Riassuntu di i requisiti di teste microbiologiche
2024-01-24 15:14:33
I requisiti è i passi pertesti microbiologichisò i seguenti:
Requisiti di l'operazione asettica:
1.Tu deve portà vestiti di travagliu è un capu di travagliu quandu inoculate bacteria.
2. Quandu si inoculanu i campioni di l'alimentu, deve esse purtatu vestiti di travagliu speciale, tappi è pantofole, chì deve esse postu in a stanza di buffer di a stanza sterile è utilizatu dopu a disinfezione UV prima di u travagliu.
3. Quandu inoculate i campioni di l'alimentu, lavate e mani cù sapone prima di entre in a stanza sterile, è poi sguassate e mani pulite cù una bola di cuttuni alcolu 75%.
4. I paglia, i piatti piani è i medii di cultura utilizati per l'inoculazione deve esse sterilizzati è sterilizzati. I cuntenituri micca utilizati ùn deve esse lasciati inutilizati dopu l'apertura di u pacchettu. L'utensili di metallu deve esse autoclavatu o brusgiatu trè volte cù 95% alcolu prima di l'usu.
5. Quandu pigliate a paglia fora di u pacchettu, a punta di a paglia ùn deve micca toccu i pezzi esposti. Quandu s'utilice a paglia per inoculate u tubu di teste o a piastra, a punta di a paglia ùn deve micca toccu u bordu di u tubu di teste o a piastra.
6. Inoculating samples and transfering bacterias must be made in front of an alcohol lamp. Quandu si inoculanu battìri o campioni, a paglia deve esse sterilizzata da a fiamma dopu avè cacciatu da u pacchettu è apre u tappu di u tubu di prova.
7. Prima di inoculating bacteria, tutti i fili metallichi di u loop di inoculazione è l'agulla deve esse brusgiatu cù una fiamma, è se ne necessariu, a cunnessione trà u loop, l'agulla è u bastone deve esse brusgiatu. U ciclu di inoculazione per inoculating bacteria tuberculosis è battìri virulent deve esse bollitu in acqua fogera per 5 minuti, è poi Burned by flame.
8. Quandu sughje u liquidu bacteriale o campioni cù una paglia, aduprate a punta di gomma currispundenti per sughjella, è ùn sughjenu micca direttamente cù a bocca.
Requisiti d'usu di stanza sterile:
1. I finestri chì portanu à l'esternu di a stanza sterile deve esse doppia-glazed è sigillati. Ùn deve esse apertu à vuluntà. Ci deve esse una stanza buffer è una porta scorrevule chì currisponde à a dimensione di a stanza sterile. Ci deve ancu esse una piccula finestra di 0,5 ~ 0,7 m2. In preparazione per passà l'articuli dopu à l'ingressu à a stanza sterile.
2. A stanza sterile deve esse mantene pulita. Dopu à u travagliu, deve esse disinfettatu cù 2% à 3% solu solu di sapone di cresol, a superficia di u travagliu deve esse sguassate, è l'articuli chì ùn sò micca ligati à l'esperimentu ùn deve esse guardatu.
3. A porta di a stanza sterile deve esse chjusa strettamente prima è dopu l'usu, è a lampa ultravioletta deve esse attivata. Se una lampada ultravioletta interna sospesa hè aduprata per a disinfezione, una lampada ultravioletta 30W hè necessaria. A distanza hè 1,0 m, è u tempu di irradiazione ùn hè micca menu di 30 minuti. Quandu si usa lampade ultraviolette, l'attenzione deve esse pagata per Operare direttamente sottu a luce ultravioletta per evità danni. A lampa deve esse pulita cù una bola di cuttuni alcolu ogni duie simane per sguassà a polvera è u grassu per riduce l'impattu di a penetrazione ultravioletta.
4. Quandu prucessa è inoculate specimens alimentarii, entra in a stanza sterile per u funziunamentu è ùn sò micca permessi d'entra o di esce à vuluntà. Se l'articuli deve esse passatu, ponu esse passati per a piccula finestra.
5. Se l'aria condizionata deve esse installata in a stanza sterile, deve esse un dispusitivu di filtrazione.
Requisiti di disinfezione è sterilizazione
Glassware, utensili di metallu è i media di cultura utilizati pertesti microbiologichi, i culturi contaminati è inoculati, etc. deve esse sterilizzati prima di l'usu. Metudi di sterilizazione di vapore di pressione di calore seccu è umitu.
1. Preparazione prima di sterilizazione
(1) Tutti l'articuli chì devenu esse sterilizzati sò prima lavati è secchi. I vetri, cum'è e paglie è i piatti piani, deve esse strettu cù carta. Sì i tubi di metallu sò usati, i buchi di ventilazione nantu à elli deve esse aperti.
(2) Imbulighjate u tappu di u fiascu triangulare chì cuntene u mediu di cultura in carta, copre u tubu di prova, è tira fora u core di a siringa, è imbottite cù gasa.
2. stallà
(1) Sterilizzatore di calore seccu: L'articuli ùn deve esse micca sopraffullati è ùn ponu micca toccu i quattru mura di a scatula.
(2) Grande coccia à vapore à alta pressione: Pone l'articuli sterilizzati, imbulighjate separatamente, è mette direttamente in u cilindru di sterilizazione. Ùn affullate micca l'articuli.
3. Ispezione di l'equipaggiu
(1) Verificate se l'interruttore di a porta hè flexible, se l'anellu di gomma hè dannatu è s'ellu hè pianu.
(2) Verificate s'ellu si trova in a pusizioni zero quandu u vapore hè esauritu, chjude a porta è u coperchiu, ventilate u vapore o u calore, è osservate s'ellu ci hè una fuga d'aria, se e cundizioni marcate da u manometro è u termometru currispondenu, è se u pipeline hè bluccatu.
(3) Per i sterilizatori cù i dispositi di cuntrollu di u prugramma elettronicu automaticu, u prugramma specificatu deve esse verificatu prima di l'usu per vede s'ellu risponde à i requisiti per a sterilizazione.
4. Trattamentu di sterilizazione
(1) Metudu di sterilizazione di calore seccu:
Stu metudu hè adattatu per l'articuli chì ùn dannu micca, deteriorate, o evaporate in cundizioni di calore seccu. Hè più comunmente utilizatu per sterilizà vetri, prudutti di metalli, prudutti di ceramica, etc.
①L'instrumenti è l'utensili deve esse lavatu prima di seccu - cuttura per impedisce a terra attaccata à a superficia di esse carbonizata.
② Durante l'sterilizazione, l'articuli ùn deve esse micca sopraffullati, ùn cuntattate micca direttamente u fondu è u muru di a scatula, è lasciate spazii trà l'articuli.
③ Durante a sterilizazione, chjude a porta strettu, cunnette l'alimentazione, apre u foru di scarico per circa 30 minuti per caccià l'aria fridda in u sterilizzatore, aghjustate l'indicatore luminoso quandu a temperatura aumenta à 160 ° C, è mantene per 1,5 à 2 ore.
④Dopu chì a sterilizazione hè finita o durante u prucessu di crescita di a temperatura, a porta deve esse aperta sottu à 60 ° C.
(2) I seguenti passi devenu esse seguiti quandu si usa una olla à pressione portatile o un sterilizzatore à vapore à pressione verticale:
① Aghjunghjite 3L d'acqua à u corpu principale di a coccia à pressione portatile, è 16L d'acqua à a coccia à pressione verticale (a quantità d'acqua deve esse rimbursata quandu si riutilice, è l'acqua deve esse rimpiazzata s'ellu diventa turbide);
② Per una cocia a pressione portatile, inserisce u tubu di scarico nantu à a tappa superiore in u tubu quadratu nantu à u muru internu di u canna di sterilizazione (i sterilizzatori senza tubi o quelli cù tubi corroditi è crackati ùn deve esse usatu);
③ Coperta a tappa superiore è stringhjela fermamente per impedisce a fuga d'aria; Pone u sterilizzatore nantu à a fonte di u focu per u calore, accende a putenza di l'olla à pressione verticale, è apre a valvula di scarico nantu à a tappa superiore per lascià l'aria (l'aria di scarico per 10 à 15 minuti dopu l'acqua bolle));
④Close a valvula di scarico per elevà a pressione di vapore à i requisiti specificati è mantene per u tempu specificatu (secondu a natura di l'articuli sterilizzati è e circustanze pertinenti);
⑤ Dopu à u tempu specificatu hè ghjuntu, per l'articuli chì deve esse seccu, apre immediatamente a valvula di scarico per scaricate u vapore. Quandu a pressione torna à cero, rinfriscà naturalmente à 60 ° C è dopu apre a tapa per caccià l'articuli. S'ellu hè un articulu liquidu, ùn apre micca a valvula di scarico. A pignatta deve esse sguassata da a fonte di calore immediatamenti è permessa di rinfriscà naturalmente finu à chì a pressione torna à cero è a temperatura scende sottu à 60 ° C prima di apre a tapa per caccià u cuntenutu per prevene a decompressione brusca di u liquidu da ebullizione violenta o splusione di u cuntinuu.
(3) Segui i seguenti passi per aduprà u sterilizzatore à vapore di cooker à pressione horizontale:
①Close the pot door strettu, apre a valvula di ingressu di l'aria, introduce vapore in a mezzanine per preriscaldamentu, è l'aria fridda in a mezzanine serà scaricata automaticamente attraversu a barriera d'aria;
②Dopu chì l'interlayer righjunghji a temperatura predeterminata, apre a valvola di ingressu di l'aria di a camera di a pignatta, introduce u vapore in a camera di a pignatta, è l'aria fridda in a camera di a pignatta serà scaricata automaticamente attraversu l'arrestatore d'aria di a camera di pignata;
③Quandu a pressione è a temperatura in a camera di a pignatta righjunghjenu a pressione specificata, aghjustate a valvola di ingressu d'aria per mantene a constantità;
④ Raffreddate a temperatura naturalmente o artificialmente à 60 ℃ prima di apre a porta per caccià l'articuli. Ùn aduprate micca u metudu di scaricamentu rapidu di vapore per prevene una caduta di pressione brusca, ebollizione violenta di u liquidu o splusione di u cuntinuu;
⑤ Quandu si usa un prugramma automaticu - Sterilizzatore à vapore di pressione cuntrullata, dopu avè piazzatu l'articuli è chjusu a porta strettu, l'interruttore currispondente deve esse premutu secondu a categuria di l'articuli per chì a sterilizazione pò esse realizata automaticamente secondu e prucedure richieste. Durante a sterilizazione, l'instrumentu attaccatu deve esse usatu per registrà a temperatura è u tempu. Per riferimentu futuru, i requisiti di u funziunamentu deve esse strettamente in cunfurmità cù l'istruzzioni di u fabricatore;
5. Temperature è tempu di sterilizazione
(1) A temperatura di sterilizazione di u sterilizzatore di calore seccu hè 160 ℃, 1,5 ~ 2 h.
(2) Temperature di sterilizazione è tempu di sterilizzatore à vapore di pressione
Metudu di sterilizazione intermittenti
1. Metudu di sterilizazione:
Utilizà a sterilizazione di vapore senza pressione. Certi sustanzi sò facilmente distrutte da sterilizazione di vapore d'alta pressione, cusì stu metudu pò esse usatu per sterilizazione.
(1) Pone l'articuli per esse sterilizzati in a pignata, copre a tappa superiore, apre l'outlet di drenu, è sguassate l'acqua restante in a pignatta.
(2) Chiudere l'outlet di drenu, apre a porta di l'entrata di l'aria, è disinfettate per 10 à 20 minuti cum'è necessariu.
(3) Dopu chì a sterilizazione hè finita, chjude a porta di l'aria, pigliate l'articuli è aspittà per rinfriscà à a temperatura di l'ambienti, mette in una incubadora di 37 ° C per a notte, è cuntinueghja à sterilizà secondu u metudu sopra u ghjornu dopu. Fate questu trè volte per ottene u scopu di sterilizazione.
2. Cumu aduprà u serum coagulator:
Quandu u mediu di cultura cuntene ingredienti spiciali cum'è serum o ova, u calore altu distrughjerà i so nutrienti. Dunque, a bassa temperatura pò esse aduprata per coagulà u serum è ottene scopi di sterilizazione:
(1) Quandu s'utilice u serum sterilizatu da stu metudu à l'aliquota, l'operazione asettica deve esse strettamente seguita, è i testi è i piatti anu ancu esse sterilizzati prima di l'usu;
(2) Fate u mediu di cultura in una pendenza o una capa alta cum'è necessariu. Dopu avè aghjustatu abbastanza acqua, cunnetta l'alimentazione, elevà a temperatura à 75 ~ 90 ° C per una ora è poi sterilizà. Pone in un incubatore à 37 ° C per a notte, è poi sterilizà trè volte.
3. Foglie è disinfettate:
Pudete aduprà una pignatta o un sterilizzatore di ebollizione. Dopu chì l'acqua fogghi, bollite per 5 à 15 minuti. Pudete ancu aghjunghje l'acidu carbolic 2% à l'acqua è fogghiu durante 5 minuti. Aghjunghjite 0,02% di formaldehyde è bolle à 80 ° C per 60 minuti per ottene u scopu di sterilizazione. In ogni casu, a sterilizazione di ebollizione pò esse ottenuta. Quandu si usanu enhancers, l'attenzione deve esse pagata à a corrosività di l'articuli.
4. Trattamentu di sterilizazione:
Dopu a sterilizazione, l'articuli sò digià sterili in circustanze normale. Anu da esse inspeccionati cù cura è posti quandu sò stati fora di u sterilizzatore per evità a contaminazione;
(1) Pigliate l'articuli è verificate immediatamente l'integrità di l'imballu. Se ci hè danni o u tampon hè eliminatu, ùn pò micca esse usatu cum'è articuli sterili;
(2) L'articuli catturati ùn ponu micca esse usatu cum'è articuli sterili se u so imballaggio hè ovviamente imbiccu in acqua;
(3) U mediu di cultura o reagenti deve esse verificatu per vede s'ellu si ncontranu u culore o u statu dopu a sterilizazione. Quelli chì ùn rispondenu micca à i requisiti deve esse scartati;
(4) Per i cuntenituri aperti - chjusi, i buchi di u screnu duveranu esse chjusi quandu si piglianu fora;
(5) Se l'articuli sguassati cascanu à a terra, sò misplaced in un locu impuru, o sò macchiati d'acqua, sò cunsiderati contaminati è ùn ponu micca esse usatu cum'è articuli sterili;
(6) L'articuli sterilizzati qualificati pigliati deve esse guardati in a stanza di magazzini o in un armariu à prova di polvera, è hè strettamente pruibitu di mischjà cù articuli micca sterilizzati;
(7) Tutti l'articuli qualificati devenu esse marcati cù a data di sterilizazione è a data di scadenza;
(8) Dopu chì ogni batch di prucessu di sterilizazione hè cumpletu, scrivite u nome, a quantità, a temperatura, u tempu è l'operatore di i prudutti sterilizzati.
Requisiti per u trattamentu di i rifiuti tossichi è bacteriali
L'equipaggiu sperimentale è i culturi utilizati in esperimenti microbiologichi ùn deve micca esse cacciatu da u laboratoriu senza disinfettazione.
1. I materiali cuntaminati cultivati è i rifiuti deve esse posti in cuntenituri stretti o cesti di filu è almacenati cintrali in lochi designati finu à ch'elli sò uniformi autoclaved.
2. I culturi contaminati da i microorganismi devenu esse autoclavati à 121 ° C per 30 minuti.
3. Dopu à l'usu, i paglia contaminati deve esse posti in una solu suluzione di sapone di 5% o una suluzione di l'acidu carbulicu, imbulighjate per almenu 24 ore (u liquidu disinfettante ùn deve esse più bassu di l'altitudine di soaking), è dopu sterilizatu da alta pressione à 121 ° C per 30 minuti.
4. U liquidu per staining and rinsing smears pò generalmente esse lavatu direttamente in a fossa. U fluidu di rinfurzà per i battìri virulenti deve esse lavatu in un beaker è sterilizatu da alta pressione prima di versà in a fossa. I vetri macchiati sò messi in una soluzione di sapone di cresol 5%. Dopu à 24 ore in acqua, fogghiu è lavà. I vetri o i piatti usati per a prova di agglutinazione deve esse autoclavati è poi lavati.
5. Dopu avè rottu a cultura, spruzzate subitu è imbulighjate e parti cuntaminate cù una suluzione di sapone di cresol 5% o una suluzione di l'acidu carbulicu, immergete per una meza ora è poi pulisce.
A robba di travagliu cuntaminata o vestiti di travagliu, tappi, maschere, etc., purtati per teste viulenti, deve esse posti in sacchetti di disinfezione speciale è sterilizzati da alta pressione prima di esse lavati.
Esigenze di preparazione media
A qualità di a preparazione di u mediu di cultura affettarà direttamente a crescita di i microorganismi, perchè diversi microorganismi anu diverse esigenze nutrizionali è diversi scopi di cultura. I requisiti di preparazione per i diversi media di cultura sò i seguenti:
1. Pisà l'ingredienti secondu a formula media, è dopu dissolve in acqua distillata. A qualità di i reagenti applicati è di e droghe deve esse inspeccionate prima di l'usu.
2. A misurazione di u pH è l'ajustamentu: a misurazione di u pH deve esse realizatu quandu u mediu di cultura hè rinfriscatu à a temperatura di l'ambienti, perchè ci hè una certa diferenza di pH in cundizioni calde o friddi. Quandu a misurazione hè cumpleta, aghjunghje alkali o acidu secondu a quantità calculata è mischjà bè. Si deve esse pruvatu di novu. U valore di pH di u mediu di cultura deve esse precisu, altrimenti affettarà u crescita di i microorganismi o affettanu l'osservazione di i risultati. In ogni casu, deve esse nutatu chì l'high-pressure sterilization pò influenzà a diminuzione o l'aumentu di u pH di certi media di cultura, per quessa ùn hè micca cunsigliatu di sterilizà à una pressione troppu alta o troppu volte per evitari di affettà a qualità di u mediu di cultura. Indicatori, sodium deoxycholate, agar, etc. sò generalmente aghjunghje dopu à aghjustà u pH.
3. U mediu di cultura deve esse guardatu chjaru per facilità l'observazione di a crescita bacteriana. Dopu chì u mediu di cultura hè calda è bollita, pò esse filtrata cù cuttuni assorbenti o flanella per sguassà u sedimentu. Se necessariu, pò esse clarificatu cù u biancu d'ova. E strisce di agar aduprate devenu esse lavate è secche in anticipu. Prima di l'usu, evite affettà a trasparenza per impurità in l'agar.
4. Ferru, ramu è altri cuntenituri ùn deve esse usatu per mantene u mediu di cultura. Hè megliu aduprà cuntenituri di vetru duru neutru puliti.
5. A sterilizazione di u mediu di cultura ùn deve micca solu ottene u scopu di sterilizazione cumpleta, ma ancu attente à ùn riduce u so valore nutrizionale per via di u riscaldamentu. In generale, 121 ° C per 15 minuti hè abbastanza. Per i medii di cultura chì cuntenenu sustanzi chì sò intolleranti à u calore elevatu, cum'è zuccheri è serum , gelatina, etc., deve esse sterilizzati da a temperatura bassa o un metu intermittenti. Certi reagenti chì ùn pò micca esse riscaldatu, cum'è u tellurite di potasio, u viulinu d'ova, TTC, antibiotici, etc., deve esse rinfriscati à circa 50 ° C dopu chì l'agar di basa hè autoclavatu è dopu aghjustatu;
6. Dopu chì ogni batch of culture media hè preparatu, deve esse realizatu un test di crescita sterile è un test di crescita di i ceppi pruvati. S'ellu hè un mediu di cultura biochimica, utilizate ceppi batterichi standard per inoculazione è cultura, è osservate i risultati di a reazione biochimica. Duverebbe mostra una reazione normale. U mediu di cultura ùn deve esse guardatu per troppu longu. In casu di necessariu, pò esse guardatu in un frigorifero à 4 ° C.
7. At prisente, ci sò parechji tipi di media di cultura secca. Ogni batch deve aduprà ceppi standard per a prova di crescita o l'osservazione di a reazione biochimica. Diversi medii di cultura pò esse usatu solu dopu chì a prova di crescita di i ceppi currispondenti hè bona. I novi acquistati o secchi chì sò stati guardati per un bellu pezzu pò esse usatu. U pH di u mediu di cultura deve ancu esse misuratu quandu si preparanu, è a dosa è u metudu deve esse seguitu secondu l'urdinamentu di u produttu.
8. I reagenti chimichi, e cundizioni di sterilizazione, i risultati di a prova di crescita di strain, è u persunale di pruduzzione utilizatu in ogni batch di media di cultura preparatu deve esse arregistrati per inchiesta.
Esigenze di raccolta di campioni è di trasfurmazioni
1. I campioni d'ispezione cullati devenu esse rappresentanti. Quandu u campionamentu, a materia prima, u trasfurmazioni, u trasportu, i metudi di almacenamento è e cundizioni di u batch of food, e cundizioni di salute ambientale circundante, etc. deve esse investigatu in dettagliu per verificà s'ellu ci sò fonti di contaminazione.
2. Sicondu u tipu è a quantità di l'alimentu, a quantità è u metudu di campionamentu deve esse realizatu in cunfurmità cù i requisiti di i metudi di ispezione standard.
3. Prestate attenzione à u funziunamentu asepticu quandu u sampling, è u cuntinuu deve esse sterilizatu per evità a contaminazione microbiana in l'ambiente. U cuntinuu ùn deve esse sterilizatu cù suluzione di sapone creosal, sterilizazione cù chlormethionine, alcolu è altri disinfettanti, è ùn deve micca cuntene tali disinfettanti o antibiotici. Per evitari di tumbà i microorganismi in a mostra, i forbici, i culteddi è i cucchiai utilizati anu ancu esse sterilizzati prima di l'usu.
4. I campioni devenu esse mandati à a sala d'ispezione per l'ispezione immediatamente dopu a cullizzioni. U prucessu d'ispezione generalmente ùn supera micca 3 ore. Se a distanza hè longa, pò esse guardatu in un ambiente di 1 ~ 5 ℃. S'ellu deve esse congelatu, deve esse guardatu in un statu congelatu. Mandate per l'ispezione.
5. Dopu avè ricivutu a mostra, a sala di ispezione l'arregistrarà (nome di mostra, unità per l'ispezione, quantità, data, numeru, etc.) è osservate l'aspettu di a mostra. Se si trova una di e seguenti cundizioni, l'ispezione pò esse rifiutata:
(1) I campioni chì sò stati sterilizzati da alta pressione speciale, bolle o altri metudi perderanu u so significatu in rapprisintà l'alimentu originale;
(2) I buttigli è i sacchetti di l'alimentariu sò stati aperti, a carne cotta è i so prudutti, u pollame cottu è altri alimenti sò stati rotti è incompleti, vale à dì, a forma originale di l'alimentu hè stata persa (eccettu per i campioni di avvelenamentu alimentari);
(3) A quantità di campionamentu hè insufficiente cum'è necessariu;
Per i campioni sottumessi à l'ispezione chì rispondenu à i requisiti, a sala d'ispezione duverà immediatamente fà l'ispezione dopu avè ricivutu. Se e cundizioni ùn sò micca scontri, anu da esse guardatu in un frigorifico di 4 ° C, preparate per creà e cundizioni in u tempu, è poi cunduce l'ispezione.
6. Quandu inspeccione i campioni, eseguite un prucessu adattatu secondu e so diverse proprietà.
(1) Quandu inoculate i campioni di liquidu, anu da esse mischiati bè è inoculati secondu a quantità.
(2) Per i campioni solidi, aduprate un cuteddu sterilizatu per cut out 25g di diverse parti, mette in 225mL di saline sterilizzate o altre suluzione, sfracicà è mischjà cun un homogenizer, è inoculate secondu a quantità.
(3) I buttigli è i sacchetti di manciari deve esse aperti da a sterilizazione, è i metudi di sopra deve esse sceltu secondu e caratteristiche prima di inoculazione.
Esigenze di ispezione, registrazione è rapportu di campioni
1. Dopu avè ricivutu a mostra, a sala d'ispezione prima cunducerà una ispezione di l'apparenza è prontu cunducerà l'ispezione in cunfurmità cù i metudi d'ispezione standard naziunali. Durante u prucessu d'ispezione, l'operazioni asettiche deve esse realizatu cù cura, rispunsabilità è strettamente per evitàu risultatu di a prova microbianacontaminazione in l'ambiente.
2. I metudi utilizati durante u prucessu d'ispezione di mostra, i fenomeni è i risultati chì sò accaduti, etc., deve esse scritti in registri di teste scritte cum'è una basa per l'analisi è u ghjudiziu di i risultati. I registri devenu esse dettagliati, chjaru, autentici, oggettivi, è ùn deve esse micca alterati o falsificati.
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Requisiti di l'operazione asettica:
1.Tu deve portà vestiti di travagliu è un capu di travagliu quandu inoculate bacteria.
2. Quandu si inoculanu i campioni di l'alimentu, deve esse purtatu vestiti di travagliu speciale, tappi è pantofole, chì deve esse postu in a stanza di buffer di a stanza sterile è utilizatu dopu a disinfezione UV prima di u travagliu.
3. Quandu inoculate i campioni di l'alimentu, lavate e mani cù sapone prima di entre in a stanza sterile, è poi sguassate e mani pulite cù una bola di cuttuni alcolu 75%.
4. I paglia, i piatti piani è i medii di cultura utilizati per l'inoculazione deve esse sterilizzati è sterilizzati. I cuntenituri micca utilizati ùn deve esse lasciati inutilizati dopu l'apertura di u pacchettu. L'utensili di metallu deve esse autoclavatu o brusgiatu trè volte cù 95% alcolu prima di l'usu.
5. Quandu pigliate a paglia fora di u pacchettu, a punta di a paglia ùn deve micca toccu i pezzi esposti. Quandu s'utilice a paglia per inoculate u tubu di teste o a piastra, a punta di a paglia ùn deve micca toccu u bordu di u tubu di teste o a piastra.
6. Inoculating samples and transfering bacterias must be made in front of an alcohol lamp. Quandu si inoculanu battìri o campioni, a paglia deve esse sterilizzata da a fiamma dopu avè cacciatu da u pacchettu è apre u tappu di u tubu di prova.
7. Prima di inoculating bacteria, tutti i fili metallichi di u loop di inoculazione è l'agulla deve esse brusgiatu cù una fiamma, è se ne necessariu, a cunnessione trà u loop, l'agulla è u bastone deve esse brusgiatu. U ciclu di inoculazione per inoculating bacteria tuberculosis è battìri virulent deve esse bollitu in acqua fogera per 5 minuti, è poi Burned by flame.
8. Quandu sughje u liquidu bacteriale o campioni cù una paglia, aduprate a punta di gomma currispundenti per sughjella, è ùn sughjenu micca direttamente cù a bocca.
Requisiti d'usu di stanza sterile:
1. I finestri chì portanu à l'esternu di a stanza sterile deve esse doppia-glazed è sigillati. Ùn deve esse apertu à vuluntà. Ci deve esse una stanza buffer è una porta scorrevule chì currisponde à a dimensione di a stanza sterile. Ci deve ancu esse una piccula finestra di 0,5 ~ 0,7 m2. In preparazione per passà l'articuli dopu à l'ingressu à a stanza sterile.
2. A stanza sterile deve esse mantene pulita. Dopu à u travagliu, deve esse disinfettatu cù 2% à 3% solu solu di sapone di cresol, a superficia di u travagliu deve esse sguassate, è l'articuli chì ùn sò micca ligati à l'esperimentu ùn deve esse guardatu.
3. A porta di a stanza sterile deve esse chjusa strettamente prima è dopu l'usu, è a lampa ultravioletta deve esse attivata. Se una lampada ultravioletta interna sospesa hè aduprata per a disinfezione, una lampada ultravioletta 30W hè necessaria. A distanza hè 1,0 m, è u tempu di irradiazione ùn hè micca menu di 30 minuti. Quandu si usa lampade ultraviolette, l'attenzione deve esse pagata per Operare direttamente sottu a luce ultravioletta per evità danni. A lampa deve esse pulita cù una bola di cuttuni alcolu ogni duie simane per sguassà a polvera è u grassu per riduce l'impattu di a penetrazione ultravioletta.
4. Quandu prucessa è inoculate specimens alimentarii, entra in a stanza sterile per u funziunamentu è ùn sò micca permessi d'entra o di esce à vuluntà. Se l'articuli deve esse passatu, ponu esse passati per a piccula finestra.
5. Se l'aria condizionata deve esse installata in a stanza sterile, deve esse un dispusitivu di filtrazione.
Requisiti di disinfezione è sterilizazione
Glassware, utensili di metallu è i media di cultura utilizati pertesti microbiologichi, i culturi contaminati è inoculati, etc. deve esse sterilizzati prima di l'usu. Metudi di sterilizazione di vapore di pressione di calore seccu è umitu.
1. Preparazione prima di sterilizazione
(1) Tutti l'articuli chì devenu esse sterilizzati sò prima lavati è secchi. I vetri, cum'è e paglie è i piatti piani, deve esse strettu cù carta. Sì i tubi di metallu sò usati, i buchi di ventilazione nantu à elli deve esse aperti.
(2) Imbulighjate u tappu di u fiascu triangulare chì cuntene u mediu di cultura in carta, copre u tubu di prova, è tira fora u core di a siringa, è imbottite cù gasa.
2. stallà
(1) Sterilizzatore di calore seccu: L'articuli ùn deve esse micca sopraffullati è ùn ponu micca toccu i quattru mura di a scatula.
(2) Grande coccia à vapore à alta pressione: Pone l'articuli sterilizzati, imbulighjate separatamente, è mette direttamente in u cilindru di sterilizazione. Ùn affullate micca l'articuli.
3. Ispezione di l'equipaggiu
(1) Verificate se l'interruttore di a porta hè flexible, se l'anellu di gomma hè dannatu è s'ellu hè pianu.
(2) Verificate s'ellu si trova in a pusizioni zero quandu u vapore hè esauritu, chjude a porta è u coperchiu, ventilate u vapore o u calore, è osservate s'ellu ci hè una fuga d'aria, se e cundizioni marcate da u manometro è u termometru currispondenu, è se u pipeline hè bluccatu.
(3) Per i sterilizatori cù i dispositi di cuntrollu di u prugramma elettronicu automaticu, u prugramma specificatu deve esse verificatu prima di l'usu per vede s'ellu risponde à i requisiti per a sterilizazione.
4. Trattamentu di sterilizazione
(1) Metudu di sterilizazione di calore seccu:
Stu metudu hè adattatu per l'articuli chì ùn dannu micca, deteriorate, o evaporate in cundizioni di calore seccu. Hè più comunmente utilizatu per sterilizà vetri, prudutti di metalli, prudutti di ceramica, etc.
①L'instrumenti è l'utensili deve esse lavatu prima di seccu - cuttura per impedisce a terra attaccata à a superficia di esse carbonizata.
② Durante l'sterilizazione, l'articuli ùn deve esse micca sopraffullati, ùn cuntattate micca direttamente u fondu è u muru di a scatula, è lasciate spazii trà l'articuli.
③ Durante a sterilizazione, chjude a porta strettu, cunnette l'alimentazione, apre u foru di scarico per circa 30 minuti per caccià l'aria fridda in u sterilizzatore, aghjustate l'indicatore luminoso quandu a temperatura aumenta à 160 ° C, è mantene per 1,5 à 2 ore.
④Dopu chì a sterilizazione hè finita o durante u prucessu di crescita di a temperatura, a porta deve esse aperta sottu à 60 ° C.
(2) I seguenti passi devenu esse seguiti quandu si usa una olla à pressione portatile o un sterilizzatore à vapore à pressione verticale:
① Aghjunghjite 3L d'acqua à u corpu principale di a coccia à pressione portatile, è 16L d'acqua à a coccia à pressione verticale (a quantità d'acqua deve esse rimbursata quandu si riutilice, è l'acqua deve esse rimpiazzata s'ellu diventa turbide);
② Per una cocia a pressione portatile, inserisce u tubu di scarico nantu à a tappa superiore in u tubu quadratu nantu à u muru internu di u canna di sterilizazione (i sterilizzatori senza tubi o quelli cù tubi corroditi è crackati ùn deve esse usatu);
③ Coperta a tappa superiore è stringhjela fermamente per impedisce a fuga d'aria; Pone u sterilizzatore nantu à a fonte di u focu per u calore, accende a putenza di l'olla à pressione verticale, è apre a valvula di scarico nantu à a tappa superiore per lascià l'aria (l'aria di scarico per 10 à 15 minuti dopu l'acqua bolle));
④Close a valvula di scarico per elevà a pressione di vapore à i requisiti specificati è mantene per u tempu specificatu (secondu a natura di l'articuli sterilizzati è e circustanze pertinenti);
⑤ Dopu à u tempu specificatu hè ghjuntu, per l'articuli chì deve esse seccu, apre immediatamente a valvula di scarico per scaricate u vapore. Quandu a pressione torna à cero, rinfriscà naturalmente à 60 ° C è dopu apre a tapa per caccià l'articuli. S'ellu hè un articulu liquidu, ùn apre micca a valvula di scarico. A pignatta deve esse sguassata da a fonte di calore immediatamenti è permessa di rinfriscà naturalmente finu à chì a pressione torna à cero è a temperatura scende sottu à 60 ° C prima di apre a tapa per caccià u cuntenutu per prevene a decompressione brusca di u liquidu da ebullizione violenta o splusione di u cuntinuu.
(3) Segui i seguenti passi per aduprà u sterilizzatore à vapore di cooker à pressione horizontale:
①Close the pot door strettu, apre a valvula di ingressu di l'aria, introduce vapore in a mezzanine per preriscaldamentu, è l'aria fridda in a mezzanine serà scaricata automaticamente attraversu a barriera d'aria;
②Dopu chì l'interlayer righjunghji a temperatura predeterminata, apre a valvola di ingressu di l'aria di a camera di a pignatta, introduce u vapore in a camera di a pignatta, è l'aria fridda in a camera di a pignatta serà scaricata automaticamente attraversu l'arrestatore d'aria di a camera di pignata;
③Quandu a pressione è a temperatura in a camera di a pignatta righjunghjenu a pressione specificata, aghjustate a valvola di ingressu d'aria per mantene a constantità;
④ Raffreddate a temperatura naturalmente o artificialmente à 60 ℃ prima di apre a porta per caccià l'articuli. Ùn aduprate micca u metudu di scaricamentu rapidu di vapore per prevene una caduta di pressione brusca, ebollizione violenta di u liquidu o splusione di u cuntinuu;
⑤ Quandu si usa un prugramma automaticu - Sterilizzatore à vapore di pressione cuntrullata, dopu avè piazzatu l'articuli è chjusu a porta strettu, l'interruttore currispondente deve esse premutu secondu a categuria di l'articuli per chì a sterilizazione pò esse realizata automaticamente secondu e prucedure richieste. Durante a sterilizazione, l'instrumentu attaccatu deve esse usatu per registrà a temperatura è u tempu. Per riferimentu futuru, i requisiti di u funziunamentu deve esse strettamente in cunfurmità cù l'istruzzioni di u fabricatore;
5. Temperature è tempu di sterilizazione
(1) A temperatura di sterilizazione di u sterilizzatore di calore seccu hè 160 ℃, 1,5 ~ 2 h.
(2) Temperature di sterilizazione è tempu di sterilizzatore à vapore di pressione
Metudu di sterilizazione intermittenti
1. Metudu di sterilizazione:
Utilizà a sterilizazione di vapore senza pressione. Certi sustanzi sò facilmente distrutte da sterilizazione di vapore d'alta pressione, cusì stu metudu pò esse usatu per sterilizazione.
(1) Pone l'articuli per esse sterilizzati in a pignata, copre a tappa superiore, apre l'outlet di drenu, è sguassate l'acqua restante in a pignatta.
(2) Chiudere l'outlet di drenu, apre a porta di l'entrata di l'aria, è disinfettate per 10 à 20 minuti cum'è necessariu.
(3) Dopu chì a sterilizazione hè finita, chjude a porta di l'aria, pigliate l'articuli è aspittà per rinfriscà à a temperatura di l'ambienti, mette in una incubadora di 37 ° C per a notte, è cuntinueghja à sterilizà secondu u metudu sopra u ghjornu dopu. Fate questu trè volte per ottene u scopu di sterilizazione.
2. Cumu aduprà u serum coagulator:
Quandu u mediu di cultura cuntene ingredienti spiciali cum'è serum o ova, u calore altu distrughjerà i so nutrienti. Dunque, a bassa temperatura pò esse aduprata per coagulà u serum è ottene scopi di sterilizazione:
(1) Quandu s'utilice u serum sterilizatu da stu metudu à l'aliquota, l'operazione asettica deve esse strettamente seguita, è i testi è i piatti anu ancu esse sterilizzati prima di l'usu;
(2) Fate u mediu di cultura in una pendenza o una capa alta cum'è necessariu. Dopu avè aghjustatu abbastanza acqua, cunnetta l'alimentazione, elevà a temperatura à 75 ~ 90 ° C per una ora è poi sterilizà. Pone in un incubatore à 37 ° C per a notte, è poi sterilizà trè volte.
3. Foglie è disinfettate:
Pudete aduprà una pignatta o un sterilizzatore di ebollizione. Dopu chì l'acqua fogghi, bollite per 5 à 15 minuti. Pudete ancu aghjunghje l'acidu carbolic 2% à l'acqua è fogghiu durante 5 minuti. Aghjunghjite 0,02% di formaldehyde è bolle à 80 ° C per 60 minuti per ottene u scopu di sterilizazione. In ogni casu, a sterilizazione di ebollizione pò esse ottenuta. Quandu si usanu enhancers, l'attenzione deve esse pagata à a corrosività di l'articuli.
4. Trattamentu di sterilizazione:
Dopu a sterilizazione, l'articuli sò digià sterili in circustanze normale. Anu da esse inspeccionati cù cura è posti quandu sò stati fora di u sterilizzatore per evità a contaminazione;
(1) Pigliate l'articuli è verificate immediatamente l'integrità di l'imballu. Se ci hè danni o u tampon hè eliminatu, ùn pò micca esse usatu cum'è articuli sterili;
(2) L'articuli catturati ùn ponu micca esse usatu cum'è articuli sterili se u so imballaggio hè ovviamente imbiccu in acqua;
(3) U mediu di cultura o reagenti deve esse verificatu per vede s'ellu si ncontranu u culore o u statu dopu a sterilizazione. Quelli chì ùn rispondenu micca à i requisiti deve esse scartati;
(4) Per i cuntenituri aperti - chjusi, i buchi di u screnu duveranu esse chjusi quandu si piglianu fora;
(5) Se l'articuli sguassati cascanu à a terra, sò misplaced in un locu impuru, o sò macchiati d'acqua, sò cunsiderati contaminati è ùn ponu micca esse usatu cum'è articuli sterili;
(6) L'articuli sterilizzati qualificati pigliati deve esse guardati in a stanza di magazzini o in un armariu à prova di polvera, è hè strettamente pruibitu di mischjà cù articuli micca sterilizzati;
(7) Tutti l'articuli qualificati devenu esse marcati cù a data di sterilizazione è a data di scadenza;
(8) Dopu chì ogni batch di prucessu di sterilizazione hè cumpletu, scrivite u nome, a quantità, a temperatura, u tempu è l'operatore di i prudutti sterilizzati.
Requisiti per u trattamentu di i rifiuti tossichi è bacteriali
L'equipaggiu sperimentale è i culturi utilizati in esperimenti microbiologichi ùn deve micca esse cacciatu da u laboratoriu senza disinfettazione.
1. I materiali cuntaminati cultivati è i rifiuti deve esse posti in cuntenituri stretti o cesti di filu è almacenati cintrali in lochi designati finu à ch'elli sò uniformi autoclaved.
2. I culturi contaminati da i microorganismi devenu esse autoclavati à 121 ° C per 30 minuti.
3. Dopu à l'usu, i paglia contaminati deve esse posti in una solu suluzione di sapone di 5% o una suluzione di l'acidu carbulicu, imbulighjate per almenu 24 ore (u liquidu disinfettante ùn deve esse più bassu di l'altitudine di soaking), è dopu sterilizatu da alta pressione à 121 ° C per 30 minuti.
4. U liquidu per staining and rinsing smears pò generalmente esse lavatu direttamente in a fossa. U fluidu di rinfurzà per i battìri virulenti deve esse lavatu in un beaker è sterilizatu da alta pressione prima di versà in a fossa. I vetri macchiati sò messi in una soluzione di sapone di cresol 5%. Dopu à 24 ore in acqua, fogghiu è lavà. I vetri o i piatti usati per a prova di agglutinazione deve esse autoclavati è poi lavati.
5. Dopu avè rottu a cultura, spruzzate subitu è imbulighjate e parti cuntaminate cù una suluzione di sapone di cresol 5% o una suluzione di l'acidu carbulicu, immergete per una meza ora è poi pulisce.
A robba di travagliu cuntaminata o vestiti di travagliu, tappi, maschere, etc., purtati per teste viulenti, deve esse posti in sacchetti di disinfezione speciale è sterilizzati da alta pressione prima di esse lavati.
Esigenze di preparazione media
A qualità di a preparazione di u mediu di cultura affettarà direttamente a crescita di i microorganismi, perchè diversi microorganismi anu diverse esigenze nutrizionali è diversi scopi di cultura. I requisiti di preparazione per i diversi media di cultura sò i seguenti:
1. Pisà l'ingredienti secondu a formula media, è dopu dissolve in acqua distillata. A qualità di i reagenti applicati è di e droghe deve esse inspeccionate prima di l'usu.
2. A misurazione di u pH è l'ajustamentu: a misurazione di u pH deve esse realizatu quandu u mediu di cultura hè rinfriscatu à a temperatura di l'ambienti, perchè ci hè una certa diferenza di pH in cundizioni calde o friddi. Quandu a misurazione hè cumpleta, aghjunghje alkali o acidu secondu a quantità calculata è mischjà bè. Si deve esse pruvatu di novu. U valore di pH di u mediu di cultura deve esse precisu, altrimenti affettarà u crescita di i microorganismi o affettanu l'osservazione di i risultati. In ogni casu, deve esse nutatu chì l'high-pressure sterilization pò influenzà a diminuzione o l'aumentu di u pH di certi media di cultura, per quessa ùn hè micca cunsigliatu di sterilizà à una pressione troppu alta o troppu volte per evitari di affettà a qualità di u mediu di cultura. Indicatori, sodium deoxycholate, agar, etc. sò generalmente aghjunghje dopu à aghjustà u pH.
3. U mediu di cultura deve esse guardatu chjaru per facilità l'observazione di a crescita bacteriana. Dopu chì u mediu di cultura hè calda è bollita, pò esse filtrata cù cuttuni assorbenti o flanella per sguassà u sedimentu. Se necessariu, pò esse clarificatu cù u biancu d'ova. E strisce di agar aduprate devenu esse lavate è secche in anticipu. Prima di l'usu, evite affettà a trasparenza per impurità in l'agar.
4. Ferru, ramu è altri cuntenituri ùn deve esse usatu per mantene u mediu di cultura. Hè megliu aduprà cuntenituri di vetru duru neutru puliti.
5. A sterilizazione di u mediu di cultura ùn deve micca solu ottene u scopu di sterilizazione cumpleta, ma ancu attente à ùn riduce u so valore nutrizionale per via di u riscaldamentu. In generale, 121 ° C per 15 minuti hè abbastanza. Per i medii di cultura chì cuntenenu sustanzi chì sò intolleranti à u calore elevatu, cum'è zuccheri è serum , gelatina, etc., deve esse sterilizzati da a temperatura bassa o un metu intermittenti. Certi reagenti chì ùn pò micca esse riscaldatu, cum'è u tellurite di potasio, u viulinu d'ova, TTC, antibiotici, etc., deve esse rinfriscati à circa 50 ° C dopu chì l'agar di basa hè autoclavatu è dopu aghjustatu;
6. Dopu chì ogni batch of culture media hè preparatu, deve esse realizatu un test di crescita sterile è un test di crescita di i ceppi pruvati. S'ellu hè un mediu di cultura biochimica, utilizate ceppi batterichi standard per inoculazione è cultura, è osservate i risultati di a reazione biochimica. Duverebbe mostra una reazione normale. U mediu di cultura ùn deve esse guardatu per troppu longu. In casu di necessariu, pò esse guardatu in un frigorifero à 4 ° C.
7. At prisente, ci sò parechji tipi di media di cultura secca. Ogni batch deve aduprà ceppi standard per a prova di crescita o l'osservazione di a reazione biochimica. Diversi medii di cultura pò esse usatu solu dopu chì a prova di crescita di i ceppi currispondenti hè bona. I novi acquistati o secchi chì sò stati guardati per un bellu pezzu pò esse usatu. U pH di u mediu di cultura deve ancu esse misuratu quandu si preparanu, è a dosa è u metudu deve esse seguitu secondu l'urdinamentu di u produttu.
8. I reagenti chimichi, e cundizioni di sterilizazione, i risultati di a prova di crescita di strain, è u persunale di pruduzzione utilizatu in ogni batch di media di cultura preparatu deve esse arregistrati per inchiesta.
Esigenze di raccolta di campioni è di trasfurmazioni
1. I campioni d'ispezione cullati devenu esse rappresentanti. Quandu u campionamentu, a materia prima, u trasfurmazioni, u trasportu, i metudi di almacenamento è e cundizioni di u batch of food, e cundizioni di salute ambientale circundante, etc. deve esse investigatu in dettagliu per verificà s'ellu ci sò fonti di contaminazione.
2. Sicondu u tipu è a quantità di l'alimentu, a quantità è u metudu di campionamentu deve esse realizatu in cunfurmità cù i requisiti di i metudi di ispezione standard.
3. Prestate attenzione à u funziunamentu asepticu quandu u sampling, è u cuntinuu deve esse sterilizatu per evità a contaminazione microbiana in l'ambiente. U cuntinuu ùn deve esse sterilizatu cù suluzione di sapone creosal, sterilizazione cù chlormethionine, alcolu è altri disinfettanti, è ùn deve micca cuntene tali disinfettanti o antibiotici. Per evitari di tumbà i microorganismi in a mostra, i forbici, i culteddi è i cucchiai utilizati anu ancu esse sterilizzati prima di l'usu.
4. I campioni devenu esse mandati à a sala d'ispezione per l'ispezione immediatamente dopu a cullizzioni. U prucessu d'ispezione generalmente ùn supera micca 3 ore. Se a distanza hè longa, pò esse guardatu in un ambiente di 1 ~ 5 ℃. S'ellu deve esse congelatu, deve esse guardatu in un statu congelatu. Mandate per l'ispezione.
5. Dopu avè ricivutu a mostra, a sala di ispezione l'arregistrarà (nome di mostra, unità per l'ispezione, quantità, data, numeru, etc.) è osservate l'aspettu di a mostra. Se si trova una di e seguenti cundizioni, l'ispezione pò esse rifiutata:
(1) I campioni chì sò stati sterilizzati da alta pressione speciale, bolle o altri metudi perderanu u so significatu in rapprisintà l'alimentu originale;
(2) I buttigli è i sacchetti di l'alimentariu sò stati aperti, a carne cotta è i so prudutti, u pollame cottu è altri alimenti sò stati rotti è incompleti, vale à dì, a forma originale di l'alimentu hè stata persa (eccettu per i campioni di avvelenamentu alimentari);
(3) A quantità di campionamentu hè insufficiente cum'è necessariu;
Per i campioni sottumessi à l'ispezione chì rispondenu à i requisiti, a sala d'ispezione duverà immediatamente fà l'ispezione dopu avè ricivutu. Se e cundizioni ùn sò micca scontri, anu da esse guardatu in un frigorifico di 4 ° C, preparate per creà e cundizioni in u tempu, è poi cunduce l'ispezione.
6. Quandu inspeccione i campioni, eseguite un prucessu adattatu secondu e so diverse proprietà.
(1) Quandu inoculate i campioni di liquidu, anu da esse mischiati bè è inoculati secondu a quantità.
(2) Per i campioni solidi, aduprate un cuteddu sterilizatu per cut out 25g di diverse parti, mette in 225mL di saline sterilizzate o altre suluzione, sfracicà è mischjà cun un homogenizer, è inoculate secondu a quantità.
(3) I buttigli è i sacchetti di manciari deve esse aperti da a sterilizazione, è i metudi di sopra deve esse sceltu secondu e caratteristiche prima di inoculazione.
Esigenze di ispezione, registrazione è rapportu di campioni
1. Dopu avè ricivutu a mostra, a sala d'ispezione prima cunducerà una ispezione di l'apparenza è prontu cunducerà l'ispezione in cunfurmità cù i metudi d'ispezione standard naziunali. Durante u prucessu d'ispezione, l'operazioni asettiche deve esse realizatu cù cura, rispunsabilità è strettamente per evitàu risultatu di a prova microbianacontaminazione in l'ambiente.
2. I metudi utilizati durante u prucessu d'ispezione di mostra, i fenomeni è i risultati chì sò accaduti, etc., deve esse scritti in registri di teste scritte cum'è una basa per l'analisi è u ghjudiziu di i risultati. I registri devenu esse dettagliati, chjaru, autentici, oggettivi, è ùn deve esse micca alterati o falsificati.
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