftningsprøver);
(3) Prøveudtagningsmængden er utilstrækkelig som krævet;
For prøver indsendt til inspektion, der opfylder kravene, bør inspektionsrummet straks foretage inspektion efter modtagelse af dem. Hvis betingelserne ikke er opfyldt, skal de opbevares i et 4°C køleskab, forberedes til at skabe betingelser i tide og derefter foretage inspektion.
6. Når du inspicerer prøver, skal du udføre passende behandling i henhold til deres forskellige egenskaber.
(1) Ved inokulering af flydende prøver skal de blandes grundigt og inokuleres i henhold til mængden.
(2) For faste prøver skal du bruge en steriliseret kniv til at skære 25 g af forskellige dele ud, placere dem i 225 ml steriliseret saltvand eller andre opløsninger, knuse og blande med en homogenisator og inokulere i henhold til mængden.
(3) Flasker og poser med mad bør åbnes ved sterilisering, og ovenstående metoder bør vælges i henhold til egenskaberne før podning.
Prøveinspektion, registrering og rapporteringskrav
1. Efter modtagelse af prøven vil inspektionsrummet først udføre en udseendeinspektion og straks udføre inspektionen i overensstemmelse med nationale standardinspektionsmetoder. Under inspektionsprocessen skal aseptiske operationer udføres omhyggeligt, ansvarligt og strengt for at undgåmikrobielt testresultatforurening i miljøet.
2. De anvendte metoder under prøveinspektionen, de fænomener og resultater, der er opstået mv., skal skrives i skriftlige testprotokoller som grundlag for analyse og bedømmelse af resultaterne. Optegnelserne skal være detaljerede, klare, autentiske, objektive og må ikke ændres eller forfalskes.
,
,
Krav til aseptisk drift:
1.Du skal have arbejdstøj og arbejdshætte på, når du poder bakterier.
2. Ved podning af fødevareprøver skal der bæres særligt arbejdstøj, kasketter og hjemmesko, som skal placeres i det sterile rums bufferrum og anvendes efter UV-desinfektion før arbejdet.
3. Når du inokulerer fødevareprøver, skal du vaske dine hænder med sæbe, før du går ind i det sterile rum, og derefter tørre dine hænder rene med en vatrondel med 75 % alkohol.
4. De sugerør, flade skåle og dyrkningsmedier, der anvendes til podning, skal steriliseres og steriliseres. Ubrugte beholdere bør ikke efterlades ubrugte efter åbning af pakken. Metalredskaber skal autoklaveres eller brændes tre gange med 95 % alkohol før brug.
5. Når sugerøret tages ud af pakken, må spidsen af sugerøret ikke røre de udsatte dele. Når sugerøret bruges til at pode reagensglasset eller pladen, må spidsen af sugerøret ikke røre kanten af reagensglasset eller pladen.
6. Podning af prøver og overførsel af bakterier skal ske foran en spritlampe. Ved podning af bakterier eller prøver skal sugerøret flammesteriliseres, efter at det er taget ud af pakken og åbnet reagensglasproppen.
7. Før inokulering af bakterier skal alle metaltråde i inokulationsløkken og nålen brændes med en flamme, og om nødvendigt skal forbindelsen mellem løkken, nål og stang brændes. Podningssløjfen til inokulering af tuberkulosebakterier og virulente bakterier skal koges i kogende vand i 5 minutter og derefter brændes af flamme.
8. Når du suger bakterievæske eller prøver med et sugerør, skal du bruge den tilsvarende gummispids til at suge den, og ikke suge den direkte med munden.
Krav til brug af sterilt rum:
1. Vinduerne, der fører til ydersiden af sterilrummet, skal være dobbeltglas og forseglet. De bør ikke åbnes efter behag. Der skal være bufferrum og skydedør svarende til sterilrummets størrelse. Der skal også være et lille vindue på 0,5~0,7m2. Som forberedelse til at passere genstande efter indtræden i det sterile rum.
2. Det sterile rum skal holdes rent. Efter arbejdet skal det desinficeres med 2 % til 3 % cresol sæbeopløsning, arbejdsfladen skal tørres af, og genstande, der ikke er relateret til forsøget, bør ikke opbevares.
3. Døren til det sterile rum skal lukkes tæt før og efter brug, og den ultraviolette lampe skal tændes. Hvis en indendørs ophængt ultraviolet lampe bruges til desinfektion, kræves en 30W ultraviolet lampe. Afstanden er 1,0m, og bestrålingstiden er ikke mindre end 30 minutter. Når du bruger ultraviolette lamper, skal du være opmærksom på at arbejde direkte under ultraviolet lys for at undgå beskadigelse. Lampen skal forsigtigt tørres af med en bomuldskugle hver anden uge for at fjerne støv og fedt for at reducere virkningen af ultraviolet indtrængning.
4. Når du behandler og inokulerer fødevareprøver, skal du gå ind i det sterile rum til drift og må ikke komme ind eller ud efter ønske. Hvis genstande skal videregives, kan de føres gennem det lille vindue.
5. Hvis der skal installeres aircondition i det sterile rum, skal der være en filtreringsanordning.
Krav til desinfektion og sterilisering
Glasvarer, metalredskaber og kulturmedier bruges tilmikrobiologisk testning, kontaminerede og inokulerede kulturer osv. skal steriliseres før brug. Tør varme og fugtige varmetryk dampsteriliseringsmetoder.
1. Forberedelse før sterilisering
(1) Alle genstande, der skal steriliseres, skal vaskes og tørres først. Glasvarer som sugerør og flade fade skal være tæt pakket med papir. Hvis der anvendes metalrør, skal ventilationshullerne på dem åbnes.
(2) Pak proppen på den trekantede kolbe, der indeholder dyrkningsmediet, ind i papir, dæk reagensglasset, og træk kernen af sprøjten ud, og pak den ind med gaze.
2. installere
(1) Tørvarmesterilisator: Genstandene må ikke være overfyldte og må ikke røre boksens fire vægge.
(2) Stor højtryksdampkoger: Placer steriliserede genstande, pak dem ind separat, og læg dem direkte i steriliseringscylinderen. Overfyld ikke varerne.
3. Udstyrsinspektion
(1) Tjek om dørkontakten er fleksibel, om gummiringen er beskadiget og om den er flad.
(2) Kontroller, om trykmåleren forbliver i nul-stillingen, når dampen er udtømt, luk lågen og dækslet, udluft damp eller varme, og observer, om der er luftlækage, om forholdene markeret af trykmåleren og termometeret stemmer overens, og om rørledningen er blokeret.
(3) For sterilisatorer med automatiske elektroniske programstyringsanordninger bør det specificerede program kontrolleres før brug for at se, om det opfylder kravene til sterilisering.
4. Steriliseringsbehandling
(1) Tør varmesteriliseringsmetode:
Denne metode er velegnet til genstande, der ikke beskadiger, forringes eller fordamper under tørre varmeforhold. Det er mere almindeligt brugt til sterilisering af glasvarer, metalprodukter, keramiske produkter osv.
①Instrumenter og redskaber skal vaskes før tørbagning for at forhindre, at snavs på overfladen bliver forkullet.
② Under steriliseringen må genstandene ikke være overfyldte, de må ikke komme i direkte kontakt med bunden og væggen af æsken, og efterlade mellemrum mellem emnerne.
③ Under sterilisering, luk døren tæt, tilslut strømforsyningen, åbn udstødningshullet i ca. 30 minutter for at fjerne den kolde luft i sterilisatoren, juster indikatorlyset, når temperaturen stiger til 160°C, og hold det i 1,5 til 2 timer.
④Efter steriliseringen er afsluttet eller under temperaturstigningsprocessen, skal døren åbnes under 60°C.
(2) Følgende trin skal følges, når du bruger en bærbar trykkoger eller vertikal trykdampsterilisator:
① Tilsæt 3L vand til hoveddelen af den bærbare trykkoger og 16L vand til den lodrette trykkoger (vandmængden skal efterfyldes, når den genbruges, og vandet skal udskiftes, hvis det bliver uklart);
② For en bærbar trykkoger skal udstødningsrøret på topdækslet indsættes i det firkantede rør på indervæggen af sterilisationsbeholderen (sterilisatorer uden slanger eller dem med korroderede og revnede slanger må ikke anvendes);
③ Dæk topdækslet til, og spænd det godt til for at forhindre luftlækage; anbring sterilisatoren på ildkilden for at varme, tænd for strømmen til den lodrette trykkoger, og åbn udstødningsventilen på topdækslet for at slippe luften ud (udblæsningsluft i 10 til 15 minutter efter vandet koger) );
④Luk udstødningsventilen for at hæve damptrykket til de specificerede krav og bibehold det i den specificerede tid (afhængigt af arten af de steriliserede genstande og relevante omstændigheder);
⑤ Når den angivne tid er nået, for emner, der skal tørres, skal du straks åbne udstødningsventilen for at udlede dampen. Når trykket vender tilbage til nul, afkøles det naturligt til 60°C og åbner derefter låget for at tage emnerne ud. Hvis det er en flydende genstand, må du ikke åbne udstødningsventilen. Gryden skal fjernes fra varmekilden med det samme og have lov til at afkøle naturligt, indtil trykket vender tilbage til nul, og temperaturen falder til under 60°C, før låget åbnes for at tage indholdet ud for at forhindre pludselig dekompression af væsken fra voldsom kogning eller eksplosion af beholderen.
(3) Følg følgende trin for at bruge den vandrette trykkoger dampsterilisator:
①Luk grydeløren tæt, åbn luftindtagsventilen, tilfør damp i mezzaninen til forvarmning, og den kolde luft i mezzaninen vil automatisk blive udledt gennem luftbarrieren;
②Efter at mellemlaget har nået den forudbestemte temperatur, skal du åbne grydekammerets luftindtagsventil, indføre dampen i grydekammeret, og den kolde luft i grydekammeret vil automatisk blive udledt gennem grydekammerets luftafleder;
③Når trykket og temperaturen i grydekammeret når det specificerede tryk, skal du justere luftindtagsventilen for at holde den konstant;
④ Afkøl temperaturen naturligt eller kunstigt til 60 ℃, før du åbner døren for at tage genstandene ud. Brug ikke den hurtige dampudledningsmetode for at forhindre pludseligt trykfald, voldsom kogning af væsken eller eksplosion af beholderen;
⑤ Når du bruger en automatisk program-kontrolleret trykdampsterilisator, efter at have anbragt emnerne og lukket døren tæt, skal den tilsvarende kontakt trykkes i overensstemmelse med kategorien af emnerne, så steriliseringen kan udføres automatisk i overensstemmelse med de nødvendige procedurer. Under steriliseringen skal det påsatte instrument bruges til at registrere temperatur og tid. Til fremtidig reference bør driftskravene være strengt i overensstemmelse med producentens instruktioner;
5. Steriliseringstemperatur og -tid
(1) Steriliseringstemperaturen for tørvarmesterilisator er 160 ℃, 1,5 ~ 2 timer.
(2) Steriliseringstemperatur og tid for trykdampsterilisator
Intermitterende steriliseringsmetode
1. Steriliseringsmetode:
Brug dampsterilisering uden tryk. Nogle stoffer ødelægges let ved højtryksdampsterilisering, så denne metode kan bruges til sterilisering.
(1) Anbring genstandene, der skal steriliseres, i gryden, dæk låget til, åbn afløbsåbningen, og dræn det resterende vand i gryden væk.
(2) Luk afløbsudløbet, åbn luftindtagslågen, og desinficer i 10 til 20 minutter efter behov.
(3) Når steriliseringen er afsluttet, lukkes luftindtagsdøren, tages emnerne ud og vente til afkøling til stuetemperatur, anbringes i en 37°C inkubator natten over og fortsætte med at sterilisere i henhold til ovenstående metode næste dag. Gør dette tre gange for at opnå formålet med sterilisering.
2. Sådan bruges serumkoagulatoren:
Når dyrkningsmediet indeholder specielle ingredienser såsom serum eller æg, vil høj varme ødelægge dets næringsstoffer. Derfor kan lav temperatur bruges til at koagulere serumet og opnå steriliseringsformål:
(1) Ved anvendelse af serum steriliseret ved denne metode til alikvotering, skal aseptiske operationer følges nøje, og reagensglas og plader skal også steriliseres før brug;
(2) Gør dyrkningsmediet til et skrånende eller højt lag efter behov. Efter tilsætning af nok vand skal du tilslutte strømforsyningen, hæve temperaturen til 75~90°C i en time og derefter sterilisere den. Placer det i en 37°C inkubator natten over, og steriliser det derefter tre gange.
3. Kog og desinficer:
Du kan bruge en kogende gryde eller kogende sterilisator. Når vandet koger, koges det i 5 til 15 minutter. Du kan også tilføje 2% carbolsyre til vandet og koge det i 5 minutter. Tilsæt 0,02% formaldehyd og kog det ved 80°C i 60 minutter for at opnå formålet med sterilisering. Kogende sterilisering kan dog opnås. Når du bruger forstærkere, skal du være opmærksom på genstandenes ætsningsevne.
4. Steriliseringsbehandling:
Efter sterilisering er genstande allerede sterile under normale omstændigheder. De skal omhyggeligt inspiceres og placeres, når de tages ud af sterilisatoren for at undgå genkontaminering;
(1) Tag genstandene ud og kontroller emballagens integritet med det samme. Hvis der er skader eller tamponen fjernes, kan den ikke bruges som sterile genstande;
(2) De udtagne genstande kan ikke bruges som sterile genstande, hvis deres emballage åbenlyst er gennemblødt i vand;
(3) Dyrkningsmediet eller reagenserne bør kontrolleres for at se, om de opfylder farven eller tilstanden efter sterilisering. Dem, der ikke opfylder kravene, skal kasseres;
(4) For åbne-lukke beholdere skal skærmhullerne lukkes, når de tages ud;
(5) Hvis de fjernede genstande falder til jorden, er forlagt et urent sted eller er plettet med vand, anses de for at være forurenede og kan ikke bruges som sterile genstande;
(6) De kvalificerede steriliserede genstande, der tages ud, skal opbevares i opbevaringsrummet eller i det støvtætte skab, og det er strengt forbudt at blande dem med usteriliserede genstande;
(7) Alle kvalificerede genstande skal mærkes med steriliseringsdatoen og udløbsdatoen;
(8) Efter hver batch af steriliseringsbehandling er afsluttet, noter navn, mængde, temperatur, tid og operatør af de steriliserede produkter.
Krav til behandling af giftigt og bakterielt affald
Eksperimentelt udstyr og kulturer anvendt i mikrobiologiske forsøg må ikke tages ud af laboratoriet uden desinfektion.
1. Kulturerede forurenede materialer og affald skal placeres i tætte beholdere eller trådkurve og opbevares centralt på udpegede steder, indtil de er ensartet autoklaveret.
2. Kulturer kontamineret med mikroorganismer skal autoklaveres ved 121°C i 30 minutter.
3. Efter brug skal de forurenede sugerør lægges i 5 % creol-sæbeopløsning eller carbolsyreopløsning, udblødes i mindst 24 timer (desinfektionsvæsken må ikke være lavere end iblødsætningshøjden), og derefter steriliseres ved højtryk ved 121°C i 30 minutter.
4. Væsken til farvning og skylning af udtværinger kan generelt skylles direkte i kloakken. Skyllevæsken til virulente bakterier skal skylles i et bægerglas og steriliseres ved højtryk, inden den hældes i kloakken. De farvede objektglas puttes i 5% cresol sæbeopløsning. Efter iblødsætning i vand i 24 timer, kog og vask. Objektglassene eller skålene, der anvendes til agglutinationstestning, skal autoklaveres og derefter vaskes.
5. Efter at kulturen er brudt, sprøjtes og blødgøres de kontaminerede dele straks med 5 % cresol-sæbeopløsning eller carbolsyreopløsning, lægges i blød i en halv time og derefter tørres af.
Forurenet arbejdstøj eller arbejdstøj, kasketter, masker osv., som bæres til voldsomme tests, skal anbringes i særlige desinfektionsposer og steriliseres ved højtryk, inden det vaskes.
Medium forberedelseskrav
Kvaliteten af dyrkningsmediet vil direkte påvirke væksten af mikroorganismer, fordi forskellige mikroorganismer har forskellige ernæringsmæssige krav og forskellige dyrkningsformål. Forberedelseskravene til forskellige kulturmedier er som følger:
1. Vej ingredienserne efter middelformlen, og opløs dem derefter i destilleret vand. Kvaliteten af de anvendte reagenser og lægemidler bør inspiceres før brug.
2. pH-måling og justering: pH-måling bør udføres, når dyrkningsmediet er afkølet til stuetemperatur, fordi der er en vis forskel i pH under varme eller kolde forhold. Når målingen er afsluttet, tilsæt alkali eller syre i henhold til den beregnede mængde og bland godt. Skal testes igen. Dyrkningsmediets pH-værdi skal være nøjagtig, ellers vil det påvirke væksten af mikroorganismer eller påvirke observationen af resultater. Det skal dog bemærkes, at højtrykssterilisering kan påvirke faldet eller stigningen af pH i nogle dyrkningsmedier, så det er ikke tilrådeligt at sterilisere ved for højt tryk eller for mange gange for at undgå at påvirke dyrkningsmediets kvalitet. Indikatorer, natrium deoxycholat, agar, etc. er generelt Tilføj det efter justering af pH.
3. Dyrkningsmediet skal holdes klart for at lette observation af bakterievækst. Efter at dyrkningsmediet er opvarmet og kogt, kan det filtreres med absorberende bomuld eller flannel for at fjerne sediment. Om nødvendigt kan den klares med æggehvide. De anvendte agarstrimler skal vaskes og tørres på forhånd. Før brug skal du undgå at påvirke gennemsigtigheden på grund af urenheder i agaren.
4. Jern, kobber og andre beholdere bør ikke bruges til at holde dyrkningsmediet. Det er bedre at bruge rene neutrale hårde glasbeholdere.
5. Steriliseringen af dyrkningsmediet skal ikke kun opnå formålet med fuldstændig sterilisering, men også være opmærksom på ikke at reducere dets næringsværdi på grund af opvarmning. Generelt er 121°C i 15 minutter tilstrækkeligt. Til dyrkningsmedier, der indeholder stoffer, der er intolerante over for høj varme, såsom sukker og serum, bør gelatine osv. steriliseres ved lav temperatur eller intermitterende metode. Nogle reagenser, der ikke kan opvarmes, såsom kaliumtellurit, æggeblomme, TTC, antibiotika osv., bør afkøles til ca. 50°C, efter at basisagaren er autoklaveret og derefter tilsat;
6. Efter hver batch af dyrkningsmedier er klargjort, skal der udføres en steril væksttest og en væksttest af de testede stammer. Hvis det er et biokemisk dyrkningsmedium, skal du bruge standard bakteriestammer til podning og dyrkning og observere de biokemiske reaktionsresultater. Det skal vise en normal reaktion. Dyrkningsmediet bør ikke opbevares for længe. Om nødvendigt kan den opbevares i et 4°C køleskab.
7. På nuværende tidspunkt findes der mange slags tørdyrkningsmedier. Hver batch skal bruge standardstammer til væksttest eller biokemisk reaktionsobservation. Forskellige dyrkningsmedier kan kun anvendes, efter at væksttesten af de tilsvarende stammer er god. Nyindkøbte eller tørrede, der har været opbevaret i lang tid, kan bruges. Dyrkningsmediets pH bør også måles, når det tilberedes, og doseringen og metoden skal følges i henhold til produktvejledningen.
8. De kemiske reagenser, steriliseringsbetingelser, stammevæksttestresultater og produktionspersonale, der anvendes i hver batch af forberedte dyrkningsmedier, skal registreres til forespørgsel.
Krav til prøveindsamling og behandling
1. De indsamlede kontrolprøver skal være repræsentative. Ved prøveudtagning bør råmaterialer, forarbejdning, transport, opbevaringsmetoder og betingelser for fødevarepartiet, de omgivende miljømæssige sundhedsforhold osv. undersøges i detaljer for at kontrollere, om der er kilder til forurening.
2. Afhængigt af typen og mængden af fødevarer skal prøveudtagningsmængden og -metoden udføres i overensstemmelse med kravene til standardinspektionsmetoder.
3. Vær opmærksom på aseptisk drift ved prøvetagning, og beholderen skal steriliseres for at undgå mikrobiel kontaminering i miljøet. Beholderen må ikke steriliseres med creosal sæbeopløsning, sterilisering med chlormethionin, alkohol og andre desinfektionsmidler, og den må ikke indeholde sådanne desinfektionsmidler eller antibiotika. For at undgå at dræbe mikroorganismer i prøven, skal de anvendte sakse, knive og skeer også steriliseres før brug.
4. Prøver skal sendes til inspektionslokalet til inspektion umiddelbart efter afhentning. Inspektionsprocessen overstiger generelt ikke 3 timer. Hvis afstanden er lang, kan den opbevares i et miljø på 1 ~ 5 ℃. Skal den fryses, skal den opbevares i frossen tilstand. Indsendes til eftersyn.
5. Efter modtagelse af prøven vil inspektionsrummet registrere den (prøvenavn, inspektionsenhed, mængde, dato, antal osv.) og observere prøvens udseende. Hvis en af følgende forhold konstateres, kan inspektionen afvises:
(1) Prøver, der er blevet steriliseret ved særlige højtryks-, koge- eller andre metoder, vil miste deres betydning for at repræsentere den originale fødevare;
(2) Flasker og poser med mad er blevet åbnet, kogt kød og dets produkter, kogt fjerkræ og andre fødevarer er blevet ødelagt og ufuldstændige, dvs. den oprindelige madform er gået tabt (undtagen madforgiftningsprøver);
(3) Prøveudtagningsmængden er utilstrækkelig som krævet;
For prøver indsendt til inspektion, der opfylder kravene, bør inspektionsrummet straks foretage inspektion efter modtagelse af dem. Hvis betingelserne ikke er opfyldt, skal de opbevares i et 4°C køleskab, forberedes til at skabe betingelser i tide og derefter foretage inspektion.
6. Når du inspicerer prøver, skal du udføre passende behandling i henhold til deres forskellige egenskaber.
(1) Ved inokulering af flydende prøver skal de blandes grundigt og inokuleres i henhold til mængden.
(2) For faste prøver skal du bruge en steriliseret kniv til at skære 25 g af forskellige dele ud, placere dem i 225 ml steriliseret saltvand eller andre opløsninger, knuse og blande med en homogenisator og inokulere i henhold til mængden.
(3) Flasker og poser med mad bør åbnes ved sterilisering, og ovenstående metoder bør vælges i henhold til egenskaberne før podning.
Prøveinspektion, registrering og rapporteringskrav
1. Efter modtagelse af prøven vil inspektionsrummet først udføre en udseendeinspektion og straks udføre inspektionen i overensstemmelse med nationale standardinspektionsmetoder. Under inspektionsprocessen skal aseptiske operationer udføres omhyggeligt, ansvarligt og strengt for at undgåmikrobielt testresultatforurening i miljøet.
2. De anvendte metoder under prøveinspektionen, de fænomener og resultater, der er opstået mv., skal skrives i skriftlige testprotokoller som grundlag for analyse og bedømmelse af resultaterne. Optegnelserne skal være detaljerede, klare, autentiske, objektive og må ikke ændres eller forfalskes.
,
,
