مائکروبیولوجیکل ٹیسٹنگ کی ضروریات کا خلاصہ
2024-01-24 15:14:33
کے لیے ضروریات اور اقداماتمائکروبیولوجیکل ٹیسٹنگمندرجہ ذیل ہیں:
ایسپٹک آپریشن کی ضروریات:
1. بیکٹیریا کو ٹیکہ لگاتے وقت آپ کو کام کے کپڑے اور کام کی ٹوپی پہننا چاہیے۔
2. کھانے کے نمونوں کو ٹیکہ لگاتے وقت، خاص کام کے کپڑے، ٹوپیاں اور چپل ضرور پہننا چاہیے، جنہیں جراثیم سے پاک کمرے کے بفر روم میں رکھا جانا چاہیے اور کام سے پہلے UV جراثیم کشی کے بعد استعمال کیا جانا چاہیے۔
3. کھانے کے نمونوں کو ٹیکہ لگاتے وقت، جراثیم سے پاک کمرے میں داخل ہونے سے پہلے اپنے ہاتھ صابن سے دھوئیں، اور پھر اپنے ہاتھوں کو 75% الکحل والی روئی کی گیند سے صاف کریں۔
4. ٹیکہ لگانے کے لیے استعمال ہونے والے تنکے، فلیٹ ڈشز اور کلچر میڈیا کو جراثیم سے پاک اور جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔ پیکیج کھولنے کے بعد غیر استعمال شدہ کنٹینرز کو غیر استعمال شدہ نہیں چھوڑنا چاہئے۔ دھاتی برتنوں کو استعمال کرنے سے پہلے 95% الکوحل کے ساتھ تین بار آٹوکلیو یا جلا دینا چاہیے۔
5. تنکے کو پیکج سے نکالتے وقت، تنکے کی نوک کو بے نقاب حصوں کو نہیں چھونا چاہیے۔ ٹیسٹ ٹیوب یا پلیٹ کو ٹیکہ لگانے کے لیے تنکے کا استعمال کرتے وقت، بھوسے کی نوک کو ٹیسٹ ٹیوب یا پلیٹ کے کنارے کو نہیں چھونا چاہیے۔
6. نمونوں کو ٹیکہ لگانا اور بیکٹیریا کی منتقلی الکحل کے لیمپ کے سامنے ہونی چاہیے۔ بیکٹیریا یا نمونوں کو ٹیکہ لگاتے وقت، تنکے کو پیکیج سے باہر نکالنے اور ٹیسٹ ٹیوب سٹاپر کھولنے کے بعد شعلے سے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔
7. بیکٹیریا کو ٹیکہ لگانے سے پہلے، ٹیکہ کے لوپ اور سوئی کے تمام دھاتی تاروں کو شعلے سے جلا دینا چاہیے، اور اگر ضروری ہو تو، لوپ، سوئی اور چھڑی کے درمیان تعلق کو جلا دینا چاہیے۔ تپ دق کے بیکٹیریا اور وائرل بیکٹیریا کو ٹیکہ لگانے کے لیے ٹیکہ لگانے والے لوپ کو ابلتے ہوئے پانی میں 5 منٹ کے لیے ابالنا چاہیے، اور پھر شعلے سے جلا دینا چاہیے۔
8. بیکٹیریل مائع یا نمونے کو تنکے کے ساتھ چوستے وقت، اسے چوسنے کے لیے ربڑ کی متعلقہ نوک کا استعمال کریں، اور اسے براہ راست منہ سے نہ چوسیں۔
جراثیم سے پاک کمرے کے استعمال کی ضروریات:
1. جراثیم سے پاک کمرے کے باہر کی طرف جانے والی کھڑکیوں کو ڈبل - چمکدار اور سیل کیا جانا چاہئے۔ انہیں اپنی مرضی سے نہیں کھولنا چاہیے۔ جراثیم سے پاک کمرے کے سائز کے مطابق ایک بفر روم اور سلائیڈنگ ڈور ہونا چاہیے۔ 0.5~0.7m2 کی ایک چھوٹی کھڑکی بھی ہونی چاہیے۔ جراثیم سے پاک کمرے میں داخل ہونے کے بعد اشیاء کو منتقل کرنے کی تیاری میں۔
2. جراثیم سے پاک کمرے کو صاف رکھا جانا چاہیے۔ کام کے بعد، اسے 2% سے 3% کریسول صابن کے محلول سے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے، کام کی سطح کو صاف کیا جانا چاہیے، اور تجربات سے غیر متعلق اشیاء کو ذخیرہ نہیں کیا جانا چاہیے۔
3. جراثیم سے پاک کمرے کے دروازے کو استعمال سے پہلے اور بعد میں مضبوطی سے بند کر دینا چاہیے، اور الٹرا وایلیٹ لیمپ کو آن کرنا چاہیے۔ اگر اندرونی معلق الٹرا وائلٹ لیمپ کو جراثیم کشی کے لیے استعمال کیا جاتا ہے، تو 30W کے الٹراوائلٹ لیمپ کی ضرورت ہوتی ہے۔ فاصلہ 1.0m ہے، اور شعاع ریزی کا وقت 30 منٹ سے کم نہیں ہے۔ الٹرا وایلیٹ لیمپ استعمال کرتے وقت، نقصان سے بچنے کے لیے براہ راست الٹرا وایلیٹ لائٹ کے نیچے کام کرنے پر توجہ دی جانی چاہیے۔ الٹرا وائلٹ دخول کے اثر کو کم کرنے کے لیے دھول اور چکنائی کو دور کرنے کے لیے چراغ کو ہر دو ہفتے بعد الکحل کاٹن کی گیند سے آہستہ سے صاف کرنے کی ضرورت ہے۔
4. خوراک کے نمونوں کی پروسیسنگ اور ٹیکہ لگاتے وقت، آپریشن کے لیے جراثیم سے پاک کمرے میں داخل ہوں اور اپنی مرضی سے داخل ہونے یا باہر نکلنے کی اجازت نہیں ہے۔ اگر اشیاء کو منتقل کرنے کی ضرورت ہے، تو وہ چھوٹی کھڑکی سے گزر سکتے ہیں.
5. اگر جراثیم سے پاک کمرے میں ایئر کنڈیشنگ لگانے کی ضرورت ہو تو وہاں فلٹرنگ ڈیوائس ہونی چاہیے۔
جراثیم کشی اور نس بندی کے تقاضے
شیشے کے برتن، دھاتی برتن اور ثقافتی میڈیا کے لیے استعمال کیا جاتا ہے۔مائکروبیولوجیکل ٹیسٹنگ، آلودہ اور ٹیکے لگائے گئے کلچر وغیرہ کو استعمال سے پہلے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔ خشک گرمی اور نم گرمی دباؤ بھاپ نسبندی کے طریقے۔
1. نس بندی سے پہلے تیاری
(1) وہ تمام اشیاء جن کو جراثیم سے پاک کرنے کی ضرورت ہے پہلے دھو کر خشک کر لیں۔ شیشے کے برتن جیسے سٹرا اور فلیٹ ڈشز کو کاغذ سے مضبوطی سے پیک کیا جانا چاہیے۔ اگر دھاتی ٹیوبیں استعمال کی جاتی ہیں، تو ان پر وینٹیلیشن کے سوراخوں کو کھولنا چاہیے۔
(2) سہ رخی فلاسک کے سٹاپر کو کاغذ میں لپیٹیں جس میں کلچر میڈیم ہے، ٹیسٹ ٹیوب کو ڈھانپیں، اور سرنج کا کور باہر نکالیں، اور اسے گوج سے لپیٹ دیں۔
2. انسٹال کریں۔
(1) خشک گرمی جراثیم کش: اشیاء کو زیادہ ہجوم نہیں ہونا چاہئے اور باکس کی چار دیواری کو چھو نہیں سکتے۔
(2) بڑا ہائی-پریشر سٹیم ککر: جراثیم سے پاک اشیاء رکھیں، انہیں الگ سے لپیٹیں، اور انہیں براہ راست نس بندی کے سلنڈر میں ڈالیں۔ اشیاء کی بھرمار نہ کریں۔
3. سامان کا معائنہ
(1) چیک کریں کہ آیا دروازے کا سوئچ لچکدار ہے، آیا ربڑ کی انگوٹھی کو نقصان پہنچا ہے اور آیا یہ فلیٹ ہے۔
(2) چیک کریں کہ آیا پریشر گیج صفر کی پوزیشن پر رہتا ہے جب بھاپ ختم ہو جاتی ہے، دروازہ بند کریں اور ڈھانپیں، بھاپ یا گرمی کو ہوا دار کریں، اور مشاہدہ کریں کہ آیا ہوا کا رساو ہے، آیا پریشر گیج اور تھرمامیٹر سے نشان زد حالات آپس میں مماثل ہیں، اور آیا پائپ لائن بلاک ہے۔
(3) خودکار الیکٹرانک پروگرام کنٹرول آلات کے ساتھ جراثیم کشوں کے لیے، مخصوص پروگرام کو استعمال کرنے سے پہلے چیک کیا جانا چاہیے کہ آیا یہ نس بندی کی ضروریات کو پورا کرتا ہے۔
4. نس بندی کا علاج
(1) خشک گرمی نسبندی کا طریقہ:
یہ طریقہ ان اشیاء کے لیے موزوں ہے جو خشک گرمی کے حالات میں نقصان نہیں پہنچاتے، خراب نہیں ہوتے یا بخارات نہیں بنتے۔ یہ عام طور پر شیشے کے برتن، دھاتی مصنوعات، سیرامک مصنوعات وغیرہ کو جراثیم سے پاک کرنے کے لیے استعمال ہوتا ہے۔
①آلات اور برتن خشک ہونے سے پہلے دھوئے جائیں
② نس بندی کے دوران، اشیاء کو زیادہ بھیڑ نہیں ہونا چاہئے، باکس کے نیچے اور دیوار سے براہ راست رابطہ نہ کریں، اور اشیاء کے درمیان خلا چھوڑ دیں۔
③ نس بندی کے دوران، دروازے کو مضبوطی سے بند کریں، پاور سپلائی کو جوڑیں، سٹرلائزر میں ٹھنڈی ہوا کو دور کرنے کے لیے تقریباً 30 منٹ کے لیے ایگزاسٹ ہول کھولیں، جب درجہ حرارت 160 ° C تک بڑھ جائے تو اشارے کی روشنی کو ایڈجسٹ کریں، اور اسے 1.5 سے 2 گھنٹے تک برقرار رکھیں۔
④ نس بندی مکمل ہونے کے بعد یا درجہ حرارت میں اضافے کے عمل کے دوران، دروازہ 60°C سے نیچے کھولنا چاہیے۔
(2) پورٹیبل پریشر ککر یا عمودی پریشر اسٹیم جراثیم کش استعمال کرتے وقت درج ذیل اقدامات پر عمل کیا جانا چاہئے:
① پورٹیبل پریشر ککر کے مین باڈی میں 3L پانی اور عمودی پریشر ککر میں 16L پانی شامل کریں (دوبارہ استعمال کرنے پر پانی کی مقدار کو دوبارہ بھرنا چاہیے، اور اگر پانی گدلا ہو جائے تو اسے تبدیل کرنے کی ضرورت ہے)؛
② پورٹیبل پریشر ککر کے لیے، سٹرلائزیشن بیرل کی اندرونی دیوار پر اسکوائر ٹیوب میں اوپری کور پر ایگزاسٹ پائپ ڈالیں (نابلیوں کے بغیر جراثیم کش یا کھردری اور پھٹے ہوئے ہوزز کا استعمال نہیں کرنا چاہیے)؛
③ اوپری کور کو ڈھانپیں اور ہوا کے رساو کو روکنے کے لیے اسے مضبوطی سے سخت کریں۔ سٹرلائزر کو آگ کے منبع پر گرم کرنے کے لیے رکھیں، عمودی پریشر ککر کی طاقت کو آن کریں، اور ہوا کو باہر جانے کے لیے اوپر والے کور پر ایگزاسٹ والو کھولیں (پانی کے ابلنے کے بعد 10 سے 15 منٹ تک ہوا خارج کر دیں))؛
④ بھاپ کے دباؤ کو مخصوص ضروریات تک بڑھانے اور اسے مخصوص وقت تک برقرار رکھنے کے لیے ایگزاسٹ والو کو بند کریں (جراثیم سے پاک اشیاء کی نوعیت اور متعلقہ حالات پر منحصر ہے)؛
⑤ مخصوص وقت تک پہنچنے کے بعد، ان اشیاء کے لیے جنہیں خشک کرنے کی ضرورت ہے، فوری طور پر ایگزاسٹ والو کو کھولیں تاکہ بھاپ خارج ہو۔ جب دباؤ صفر پر واپس آجائے تو اسے قدرتی طور پر 60 ° C پر ٹھنڈا کریں اور پھر اشیاء کو نکالنے کے لیے ڈھکن کھولیں۔ اگر یہ مائع چیز ہے تو ایگزاسٹ والو کو نہ کھولیں۔ برتن کو گرمی کے منبع سے فوری طور پر ہٹا دیا جانا چاہیے اور اسے قدرتی طور پر ٹھنڈا ہونے دیا جانا چاہیے جب تک کہ دباؤ صفر پر واپس نہ آجائے اور ڑککن کھولنے سے پہلے درجہ حرارت 60 ° C سے کم نہ ہو جائے تاکہ مواد کو باہر نکالا جا سکے تاکہ مائع کے پرتشدد ابلنے یا پھٹنے سے روکا جا سکے۔
(3) افقی پریشر ککر بھاپ جراثیم کش استعمال کرنے کے لیے درج ذیل اقدامات پر عمل کریں:
① برتن کے دروازے کو مضبوطی سے بند کریں، ایئر انلیٹ والو کو کھولیں، پہلے سے گرم کرنے کے لیے میزانائن میں بھاپ داخل کریں، اور میزانائن میں ٹھنڈی ہوا خود بخود ایئر بیریئر سے خارج ہو جائے گی۔
②انٹرلیئر کے پہلے سے طے شدہ درجہ حرارت پر پہنچنے کے بعد، برتن کے چیمبر کے ایئر انلیٹ والو کو کھولیں، برتن کے چیمبر میں بھاپ کو داخل کریں، اور برتن کے چیمبر میں ٹھنڈی ہوا خود بخود برتن کے چیمبر ایئر آریسٹر کے ذریعے خارج ہو جائے گی۔
③جب برتن کے چیمبر میں دباؤ اور درجہ حرارت مخصوص دباؤ تک پہنچ جائے تو اسے مستقل رکھنے کے لیے ایئر انلیٹ والو کو ایڈجسٹ کریں۔
④ اشیاء کو باہر لے جانے کے لیے دروازہ کھولنے سے پہلے درجہ حرارت کو قدرتی یا مصنوعی طور پر 60 ℃ تک ٹھنڈا کریں۔ اچانک دباؤ میں کمی، مائع کے پرتشدد ابلنے یا کنٹینر کے دھماکے کو روکنے کے لیے تیز رفتار بھاپ خارج کرنے کا طریقہ استعمال نہ کریں۔
⑤ ایک خودکار پروگرام-کنٹرولڈ پریشر اسٹیم سٹرلائزر استعمال کرتے وقت، اشیاء کو رکھنے اور دروازے کو مضبوطی سے بند کرنے کے بعد، متعلقہ سوئچ کو اشیاء کے زمرے کے مطابق دبانا چاہیے تاکہ جراثیم سے پاک خود بخود مطلوبہ طریقہ کار کے مطابق کیا جاسکے۔ نس بندی کے دوران، منسلک آلے کو درجہ حرارت اور وقت کو ریکارڈ کرنے کے لیے استعمال کیا جانا چاہیے۔ مستقبل کے حوالہ کے لئے، آپریٹنگ ضروریات کو کارخانہ دار کی ہدایات کے مطابق سختی سے ہونا چاہئے؛
5. نس بندی کا درجہ حرارت اور وقت
(1) خشک گرمی کی جراثیم کشی کا درجہ حرارت 160℃، 1.5~2h ہے۔
(2) نسبندی کا درجہ حرارت اور دباؤ بھاپ سٹرلائزر کا وقت
وقفے وقفے سے نس بندی کا طریقہ
1. نس بندی کا طریقہ:
دباؤ کے بغیر بھاپ کی نس بندی کا استعمال کریں۔ کچھ مادے ہائی-پریشر بھاپ کی جراثیم سے آسانی سے تباہ ہو جاتے ہیں، اس لیے یہ طریقہ نس بندی کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے۔
(1) جراثیم سے پاک ہونے والی اشیاء کو برتن میں رکھیں، اوپر کا احاطہ ڈھانپیں، ڈرین آؤٹ لیٹ کھولیں، اور برتن میں باقی پانی نکال دیں۔
(2) ڈرین آؤٹ لیٹ کو بند کریں، ایئر انلیٹ کا دروازہ کھولیں، اور ضرورت کے مطابق 10 سے 20 منٹ تک جراثیم کش کریں۔
(3) جراثیم کشی مکمل ہونے کے بعد، ہوا کے اندر جانے والے دروازے کو بند کریں، اشیاء کو باہر نکالیں اور کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا ہونے کا انتظار کریں، انہیں رات بھر 37 ° C انکیوبیٹر میں رکھیں، اور اگلے دن مذکورہ طریقہ کے مطابق جراثیم کشی جاری رکھیں۔ نس بندی کا مقصد حاصل کرنے کے لیے یہ تین بار کریں۔
2. سیرم کوگولیٹر کا استعمال کیسے کریں:
جب کلچر میڈیم میں سیرم یا انڈے جیسے خاص اجزاء ہوتے ہیں، تو زیادہ گرمی اس کے غذائی اجزاء کو تباہ کر دیتی ہے۔ لہذا، کم درجہ حرارت سیرم کو جمانے اور نس بندی کے مقاصد کو حاصل کرنے کے لیے استعمال کیا جا سکتا ہے:
(1) اس طریقہ سے جراثیم سے پاک سیرم کو ایلی کوٹ کے لیے استعمال کرتے وقت، ایسپٹک آپریشنز کی سختی سے پیروی کی جانی چاہیے، اور ٹیسٹ ٹیوبوں اور پلیٹوں کو بھی استعمال سے پہلے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔
(2) ضرورت کے مطابق ڈھلوان یا اونچی تہہ میں کلچر میڈیم بنائیں۔ کافی پانی ڈالنے کے بعد، پاور سپلائی کو جوڑیں، درجہ حرارت کو ایک گھنٹے کے لیے 75~90°C تک بڑھائیں اور پھر اسے جراثیم سے پاک کریں۔ اسے رات بھر 37 ° C انکیوبیٹر میں رکھیں، اور پھر اسے تین بار جراثیم سے پاک کریں۔
3. ابالیں اور جراثیم کشی کریں:
آپ ابلتے ہوئے برتن یا ابلتے ہوئے جراثیم کش استعمال کر سکتے ہیں۔ پانی ابلنے کے بعد اسے 5 سے 15 منٹ تک ابالیں۔ آپ پانی میں 2% کاربولک ایسڈ بھی ڈال سکتے ہیں اور اسے 5 منٹ تک ابال سکتے ہیں۔ 0.02% formaldehyde شامل کریں اور جراثیم کشی کا مقصد حاصل کرنے کے لیے اسے 80°C پر 60 منٹ تک ابالیں۔ تاہم، ابلتے ہوئے نس بندی حاصل کی جا سکتی ہے۔ بڑھانے والے استعمال کرتے وقت، اشیاء کے سنکنرن پر توجہ دی جانی چاہیے۔
4. نس بندی کا علاج:
نس بندی کے بعد، اشیاء پہلے ہی عام حالات میں جراثیم سے پاک ہوتی ہیں۔ ان کا بغور معائنہ کیا جانا چاہیے اور دوبارہ آلودگی سے بچنے کے لیے جراثیم کش سے باہر نکالنے پر رکھا جانا چاہیے۔
(1) اشیاء کو باہر نکالیں اور فوری طور پر پیکیجنگ کی سالمیت کو چیک کریں۔ اگر کوئی نقصان ہو یا ٹیمپون ہٹا دیا جائے تو اسے جراثیم سے پاک اشیاء کے طور پر استعمال نہیں کیا جا سکتا۔
(2) نکالی گئی اشیاء کو جراثیم سے پاک اشیاء کے طور پر استعمال نہیں کیا جا سکتا اگر ان کی پیکیجنگ واضح طور پر پانی میں بھیگی ہوئی ہو۔
(3) کلچر میڈیم یا ری ایجنٹس کو یہ دیکھنے کے لیے چیک کیا جانا چاہیے کہ آیا وہ نس بندی کے بعد رنگ یا حالت پر پورا اترتے ہیں۔ جو لوگ ضروریات کو پورا نہیں کرتے انہیں ضائع کر دیا جانا چاہئے؛
(4) کھلے-بند کنٹینرز کے لیے، اسکرین کے سوراخوں کو باہر نکالتے وقت بند ہونا چاہیے۔
(5) اگر ہٹائی گئی چیزیں زمین پر گرتی ہیں، کسی ناپاک جگہ پر غلط جگہ پر لگ جاتی ہیں، یا پانی سے داغدار ہوتی ہیں، تو انہیں آلودہ سمجھا جاتا ہے اور اسے جراثیم سے پاک اشیاء کے طور پر استعمال نہیں کیا جا سکتا۔
(6) کوالیفائیڈ جراثیم سے پاک اشیاء کو باہر لے جانے والے سٹوریج روم یا ڈسٹ پروف کیبنٹ میں محفوظ کیا جانا چاہئے، اور انہیں غیر جراثیم سے پاک اشیاء کے ساتھ ملانا سختی سے ممنوع ہے۔
(7) تمام کوالیفائیڈ آئٹمز پر جراثیم کشی کی تاریخ اور میعاد ختم ہونے کی تاریخ کا نشان ہونا چاہیے۔
(8) نس بندی کی پروسیسنگ کے ہر بیچ کے مکمل ہونے کے بعد، جراثیم سے پاک مصنوعات کا نام، مقدار، درجہ حرارت، وقت اور آپریٹر ریکارڈ کریں۔
زہریلے اور بیکٹیریل فضلے کے علاج کے لیے تقاضے
مائکرو بائیولوجیکل تجربات میں استعمال ہونے والے تجرباتی آلات اور کلچرز کو جراثیم کشی کے بغیر لیبارٹری سے باہر نہیں نکالنا چاہیے۔
1. کلچر شدہ آلودہ مواد اور فضلہ کو تنگ کنٹینرز یا تاروں کی ٹوکریوں میں رکھا جانا چاہیے اور مرکزی طور پر مخصوص جگہوں پر اس وقت تک ذخیرہ کیا جانا چاہیے جب تک کہ وہ یکساں طور پر خودبخود نہ ہو جائیں۔
2. مائکروجنزموں سے آلودہ ثقافتوں کو 30 منٹ کے لیے 121 ° C پر آٹوکلیو کیا جانا چاہیے۔
3. استعمال کے بعد، آلودہ تنکے کو 5% کریول صابن کے محلول یا کاربولک ایسڈ کے محلول میں رکھنا چاہیے، اسے کم از کم 24 گھنٹے تک بھگو دینا چاہیے (جراثیم کش مائع کو بھیگنے والی اونچائی سے کم نہیں ہونا چاہیے)، اور پھر 30 منٹ کے لیے 121°C پر ہائی پریشر سے جراثیم سے پاک کیا جائے۔
4. داغ لگانے اور داغ دھلانے کے لیے مائع کو عام طور پر براہ راست گٹر میں بہایا جا سکتا ہے۔ وائرل بیکٹیریا کے لیے کلی کرنے والے سیال کو بیکر میں بہانا چاہیے اور گٹر میں ڈالنے سے پہلے ہائی پریشر سے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔ داغدار سلائیڈوں کو 5% کریسول صابن کے محلول میں ڈالا جاتا ہے۔ 24 گھنٹے پانی میں بھگونے کے بعد ابال کر دھو لیں۔ جمع ہونے کی جانچ کے لیے استعمال ہونے والی سلائیڈز یا برتنوں کو خود سے بند ہونا چاہیے اور پھر دھونا چاہیے۔
5. کلچر کو توڑنے کے بعد، آلودہ حصوں کو 5% کریسول صابن کے محلول یا کاربولک ایسڈ کے محلول سے فوری طور پر چھڑکیں اور بھگو دیں، آدھے گھنٹے تک بھگو دیں اور پھر صاف کریں۔
آلودہ کام کے کپڑے یا کام کے کپڑے، ٹوپیاں، ماسک وغیرہ جو پرتشدد ٹیسٹوں کے لیے پہنے جاتے ہیں انہیں خصوصی ڈس انفیکشن بیگ میں رکھنا چاہیے اور دھونے سے پہلے ہائی پریشر سے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔
درمیانی تیاری کی ضروریات
کلچر میڈیم تیاری کا معیار مائکروجنزموں کی نشوونما کو براہ راست متاثر کرے گا، کیونکہ مختلف مائکروجنزموں کی مختلف غذائی ضروریات اور ثقافت کے مختلف مقاصد ہوتے ہیں۔ مختلف ثقافتی میڈیا کے لیے تیاری کے تقاضے درج ذیل ہیں:
1. درمیانے درجے کے فارمولے کے مطابق اجزاء کا وزن کریں، اور پھر انہیں آست پانی میں تحلیل کریں۔ استعمال کرنے سے پہلے لاگو ری ایجنٹس اور ادویات کے معیار کا معائنہ کیا جانا چاہیے۔
2. پی ایچ کی پیمائش اور ایڈجسٹمنٹ: پی ایچ کی پیمائش اس وقت کی جانی چاہیے جب کلچر میڈیم کو کمرے کے درجہ حرارت پر ٹھنڈا کیا جائے، کیونکہ گرم یا سرد حالات میں پی ایچ میں ایک خاص فرق ہوتا ہے۔ جب پیمائش مکمل ہو جائے تو حسابی مقدار کے مطابق الکلی یا تیزاب ڈال کر اچھی طرح مکس کریں۔ دوبارہ ٹیسٹ کروانا چاہیے۔ کلچر میڈیم کی پی ایچ ویلیو درست ہونی چاہیے، ورنہ یہ مائکروجنزموں کی نشوونما کو متاثر کرے گی یا نتائج کے مشاہدے کو متاثر کرے گی۔ تاہم، یہ واضح رہے کہ ہائی-پریشر سٹرلائزیشن کچھ کلچر میڈیا کے پی ایچ میں کمی یا اضافے کو متاثر کر سکتی ہے، اس لیے یہ مناسب نہیں ہے کہ بہت زیادہ دباؤ پر یا بہت زیادہ بار جراثیم کشی کی جائے تاکہ کلچر میڈیم کے معیار کو متاثر نہ ہو۔ اشارے، سوڈیم ڈی آکسیکولیٹ، آگر، وغیرہ عام طور پر پی ایچ کو ایڈجسٹ کرنے کے بعد اسے شامل کریں۔
3. بیکٹیریا کی نشوونما کے مشاہدے میں آسانی کے لیے ثقافت کے ذرائع کو صاف رکھنے کی ضرورت ہے۔ کلچر میڈیم کو گرم اور ابالنے کے بعد، اسے جاذب روئی یا فلالین سے چھان کر تلچھٹ کو ہٹایا جا سکتا ہے۔ اگر ضروری ہو تو، یہ انڈے کی سفیدی کے ساتھ واضح کیا جا سکتا ہے. استعمال ہونے والی آگر سٹرپس کو پہلے سے دھو کر خشک کرنا ضروری ہے۔ استعمال سے پہلے، آگر میں نجاست کی وجہ سے شفافیت کو متاثر کرنے سے بچیں۔
4. لوہے، تانبے اور دیگر کنٹینرز کو کلچر میڈیم رکھنے کے لیے استعمال نہیں کیا جانا چاہیے۔ صاف غیر جانبدار سخت شیشے کے برتنوں کا استعمال کرنا بہتر ہے۔
5. کلچر میڈیم کی نس بندی سے نہ صرف مکمل نس بندی کا مقصد حاصل کرنا چاہیے، بلکہ اس بات پر بھی توجہ دینی چاہیے کہ حرارت کی وجہ سے اس کی غذائیت کی قیمت کم نہ ہو۔ عام طور پر، 15 منٹ کے لیے 121 ° C کافی ہے۔ کلچر میڈیا کے لیے ایسے مادوں پر مشتمل ہے جو زیادہ گرمی کے لیے ناقابل برداشت ہیں جیسے شکر اور سیرم، جیلیٹن وغیرہ، کو کم درجہ حرارت یا وقفے وقفے سے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔ کچھ ری ایجنٹس جنہیں گرم نہیں کیا جا سکتا، جیسے کہ پوٹاشیم ٹیلورائٹ، انڈے کی زردی، ٹی ٹی سی، اینٹی بائیوٹکس وغیرہ، بنیادی آگر کو آٹوکلیو کرنے اور پھر شامل کرنے کے بعد تقریباً 50 ° C پر ٹھنڈا کیا جانا چاہیے۔
6. کلچر میڈیا کی ہر کھیپ کے تیار ہونے کے بعد، جراثیم سے پاک نمو کا ٹیسٹ اور ٹیسٹ شدہ تناؤ کا نمو ٹیسٹ کیا جانا چاہیے۔ اگر یہ بائیو کیمیکل کلچر میڈیم ہے تو ٹیکہ لگانے اور کلچر کے لیے معیاری بیکٹیریل سٹرین استعمال کریں، اور بائیو کیمیکل ری ایکشن کے نتائج کا مشاہدہ کریں۔ یہ ایک عام ردعمل ظاہر کرنا چاہئے. کلچر میڈیم کو زیادہ دیر تک ذخیرہ نہیں کیا جانا چاہیے۔ اگر ضروری ہو تو اسے 4°C کے ریفریجریٹر میں محفوظ کیا جا سکتا ہے۔
7. اس وقت خشک ثقافتی میڈیا کی بہت سی قسمیں ہیں۔ ہر بیچ کو گروتھ ٹیسٹ یا بائیو کیمیکل ری ایکشن کے مشاہدے کے لیے معیاری تناؤ استعمال کرنے کی ضرورت ہے۔ مختلف ثقافتی ذرائع ابلاغ کو متعلقہ تناؤ کے نمو کے ٹیسٹ کے اچھے ہونے کے بعد ہی استعمال کیا جا سکتا ہے۔ نئی خریدی ہوئی یا خشک چیزیں جو طویل عرصے سے محفوظ ہیں استعمال کی جا سکتی ہیں۔ اسے تیار کرتے وقت کلچر میڈیم کا پی ایچ بھی ناپا جانا چاہیے، اور خوراک اور طریقہ پروڈکٹ کی ہدایات کے مطابق عمل کیا جانا چاہیے۔
8. تیار شدہ کلچر میڈیا کے ہر بیچ میں استعمال ہونے والے کیمیائی ریجنٹس، نس بندی کے حالات، تناؤ کے نمو کے ٹیسٹ کے نتائج، اور پیداواری عملے کو انکوائری کے لیے ریکارڈ کیا جانا چاہیے۔
نمونہ جمع کرنے اور پروسیسنگ کی ضروریات
1. جمع کیے گئے معائنہ کے نمونے نمائندہ ہونے چاہئیں۔ نمونے لینے کے دوران، خام مال، پروسیسنگ، نقل و حمل، ذخیرہ کرنے کے طریقوں اور کھانے کے بیچ کے حالات، ارد گرد کے ماحولیاتی صحت کی صورتحال وغیرہ کی تفصیل سے چھان بین کی جانی چاہیے تاکہ یہ معلوم کیا جا سکے کہ آیا آلودگی کے کوئی ذرائع موجود ہیں۔
2. خوراک کی قسم اور مقدار کے مطابق نمونے لینے کی مقدار اور طریقہ معیاری معائنہ کے طریقوں کی ضروریات کے مطابق کیا جانا چاہیے۔
3. نمونے لیتے وقت ایسپٹک آپریشن پر توجہ دیں، اور ماحول میں مائکروبیل آلودگی سے بچنے کے لیے کنٹینر کو جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔ کنٹینر کو creosal صابن کے محلول سے جراثیم سے پاک نہیں کیا جانا چاہیے، کلومیتھیونین، الکحل اور دیگر جراثیم کش ادویات سے جراثیم کشی نہیں کی جانی چاہیے، اور اس میں ایسے جراثیم کش یا اینٹی بائیوٹکس شامل نہیں ہونا چاہیے۔ نمونے میں مائکروجنزموں کو مارنے سے بچنے کے لیے، استعمال ہونے والی قینچی، چاقو، اور چمچوں کو بھی استعمال سے پہلے جراثیم سے پاک کیا جانا چاہیے۔
4. نمونے جمع کرنے کے فوراً بعد معائنہ کے لیے معائنہ کے کمرے میں بھیجے جائیں۔ معائنہ کا عمل عام طور پر 3 گھنٹے سے زیادہ نہیں ہوتا ہے۔ اگر فاصلہ طویل ہے، تو اسے 1 ~ 5℃ کے ماحول میں ذخیرہ کیا جا سکتا ہے۔ اگر اسے منجمد کرنے کی ضرورت ہو تو اسے منجمد حالت میں رکھنا چاہیے۔ معائنہ کے لیے جمع کروائیں۔
5. نمونہ حاصل کرنے کے بعد، معائنہ کا کمرہ اسے رجسٹر کرے گا (نمونہ کا نام، معائنہ کے لیے یونٹ، مقدار، تاریخ، نمبر، وغیرہ) اور نمونے کی ظاہری شکل کا مشاہدہ کرے گا۔ اگر مندرجہ ذیل شرائط میں سے کوئی بھی پایا جاتا ہے تو، معائنہ سے انکار کیا جا سکتا ہے:
(1) وہ نمونے جنہیں خصوصی ہائی پریشر، ابالنے یا دیگر طریقوں سے جراثیم سے پاک کیا گیا ہے وہ اصل خوراک کی نمائندگی کرنے میں اپنی اہمیت کھو دیں گے۔
(2) کھانے کی بوتلیں اور تھیلے کھولے گئے، پکا ہوا گوشت اور اس سے بنی اشیاء، پکی ہوئی پولٹری اور دیگر کھانے کی چیزیں ٹوٹی ہوئی اور نامکمل ہوگئیں، یعنی کھانے کی اصل شکل ختم ہوگئی (سوائے فوڈ پوائزننگ کے نمونوں کے)؛
(3) نمونے لینے کی مقدار ضرورت کے مطابق ناکافی ہے۔
معائنہ کے لیے جمع کرائے گئے نمونوں کے لیے جو تقاضوں کو پورا کرتے ہیں، ان کے موصول ہونے کے بعد معائنہ کے کمرے کو فوری طور پر معائنہ کرنا چاہیے۔ اگر شرائط پوری نہیں ہوتی ہیں، تو انہیں 4°C کے ریفریجریٹر میں رکھنا چاہیے، وقت پر حالات پیدا کرنے کے لیے تیار رہنا چاہیے، اور پھر معائنہ کرنا چاہیے۔
6. نمونوں کا معائنہ کرتے وقت، ان کی مختلف خصوصیات کے مطابق مناسب پروسیسنگ انجام دیں۔
(1) مائع کے نمونوں کو ٹیکہ لگاتے وقت، انہیں اچھی طرح سے ملایا جائے اور مقدار کے مطابق ٹیکہ لگایا جائے۔
(2) ٹھوس نمونوں کے لیے، 25 گرام مختلف حصوں کو کاٹنے کے لیے جراثیم سے پاک چھری کا استعمال کریں، انہیں 225 ملی لیٹر جراثیم سے پاک نمکین یا دیگر محلول میں رکھیں، ہوموجنائزر کے ساتھ کچل کر مکس کریں، اور مقدار کے مطابق ٹیکہ لگائیں۔
(3) کھانے کی بوتلیں اور تھیلے جراثیم کشی کے ذریعے کھولے جائیں، اور ٹیکہ لگانے سے پہلے درج بالا طریقوں کو خصوصیات کے مطابق منتخب کیا جائے۔
نمونہ معائنہ، ریکارڈنگ اور رپورٹنگ کی ضروریات
1. نمونہ حاصل کرنے کے بعد، معائنہ کا کمرہ پہلے ظاہری معائنہ کرے گا اور فوری طور پر قومی معیاری معائنہ کے طریقوں کے مطابق معائنہ کرے گا۔ معائنہ کے عمل کے دوران، جراثیم کش آپریشن احتیاط سے، ذمہ داری کے ساتھ اور سختی سے کیے جانے چاہئیںمائکروبیل ٹیسٹ کا نتیجہماحول میں آلودگی.
2. نمونے کے معائنے کے عمل کے دوران استعمال کیے گئے طریقے، وہ واقعات اور نتائج جو پیش آئے، وغیرہ کو تحریری امتحان کے ریکارڈ میں نتائج کے تجزیہ اور فیصلے کی بنیاد کے طور پر لکھا جانا چاہیے۔ ریکارڈ تفصیلی، واضح، مستند، معروضی ہونا چاہیے اور ان میں ردوبدل یا جعلی نہیں ہونا چاہیے۔
میں
میں