خلاصه ای از الزامات آزمایش میکروبیولوژیکی
2024-01-24 15:14:33
الزامات و مراحل برایتست میکروبیولوژیکیبه شرح زیر می باشند:
الزامات عملیات آسپتیک:
1. هنگام تلقیح باکتری باید لباس کار و کلاه کار بپوشید.
2. هنگام تلقیح نمونه های غذا باید از لباس کار، کلاه و دمپایی مخصوص استفاده شود که باید در بافر اتاق استریل قرار داده شود و پس از ضدعفونی UV قبل از کار استفاده شود.
3. هنگام تلقیح نمونه های غذا، قبل از ورود به اتاق استریل دست های خود را با صابون بشویید و سپس با پنبه 75 درصد الکل دست های خود را تمیز کنید.
4. نی ها، ظروف تخت و محیط های کشت مورد استفاده برای تلقیح باید استریل و استریل شوند. ظروف بدون استفاده نباید پس از باز کردن بسته بدون استفاده رها شوند. ظروف فلزی باید قبل از استفاده سه بار با الکل 95 درصد اتوکلاو شده یا بسوزانند.
5. هنگام بیرون آوردن نی از بسته بندی، نوک نی نباید به قسمت های باز شده برخورد کند. هنگام استفاده از نی برای تلقیح لوله آزمایش یا صفحه، نوک نی نباید لبه لوله آزمایش یا صفحه را لمس کند.
6. تلقیح نمونه ها و انتقال باکتری باید در مقابل لامپ الکلی انجام شود. هنگام تلقیح باکتری ها یا نمونه ها، نی باید پس از خارج کردن از بسته بندی و باز کردن درب لوله آزمایش با شعله استریل شود.
7. قبل از تلقیح باکتری باید تمام سیم های فلزی حلقه و سوزن تلقیح با شعله سوزانده شود و در صورت نیاز محل اتصال حلقه، سوزن و میله سوزانده شود. حلقه تلقیح برای تلقیح باکتری های سل و باکتری های بدخیم باید به مدت 5 دقیقه در آب جوش جوشانده شود و سپس با شعله سوزانده شود.
8. هنگام مکیدن مایع یا نمونه های باکتریایی با نی، از نوک لاستیکی مربوطه برای مکیدن آن استفاده کنید و مستقیماً آن را با دهان مک نکنید.
الزامات استفاده از اتاق استریل:
1. پنجره های منتهی به بیرون اتاق استریل باید دوجداره و آب بندی شوند. آنها نباید به میل خود باز شوند. باید یک اتاق بافر و درب کشویی متناسب با اندازه اتاق استریل وجود داشته باشد. همچنین باید یک پنجره کوچک از 0.5 ~ 0.7m2 وجود داشته باشد. در آمادگی برای عبور اقلام پس از ورود به اتاق استریل.
2. اتاق استریل باید تمیز نگه داشته شود. پس از کار باید با محلول صابون کرزول 2 تا 3 درصد ضدعفونی شود، سطح کار پاک شود و اقلام غیرمرتبط با آزمایش نگهداری نشود.
3. درب اتاق استریل قبل و بعد از استفاده باید محکم بسته شود و لامپ فرابنفش روشن شود. اگر از یک لامپ ماوراء بنفش معلق داخلی برای ضدعفونی استفاده می شود، یک لامپ فرابنفش 30 وات مورد نیاز است. فاصله 1.0 متر است و زمان تابش کمتر از 30 دقیقه نیست. هنگام استفاده از لامپ های ماوراء بنفش، باید توجه داشت که مستقیماً زیر نور ماوراء بنفش کار کند تا از آسیب جلوگیری شود. لامپ باید هر دو هفته یکبار به آرامی با پنبه الکلی پاک شود تا گرد و غبار و چربی پاک شود تا تاثیر نفوذ اشعه ماوراء بنفش کاهش یابد.
4. هنگام پردازش و تلقیح نمونه های غذایی، برای عمل وارد اتاق استریل شوید و اجازه ورود یا خروج به دلخواه را ندارید. در صورت نیاز به انتقال اقلام، می توان آنها را از پنجره کوچک عبور داد.
5. در صورت نیاز به نصب تهویه مطبوع در اتاق استریل، باید یک دستگاه فیلتر وجود داشته باشد.
الزامات ضد عفونی و استریلیزاسیون
ظروف شیشه ای، ظروف فلزی و محیط های کشت مورد استفاده برایتست میکروبیولوژیکی، کشت های آلوده و تلقیح شده و غیره باید قبل از استفاده استریل شوند. روشهای استریلسازی بخار با حرارت خشک و حرارت مرطوب.
1. آماده سازی قبل از عقیم سازی
(1) تمام مواردی که نیاز به استریل شدن دارند باید ابتدا شسته و خشک شوند. ظروف شیشه ای مانند نی و ظروف صاف باید با کاغذ بسته بندی شوند. در صورت استفاده از لوله های فلزی باید سوراخ های تهویه روی آنها باز شود.
(2) درپوش فلاسک مثلثی حاوی محیط کشت را در کاغذ بپیچید، لوله آزمایش را بپوشانید و هسته سرنگ را بیرون بکشید و آن را با گاز بپیچید.
2. نصب کنید
(1) استریل کننده حرارت خشک: اقلام نباید بیش از حد شلوغ باشند و نمی توانند چهار دیواره جعبه را لمس کنند.
(2) بخارپز بزرگ با فشار بالا: اقلام استریل شده را قرار دهید، آنها را جداگانه بپیچید و مستقیماً در سیلندر استریلیزاسیون قرار دهید. وسایل را بیش از حد شلوغ نکنید.
3. بازرسی تجهیزات
(1) بررسی کنید که آیا سوئیچ درب انعطاف پذیر است، آیا حلقه لاستیکی آسیب دیده است و آیا صاف است یا خیر.
(2) بررسی کنید که آیا فشار سنج هنگام تخلیه بخار در موقعیت صفر باقی می ماند، درب و پوشش را ببندید، بخار یا گرما را تهویه کنید، و مشاهده کنید که آیا نشتی هوا وجود دارد، آیا شرایط مشخص شده توسط فشارسنج و دماسنج مطابقت دارند، و آیا خط لوله مسدود شده است یا خیر.
(3) برای استریل کننده هایی با دستگاه های کنترل خودکار برنامه الکترونیکی، برنامه مشخص شده باید قبل از استفاده بررسی شود تا ببینیم که آیا الزامات استریلیزاسیون را برآورده می کند یا خیر.
4. درمان عقیم سازی
(1) روش استریلیزاسیون با حرارت خشک:
این روش برای اقلامی که در شرایط گرمای خشک آسیب نمی بینند، خراب نمی شوند یا تبخیر نمی شوند، مناسب است. بیشتر برای استریل کردن ظروف شیشه ای، محصولات فلزی، محصولات سرامیکی و غیره استفاده می شود.
①ابزار و ظروف باید قبل از خشک شدن شسته شوند تا از کربن شدن کثیفی های چسبیده به سطح جلوگیری شود.
② در طول استریل کردن، اقلام نباید بیش از حد شلوغ باشند، مستقیماً با پایین و دیوار جعبه تماس نگیرید و بین اقلام فاصله ایجاد کنید.
③ در حین استریل کردن، در را محکم ببندید، منبع تغذیه را وصل کنید، سوراخ خروجی اگزوز را حدود 30 دقیقه باز کنید تا هوای سرد در استریلیزر خارج شود، چراغ نشانگر را هنگامی که دما به 160 درجه سانتیگراد افزایش یافت، تنظیم کنید و آن را برای 1.5 تا 2 ساعت نگه دارید.
④بعد از اتمام استریلیزاسیون یا طی فرآیند افزایش دما، درب باید در دمای زیر 60 درجه سانتی گراد باز شود.
(2) هنگام استفاده از زودپز قابل حمل یا استریل کننده بخار فشار عمودی باید مراحل زیر را دنبال کنید:
① 3 لیتر آب به بدنه اصلی زودپز قابل حمل و 16 لیتر آب به زودپز عمودی اضافه کنید (مقدار آب باید در صورت استفاده مجدد دوباره پر شود و در صورت کدر شدن آب باید تعویض شود).
② برای یک زودپز قابل حمل، لوله اگزوز را در پوشش بالایی داخل لوله مربعی روی دیواره داخلی بشکه استریلیزاسیون قرار دهید (استریل کننده های بدون شیلنگ یا آنهایی که شیلنگ های خورده و ترک خورده دارند نباید استفاده شوند).
③ پوشش بالایی را بپوشانید و آن را محکم ببندید تا از نشت هوا جلوگیری شود. استریل کننده را روی منبع آتش قرار دهید تا گرم شود، برق زودپز عمودی را روشن کنید و دریچه خروجی درپوش بالایی را باز کنید تا هوا خارج شود (هوای خروجی به مدت 10 تا 15 دقیقه پس از جوش آمدن آب) .
④سوپاپ اگزوز را ببندید تا فشار بخار را تا حد نیاز مشخص شده افزایش دهید و آن را برای مدت زمان مشخص حفظ کنید (بسته به ماهیت اقلام استریل شده و شرایط مربوطه).
⑤ پس از رسیدن به زمان مشخص شده، برای مواردی که باید خشک شوند، فوراً دریچه اگزوز را باز کنید تا بخار تخلیه شود. وقتی فشار به صفر رسید، آن را به طور طبیعی تا دمای 60 درجه سانتی گراد خنک کنید و سپس درب آن را باز کنید تا اقلام خارج شوند. اگر ماده مایع است، دریچه اگزوز را باز نکنید. دیگ را باید فوراً از منبع حرارت خارج کنید و بگذارید تا به طور طبیعی خنک شود تا فشار به صفر برگردد و دما به زیر 60 درجه سانتیگراد برسد قبل از اینکه درب آن را باز کنید تا محتویات آن خارج شود تا از فشرده شدن ناگهانی مایع در اثر جوشیدن شدید یا انفجار ظرف جلوگیری شود.
(3) مراحل زیر را برای استفاده از دستگاه ضدعفونی کننده بخار زودپز افقی دنبال کنید:
①درب قابلمه را محکم ببندید، دریچه ورودی هوا را باز کنید، بخار را برای پیش گرم کردن به نیم طبقه وارد کنید، و هوای سرد در نیم طبقه به طور خودکار از طریق مانع هوا تخلیه می شود.
②بعد از اینکه لایه میانی به دمای از پیش تعیین شده رسید، دریچه ورودی هوای محفظه دیگ را باز کنید، بخار را وارد محفظه دیگ کنید و هوای سرد در محفظه دیگ به طور خودکار از طریق برقگیر محفظه دیگ تخلیه می شود.
③ وقتی فشار و دما در محفظه دیگ به فشار مشخص شده رسید، شیر ورودی هوا را تنظیم کنید تا ثابت بماند.
④ قبل از باز کردن درب برای بیرون آوردن اقلام، دما را به طور طبیعی یا مصنوعی تا 60 درجه سانتیگراد خنک کنید. از روش تخلیه سریع بخار برای جلوگیری از افت فشار ناگهانی، جوشیدن شدید مایع یا انفجار ظرف استفاده نکنید.
⑤ هنگام استفاده از دستگاه استریل کننده بخار با فشار کنترل شده با برنامه اتوماتیک، پس از قرار دادن اقلام و بستن درب، باید سوئیچ مربوطه را با توجه به دسته بندی اقلام فشار دهید تا استریلیزاسیون به طور خودکار طبق مراحل مورد نیاز انجام شود. در طول استریل کردن، ابزار متصل باید برای ثبت دما و زمان استفاده شود. برای مراجع بعدی، الزامات عملیاتی باید کاملاً مطابق با دستورالعمل های سازنده باشد.
5. درجه حرارت و زمان عقیم سازی
(1) دمای ضدعفونی کننده ضدعفونی کننده حرارت خشک 160 ℃، 1.5 ~ 2 ساعت است.
(2) دمای استریلیزاسیون و زمان استریل کننده بخار فشار
روش استریلیزاسیون متناوب
1. روش عقیم سازی:
از استریلیزاسیون با بخار بدون فشار استفاده کنید. برخی از مواد به راحتی با استریلیزاسیون بخار با فشار بالا از بین می روند، بنابراین می توان از این روش برای استریل کردن استفاده کرد.
(1) اقلامی را که قرار است استریل شوند در گلدان قرار دهید، درب بالایی را بپوشانید، خروجی تخلیه را باز کنید و آب باقیمانده در گلدان را تخلیه کنید.
(2) خروجی تخلیه را ببندید، درب ورودی هوا را باز کنید و در صورت نیاز به مدت 10 تا 20 دقیقه ضدعفونی کنید.
(3) پس از اتمام استریل کردن، درب ورودی هوا را ببندید، اقلام را خارج کرده و صبر کنید تا تا دمای اتاق خنک شوند، آنها را یک شب در انکوباتور با دمای 37 درجه سانتیگراد قرار دهید و روز بعد به روش فوق به استریل کردن ادامه دهید. این کار را سه بار انجام دهید تا به هدف عقیم سازی برسید.
2. نحوه استفاده از منعقد کننده سرم:
زمانی که محیط کشت حاوی مواد خاصی مانند سرم یا تخم مرغ باشد، حرارت زیاد باعث از بین رفتن مواد مغذی آن می شود. بنابراین می توان از دمای پایین برای انعقاد سرم و دستیابی به اهداف استریلیزاسیون استفاده کرد:
(1) هنگام استفاده از سرم استریل شده با این روش به مقدار کافی، عملیات آسپتیک باید به شدت دنبال شود، و لوله های آزمایش و صفحات نیز باید قبل از استفاده استریل شوند.
(2) محیط کشت را در صورت نیاز به یک لایه شیب دار یا بلند تبدیل کنید. پس از افزودن آب کافی، منبع تغذیه را وصل کنید، دما را به 75 تا 90 درجه سانتیگراد به مدت یک ساعت افزایش دهید و سپس آن را استریل کنید. آن را به مدت یک شب در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد قرار دهید و سپس آن را سه بار استریل کنید.
3. جوشانده و ضد عفونی کنید:
می توانید از دیگ جوش یا استریل کننده در حال جوش استفاده کنید. پس از به جوش آمدن آب، آن را به مدت 5 تا 15 دقیقه بجوشانید. همچنین می توانید اسید کربولیک 2 درصد را به آب اضافه کنید و به مدت 5 دقیقه بجوشانید. 0.02% فرمالدئید را اضافه کرده و در دمای 80 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه بجوشانید تا به هدف استریلیزاسیون برسید. با این حال، عقیم سازی جوشان را می توان به دست آورد. هنگام استفاده از تقویت کننده ها باید به خورندگی اقلام توجه شود.
4. درمان عقیم سازی:
پس از عقیم سازی، اقلام در شرایط عادی از قبل استریل می شوند. آنها باید به دقت بازرسی شوند و هنگام خارج شدن از دستگاه استریلیزر قرار گیرند تا از آلودگی مجدد جلوگیری شود.
(1) اقلام را خارج کنید و فوراً یکپارچگی بسته بندی را بررسی کنید. اگر آسیبی وجود داشته باشد یا تامپون برداشته شود، نمی توان از آن به عنوان اقلام استریل استفاده کرد.
(2) اقلام خارج شده را نمی توان به عنوان اقلام استریل استفاده کرد اگر بسته بندی آنها آشکارا در آب خیس شده باشد.
(3) محیط کشت یا معرف ها باید بررسی شوند تا ببینیم که آیا رنگ یا حالت آنها پس از استریلیزاسیون مطابقت دارد یا خیر. آنهایی که شرایط لازم را ندارند باید کنار گذاشته شوند.
(4) برای باز و بسته کردن ظروف، سوراخ های صفحه باید هنگام بیرون آوردن آنها بسته شود.
(5) اگر اقلام برداشته شده به زمین بیفتد، یا در جای نجس قرار گیرد یا با آب آغشته شود، آلوده محسوب می شود و نمی توان از آن به عنوان اقلام استریل استفاده کرد.
(6) اقلام استریل شده واجد شرایط خارج شده باید در اتاق ذخیره یا کابینت ضد گرد و غبار نگهداری شوند و مخلوط کردن آنها با اقلام استریل نشده اکیداً ممنوع است.
(7) تمام اقلام واجد شرایط باید با تاریخ عقیم سازی و تاریخ انقضا علامت گذاری شوند.
(8) پس از تکمیل هر دسته از پردازش استریل، نام، مقدار، دما، زمان و اپراتور محصولات استریل شده را ثبت کنید.
الزامات برای تصفیه زباله های سمی و باکتریایی
تجهیزات آزمایشی و کشت های مورد استفاده در آزمایش های میکروبیولوژیکی نباید بدون ضدعفونی از آزمایشگاه خارج شوند.
1. مواد و ضایعات آلوده کشت شده باید در ظروف محکم یا سبدهای سیمی قرار داده شوند و تا زمانی که بطور یکنواخت اتوکلاو شوند، در مکانهای مشخص شده در مرکز نگهداری شوند.
2. کشت های آلوده به میکروارگانیسم ها باید به مدت 30 دقیقه در دمای 121 درجه سانتی گراد اتوکلاو شوند.
3. پس از استفاده، نی های آلوده را باید در محلول 5 درصد صابون کرئول یا محلول اسید کربولیک قرار داده و حداقل 24 ساعت خیس کرد (مایع ضدعفونی کننده نباید کمتر از ارتفاع خیساندن باشد) و سپس با فشار بالا در دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 30 دقیقه استریل شود.
4. مایع برای لکه گیری و شستشوی اسمیر به طور کلی می تواند مستقیماً در فاضلاب ریخته شود. مایع شستشو برای باکتری های بدخیم باید قبل از ریختن در فاضلاب در یک لیوان شسته شده و با فشار بالا استریل شود. اسلایدهای رنگ آمیزی شده در محلول صابون کرزول 5 درصد قرار می گیرند. پس از 24 ساعت خیساندن در آب، بجوشانید و بشویید. اسلایدها یا ظروف مورد استفاده برای آزمایش آگلوتیناسیون باید اتوکلاو شده و سپس شسته شوند.
5. پس از شکستن کشت، فوراً قسمت های آلوده را با محلول صابون کرزول 5 درصد یا محلول اسید کربولیک خیس کنید و نیم ساعت خیس کنید و سپس پاک کنید.
لباس کار یا لباس کار آلوده، کلاه، ماسک و غیره که برای آزمایش های خشونت آمیز استفاده می شود باید در کیسه های ضد عفونی مخصوص قرار داده شود و قبل از شستن با فشار بالا استریل شود.
الزامات آماده سازی متوسط
کیفیت آماده سازی محیط کشت مستقیماً بر رشد میکروارگانیسم ها تأثیر می گذارد، زیرا میکروارگانیسم های مختلف نیازهای تغذیه ای متفاوت و اهداف کشت متفاوتی دارند. شرایط آماده سازی محیط های کشت مختلف به شرح زیر است:
1. مواد را مطابق فرمول متوسط وزن کرده و سپس در آب مقطر حل کنید. قبل از استفاده باید کیفیت معرف ها و داروها مورد بررسی قرار گیرد.
2. اندازه گیری و تنظیم pH: اندازه گیری pH باید زمانی انجام شود که محیط کشت تا دمای اتاق خنک شود، زیرا در شرایط سرد یا گرم تفاوت خاصی در pH وجود دارد. وقتی اندازه گیری تمام شد، قلیایی یا اسید را با توجه به مقدار محاسبه شده اضافه کنید و خوب مخلوط کنید. باید دوباره تست بشه مقدار pH محیط کشت باید دقیق باشد، در غیر این صورت بر رشد میکروارگانیسم ها تأثیر می گذارد یا روی مشاهده نتایج تأثیر می گذارد. با این حال، باید توجه داشت که استریلیزاسیون با فشار بالا میتواند بر کاهش یا افزایش pH برخی از محیطهای کشت تأثیر بگذارد، بنابراین برای جلوگیری از تأثیرگذاری بر کیفیت محیط کشت، استریل کردن در فشار زیاد یا بارها توصیه نمیشود. اندیکاتورها، سدیم دی اکسی کولات، آگار و غیره به طور کلی پس از تنظیم pH آن را اضافه کنید.
3. برای تسهیل مشاهده رشد باکتری، محیط کشت باید شفاف باشد. پس از گرم شدن و جوشاندن محیط کشت، می توان آن را با پنبه یا فلانل جاذب فیلتر کرد تا رسوبات خارج شود. در صورت لزوم، می توان آن را با سفیده تخم مرغ روشن کرد. نوارهای آگار استفاده شده باید از قبل شسته و خشک شوند. قبل از استفاده، به دلیل ناخالصی های موجود در آگار، شفافیت را تحت تأثیر قرار دهید.
4. برای نگهداری محیط کشت نباید از ظروف آهنی، مسی و سایر ظروف استفاده شود. بهتر است از ظروف شیشه ای تمیز خنثی و سخت استفاده کنید.
5. استریل کردن محیط کشت نه تنها باید به هدف استریل کردن کامل برسد، بلکه باید توجه داشت که ارزش غذایی آن در اثر حرارت دادن کاهش نیابد. به طور کلی دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه کافی است. برای محیط های کشت حاوی موادی که نسبت به حرارت بالا تحمل نمی کنند مانند قندها و سرم، ژلاتین و غیره باید با دمای پایین یا روش متناوب استریل شوند. برخی از معرفهایی که نمیتوان آنها را حرارت داد، مانند تلوریت پتاسیم، زرده تخم مرغ، TTC، آنتیبیوتیکها و غیره، پس از اتوکلاو شدن آگار پایه باید تا حدود 50 درجه سانتیگراد خنک شوند و سپس اضافه شوند.
6. پس از تهیه هر دسته از محیط های کشت، آزمایش رشد استریل و آزمایش رشد سویه های مورد آزمایش باید انجام شود. اگر محیط کشت بیوشیمیایی است، از سویه های باکتریایی استاندارد برای تلقیح و کشت استفاده کنید و نتایج واکنش بیوشیمیایی را مشاهده کنید. باید یک واکنش طبیعی نشان دهد. محیط کشت نباید برای مدت طولانی نگهداری شود. در صورت لزوم می توان آن را در یخچال 4 درجه سانتی گراد نگهداری کرد.
7. در حال حاضر، انواع مختلفی از محیط های کشت خشک وجود دارد. هر دسته باید از سویه های استاندارد برای آزمایش رشد یا مشاهده واکنش های بیوشیمیایی استفاده کند. محیط های کشت مختلف تنها پس از خوب بودن آزمایش رشد سویه های مربوطه قابل استفاده است. می توان از انواع تازه خریداری شده یا خشک شده که مدت زیادی نگهداری شده اند استفاده کرد. PH محیط کشت نیز هنگام تهیه آن باید اندازه گیری شود و دوز و روش آن طبق دستورالعمل محصول رعایت شود.
8. معرف های شیمیایی، شرایط استریلیزاسیون، نتایج آزمایش رشد سویه و پرسنل تولیدی که در هر دسته از محیط های کشت آماده شده استفاده می شود باید برای بررسی ثبت شوند.
الزامات جمع آوری و پردازش نمونه
1. نمونه های بازرسی جمع آوری شده باید معرف باشد. هنگام نمونه برداری، مواد خام، فرآوری، حمل و نقل، روش ها و شرایط نگهداری دسته مواد غذایی، شرایط بهداشت محیط اطراف و غیره باید به طور دقیق بررسی شوند تا بررسی شود که آیا منابع آلودگی وجود دارد یا خیر.
2. با توجه به نوع و مقدار غذا، مقدار و روش نمونه برداری باید مطابق با الزامات روش های بازرسی استاندارد انجام شود.
3. در هنگام نمونه برداری به عملیات آسپتیک توجه کنید و ظرف باید استریل شود تا از آلودگی میکروبی در محیط جلوگیری شود. ظرف نباید با محلول صابون کرئوزال، استریل با کلرمتیونین، الکل و سایر مواد ضد عفونی کننده استریل شود و نباید حاوی چنین ضدعفونی کننده ها یا آنتی بیوتیک ها باشد. برای جلوگیری از کشتن میکروارگانیسم ها در نمونه، قیچی، چاقو و قاشق های استفاده شده نیز باید قبل از استفاده استریل شوند.
4. نمونه ها باید بلافاصله پس از جمع آوری برای بازرسی به اتاق بازرسی فرستاده شود. روند بازرسی معمولاً از 3 ساعت تجاوز نمی کند. اگر فاصله طولانی باشد، می توان آن را در یک محیط 1 تا 5 درجه سانتیگراد ذخیره کرد. در صورت نیاز به فریز کردن، باید در حالت یخ زده نگهداری شود. برای بازرسی ارسال کنید.
5. اتاق بازرسی پس از دریافت نمونه، آن را ثبت (نام نمونه، واحد بازرسی، مقدار، تاریخ، شماره و ...) و مشاهده ظاهر نمونه می کند. اگر هر یک از شرایط زیر یافت شود، بازرسی ممکن است رد شود:
(1) نمونه هایی که با فشار بالا، جوشاندن یا روش های دیگر استریل شده اند، اهمیت خود را در نمایش غذای اصلی از دست خواهند داد.
(2) بطری ها و کیسه های غذا باز شده، گوشت پخته شده و فرآورده های آن، مرغ پخته شده و سایر غذاها شکسته و ناقص است، یعنی شکل اصلی غذا از بین رفته است (به جز نمونه های مسمومیت غذایی).
(3) مقدار نمونه برداری در صورت نیاز کافی نیست.
برای نمونه های ارسال شده برای بازرسی که شرایط را برآورده می کنند، اتاق بازرسی باید بلافاصله پس از دریافت آنها، بازرسی را انجام دهد. در صورت عدم رعایت شرایط، باید آنها را در یخچال 4 درجه سانتیگراد نگهداری کرد، برای ایجاد شرایط به موقع آماده کرد و سپس بازرسی انجام داد.
6. هنگام بازرسی نمونه ها، پردازش مناسب را با توجه به خواص مختلف آنها انجام دهید.
(1) هنگام تلقیح نمونه های مایع، آنها باید کاملاً مخلوط شده و با توجه به مقدار تلقیح شوند.
(2) برای نمونه های جامد، از یک چاقوی استریل شده برای برش دادن 25 گرم از قسمت های مختلف استفاده کنید، آنها را در 225 میلی لیتر نمک استریل شده یا محلول های دیگر قرار دهید، خرد کرده و با هموژنایزر مخلوط کنید، و بر اساس مقدار تلقیح کنید.
(3) بطری ها و کیسه های غذا باید با استریل کردن باز شوند و روش های فوق باید با توجه به خصوصیات قبل از تلقیح انتخاب شوند.
نمونه مورد نیاز بازرسی، ثبت و گزارش
1. پس از دریافت نمونه، اتاق بازرسی ابتدا بازرسی ظاهری را انجام می دهد و به سرعت بازرسی را مطابق با روش های بازرسی استاندارد ملی انجام می دهد. در طی فرآیند بازرسی، عملیات آسپتیک باید با دقت، مسئولانه و به شدت انجام شود تا از جلوگیری شود.نتیجه آزمایش میکروبیآلودگی در محیط زیست
2. روش های مورد استفاده در فرآیند بازرسی نمونه، پدیده ها و نتایج رخ داده و غیره باید در سوابق آزمون کتبی به عنوان مبنایی برای تجزیه و تحلیل و قضاوت نتایج نوشته شود. سوابق باید دقیق، واضح، معتبر، عینی باشد و نباید تغییر یا جعل شود.
را
را
الزامات عملیات آسپتیک:
1. هنگام تلقیح باکتری باید لباس کار و کلاه کار بپوشید.
2. هنگام تلقیح نمونه های غذا باید از لباس کار، کلاه و دمپایی مخصوص استفاده شود که باید در بافر اتاق استریل قرار داده شود و پس از ضدعفونی UV قبل از کار استفاده شود.
3. هنگام تلقیح نمونه های غذا، قبل از ورود به اتاق استریل دست های خود را با صابون بشویید و سپس با پنبه 75 درصد الکل دست های خود را تمیز کنید.
4. نی ها، ظروف تخت و محیط های کشت مورد استفاده برای تلقیح باید استریل و استریل شوند. ظروف بدون استفاده نباید پس از باز کردن بسته بدون استفاده رها شوند. ظروف فلزی باید قبل از استفاده سه بار با الکل 95 درصد اتوکلاو شده یا بسوزانند.
5. هنگام بیرون آوردن نی از بسته بندی، نوک نی نباید به قسمت های باز شده برخورد کند. هنگام استفاده از نی برای تلقیح لوله آزمایش یا صفحه، نوک نی نباید لبه لوله آزمایش یا صفحه را لمس کند.
6. تلقیح نمونه ها و انتقال باکتری باید در مقابل لامپ الکلی انجام شود. هنگام تلقیح باکتری ها یا نمونه ها، نی باید پس از خارج کردن از بسته بندی و باز کردن درب لوله آزمایش با شعله استریل شود.
7. قبل از تلقیح باکتری باید تمام سیم های فلزی حلقه و سوزن تلقیح با شعله سوزانده شود و در صورت نیاز محل اتصال حلقه، سوزن و میله سوزانده شود. حلقه تلقیح برای تلقیح باکتری های سل و باکتری های بدخیم باید به مدت 5 دقیقه در آب جوش جوشانده شود و سپس با شعله سوزانده شود.
8. هنگام مکیدن مایع یا نمونه های باکتریایی با نی، از نوک لاستیکی مربوطه برای مکیدن آن استفاده کنید و مستقیماً آن را با دهان مک نکنید.
الزامات استفاده از اتاق استریل:
1. پنجره های منتهی به بیرون اتاق استریل باید دوجداره و آب بندی شوند. آنها نباید به میل خود باز شوند. باید یک اتاق بافر و درب کشویی متناسب با اندازه اتاق استریل وجود داشته باشد. همچنین باید یک پنجره کوچک از 0.5 ~ 0.7m2 وجود داشته باشد. در آمادگی برای عبور اقلام پس از ورود به اتاق استریل.
2. اتاق استریل باید تمیز نگه داشته شود. پس از کار باید با محلول صابون کرزول 2 تا 3 درصد ضدعفونی شود، سطح کار پاک شود و اقلام غیرمرتبط با آزمایش نگهداری نشود.
3. درب اتاق استریل قبل و بعد از استفاده باید محکم بسته شود و لامپ فرابنفش روشن شود. اگر از یک لامپ ماوراء بنفش معلق داخلی برای ضدعفونی استفاده می شود، یک لامپ فرابنفش 30 وات مورد نیاز است. فاصله 1.0 متر است و زمان تابش کمتر از 30 دقیقه نیست. هنگام استفاده از لامپ های ماوراء بنفش، باید توجه داشت که مستقیماً زیر نور ماوراء بنفش کار کند تا از آسیب جلوگیری شود. لامپ باید هر دو هفته یکبار به آرامی با پنبه الکلی پاک شود تا گرد و غبار و چربی پاک شود تا تاثیر نفوذ اشعه ماوراء بنفش کاهش یابد.
4. هنگام پردازش و تلقیح نمونه های غذایی، برای عمل وارد اتاق استریل شوید و اجازه ورود یا خروج به دلخواه را ندارید. در صورت نیاز به انتقال اقلام، می توان آنها را از پنجره کوچک عبور داد.
5. در صورت نیاز به نصب تهویه مطبوع در اتاق استریل، باید یک دستگاه فیلتر وجود داشته باشد.
الزامات ضد عفونی و استریلیزاسیون
ظروف شیشه ای، ظروف فلزی و محیط های کشت مورد استفاده برایتست میکروبیولوژیکی، کشت های آلوده و تلقیح شده و غیره باید قبل از استفاده استریل شوند. روشهای استریلسازی بخار با حرارت خشک و حرارت مرطوب.
1. آماده سازی قبل از عقیم سازی
(1) تمام مواردی که نیاز به استریل شدن دارند باید ابتدا شسته و خشک شوند. ظروف شیشه ای مانند نی و ظروف صاف باید با کاغذ بسته بندی شوند. در صورت استفاده از لوله های فلزی باید سوراخ های تهویه روی آنها باز شود.
(2) درپوش فلاسک مثلثی حاوی محیط کشت را در کاغذ بپیچید، لوله آزمایش را بپوشانید و هسته سرنگ را بیرون بکشید و آن را با گاز بپیچید.
2. نصب کنید
(1) استریل کننده حرارت خشک: اقلام نباید بیش از حد شلوغ باشند و نمی توانند چهار دیواره جعبه را لمس کنند.
(2) بخارپز بزرگ با فشار بالا: اقلام استریل شده را قرار دهید، آنها را جداگانه بپیچید و مستقیماً در سیلندر استریلیزاسیون قرار دهید. وسایل را بیش از حد شلوغ نکنید.
3. بازرسی تجهیزات
(1) بررسی کنید که آیا سوئیچ درب انعطاف پذیر است، آیا حلقه لاستیکی آسیب دیده است و آیا صاف است یا خیر.
(2) بررسی کنید که آیا فشار سنج هنگام تخلیه بخار در موقعیت صفر باقی می ماند، درب و پوشش را ببندید، بخار یا گرما را تهویه کنید، و مشاهده کنید که آیا نشتی هوا وجود دارد، آیا شرایط مشخص شده توسط فشارسنج و دماسنج مطابقت دارند، و آیا خط لوله مسدود شده است یا خیر.
(3) برای استریل کننده هایی با دستگاه های کنترل خودکار برنامه الکترونیکی، برنامه مشخص شده باید قبل از استفاده بررسی شود تا ببینیم که آیا الزامات استریلیزاسیون را برآورده می کند یا خیر.
4. درمان عقیم سازی
(1) روش استریلیزاسیون با حرارت خشک:
این روش برای اقلامی که در شرایط گرمای خشک آسیب نمی بینند، خراب نمی شوند یا تبخیر نمی شوند، مناسب است. بیشتر برای استریل کردن ظروف شیشه ای، محصولات فلزی، محصولات سرامیکی و غیره استفاده می شود.
①ابزار و ظروف باید قبل از خشک شدن شسته شوند تا از کربن شدن کثیفی های چسبیده به سطح جلوگیری شود.
② در طول استریل کردن، اقلام نباید بیش از حد شلوغ باشند، مستقیماً با پایین و دیوار جعبه تماس نگیرید و بین اقلام فاصله ایجاد کنید.
③ در حین استریل کردن، در را محکم ببندید، منبع تغذیه را وصل کنید، سوراخ خروجی اگزوز را حدود 30 دقیقه باز کنید تا هوای سرد در استریلیزر خارج شود، چراغ نشانگر را هنگامی که دما به 160 درجه سانتیگراد افزایش یافت، تنظیم کنید و آن را برای 1.5 تا 2 ساعت نگه دارید.
④بعد از اتمام استریلیزاسیون یا طی فرآیند افزایش دما، درب باید در دمای زیر 60 درجه سانتی گراد باز شود.
(2) هنگام استفاده از زودپز قابل حمل یا استریل کننده بخار فشار عمودی باید مراحل زیر را دنبال کنید:
① 3 لیتر آب به بدنه اصلی زودپز قابل حمل و 16 لیتر آب به زودپز عمودی اضافه کنید (مقدار آب باید در صورت استفاده مجدد دوباره پر شود و در صورت کدر شدن آب باید تعویض شود).
② برای یک زودپز قابل حمل، لوله اگزوز را در پوشش بالایی داخل لوله مربعی روی دیواره داخلی بشکه استریلیزاسیون قرار دهید (استریل کننده های بدون شیلنگ یا آنهایی که شیلنگ های خورده و ترک خورده دارند نباید استفاده شوند).
③ پوشش بالایی را بپوشانید و آن را محکم ببندید تا از نشت هوا جلوگیری شود. استریل کننده را روی منبع آتش قرار دهید تا گرم شود، برق زودپز عمودی را روشن کنید و دریچه خروجی درپوش بالایی را باز کنید تا هوا خارج شود (هوای خروجی به مدت 10 تا 15 دقیقه پس از جوش آمدن آب) .
④سوپاپ اگزوز را ببندید تا فشار بخار را تا حد نیاز مشخص شده افزایش دهید و آن را برای مدت زمان مشخص حفظ کنید (بسته به ماهیت اقلام استریل شده و شرایط مربوطه).
⑤ پس از رسیدن به زمان مشخص شده، برای مواردی که باید خشک شوند، فوراً دریچه اگزوز را باز کنید تا بخار تخلیه شود. وقتی فشار به صفر رسید، آن را به طور طبیعی تا دمای 60 درجه سانتی گراد خنک کنید و سپس درب آن را باز کنید تا اقلام خارج شوند. اگر ماده مایع است، دریچه اگزوز را باز نکنید. دیگ را باید فوراً از منبع حرارت خارج کنید و بگذارید تا به طور طبیعی خنک شود تا فشار به صفر برگردد و دما به زیر 60 درجه سانتیگراد برسد قبل از اینکه درب آن را باز کنید تا محتویات آن خارج شود تا از فشرده شدن ناگهانی مایع در اثر جوشیدن شدید یا انفجار ظرف جلوگیری شود.
(3) مراحل زیر را برای استفاده از دستگاه ضدعفونی کننده بخار زودپز افقی دنبال کنید:
①درب قابلمه را محکم ببندید، دریچه ورودی هوا را باز کنید، بخار را برای پیش گرم کردن به نیم طبقه وارد کنید، و هوای سرد در نیم طبقه به طور خودکار از طریق مانع هوا تخلیه می شود.
②بعد از اینکه لایه میانی به دمای از پیش تعیین شده رسید، دریچه ورودی هوای محفظه دیگ را باز کنید، بخار را وارد محفظه دیگ کنید و هوای سرد در محفظه دیگ به طور خودکار از طریق برقگیر محفظه دیگ تخلیه می شود.
③ وقتی فشار و دما در محفظه دیگ به فشار مشخص شده رسید، شیر ورودی هوا را تنظیم کنید تا ثابت بماند.
④ قبل از باز کردن درب برای بیرون آوردن اقلام، دما را به طور طبیعی یا مصنوعی تا 60 درجه سانتیگراد خنک کنید. از روش تخلیه سریع بخار برای جلوگیری از افت فشار ناگهانی، جوشیدن شدید مایع یا انفجار ظرف استفاده نکنید.
⑤ هنگام استفاده از دستگاه استریل کننده بخار با فشار کنترل شده با برنامه اتوماتیک، پس از قرار دادن اقلام و بستن درب، باید سوئیچ مربوطه را با توجه به دسته بندی اقلام فشار دهید تا استریلیزاسیون به طور خودکار طبق مراحل مورد نیاز انجام شود. در طول استریل کردن، ابزار متصل باید برای ثبت دما و زمان استفاده شود. برای مراجع بعدی، الزامات عملیاتی باید کاملاً مطابق با دستورالعمل های سازنده باشد.
5. درجه حرارت و زمان عقیم سازی
(1) دمای ضدعفونی کننده ضدعفونی کننده حرارت خشک 160 ℃، 1.5 ~ 2 ساعت است.
(2) دمای استریلیزاسیون و زمان استریل کننده بخار فشار
روش استریلیزاسیون متناوب
1. روش عقیم سازی:
از استریلیزاسیون با بخار بدون فشار استفاده کنید. برخی از مواد به راحتی با استریلیزاسیون بخار با فشار بالا از بین می روند، بنابراین می توان از این روش برای استریل کردن استفاده کرد.
(1) اقلامی را که قرار است استریل شوند در گلدان قرار دهید، درب بالایی را بپوشانید، خروجی تخلیه را باز کنید و آب باقیمانده در گلدان را تخلیه کنید.
(2) خروجی تخلیه را ببندید، درب ورودی هوا را باز کنید و در صورت نیاز به مدت 10 تا 20 دقیقه ضدعفونی کنید.
(3) پس از اتمام استریل کردن، درب ورودی هوا را ببندید، اقلام را خارج کرده و صبر کنید تا تا دمای اتاق خنک شوند، آنها را یک شب در انکوباتور با دمای 37 درجه سانتیگراد قرار دهید و روز بعد به روش فوق به استریل کردن ادامه دهید. این کار را سه بار انجام دهید تا به هدف عقیم سازی برسید.
2. نحوه استفاده از منعقد کننده سرم:
زمانی که محیط کشت حاوی مواد خاصی مانند سرم یا تخم مرغ باشد، حرارت زیاد باعث از بین رفتن مواد مغذی آن می شود. بنابراین می توان از دمای پایین برای انعقاد سرم و دستیابی به اهداف استریلیزاسیون استفاده کرد:
(1) هنگام استفاده از سرم استریل شده با این روش به مقدار کافی، عملیات آسپتیک باید به شدت دنبال شود، و لوله های آزمایش و صفحات نیز باید قبل از استفاده استریل شوند.
(2) محیط کشت را در صورت نیاز به یک لایه شیب دار یا بلند تبدیل کنید. پس از افزودن آب کافی، منبع تغذیه را وصل کنید، دما را به 75 تا 90 درجه سانتیگراد به مدت یک ساعت افزایش دهید و سپس آن را استریل کنید. آن را به مدت یک شب در انکوباتور 37 درجه سانتیگراد قرار دهید و سپس آن را سه بار استریل کنید.
3. جوشانده و ضد عفونی کنید:
می توانید از دیگ جوش یا استریل کننده در حال جوش استفاده کنید. پس از به جوش آمدن آب، آن را به مدت 5 تا 15 دقیقه بجوشانید. همچنین می توانید اسید کربولیک 2 درصد را به آب اضافه کنید و به مدت 5 دقیقه بجوشانید. 0.02% فرمالدئید را اضافه کرده و در دمای 80 درجه سانتیگراد به مدت 60 دقیقه بجوشانید تا به هدف استریلیزاسیون برسید. با این حال، عقیم سازی جوشان را می توان به دست آورد. هنگام استفاده از تقویت کننده ها باید به خورندگی اقلام توجه شود.
4. درمان عقیم سازی:
پس از عقیم سازی، اقلام در شرایط عادی از قبل استریل می شوند. آنها باید به دقت بازرسی شوند و هنگام خارج شدن از دستگاه استریلیزر قرار گیرند تا از آلودگی مجدد جلوگیری شود.
(1) اقلام را خارج کنید و فوراً یکپارچگی بسته بندی را بررسی کنید. اگر آسیبی وجود داشته باشد یا تامپون برداشته شود، نمی توان از آن به عنوان اقلام استریل استفاده کرد.
(2) اقلام خارج شده را نمی توان به عنوان اقلام استریل استفاده کرد اگر بسته بندی آنها آشکارا در آب خیس شده باشد.
(3) محیط کشت یا معرف ها باید بررسی شوند تا ببینیم که آیا رنگ یا حالت آنها پس از استریلیزاسیون مطابقت دارد یا خیر. آنهایی که شرایط لازم را ندارند باید کنار گذاشته شوند.
(4) برای باز و بسته کردن ظروف، سوراخ های صفحه باید هنگام بیرون آوردن آنها بسته شود.
(5) اگر اقلام برداشته شده به زمین بیفتد، یا در جای نجس قرار گیرد یا با آب آغشته شود، آلوده محسوب می شود و نمی توان از آن به عنوان اقلام استریل استفاده کرد.
(6) اقلام استریل شده واجد شرایط خارج شده باید در اتاق ذخیره یا کابینت ضد گرد و غبار نگهداری شوند و مخلوط کردن آنها با اقلام استریل نشده اکیداً ممنوع است.
(7) تمام اقلام واجد شرایط باید با تاریخ عقیم سازی و تاریخ انقضا علامت گذاری شوند.
(8) پس از تکمیل هر دسته از پردازش استریل، نام، مقدار، دما، زمان و اپراتور محصولات استریل شده را ثبت کنید.
الزامات برای تصفیه زباله های سمی و باکتریایی
تجهیزات آزمایشی و کشت های مورد استفاده در آزمایش های میکروبیولوژیکی نباید بدون ضدعفونی از آزمایشگاه خارج شوند.
1. مواد و ضایعات آلوده کشت شده باید در ظروف محکم یا سبدهای سیمی قرار داده شوند و تا زمانی که بطور یکنواخت اتوکلاو شوند، در مکانهای مشخص شده در مرکز نگهداری شوند.
2. کشت های آلوده به میکروارگانیسم ها باید به مدت 30 دقیقه در دمای 121 درجه سانتی گراد اتوکلاو شوند.
3. پس از استفاده، نی های آلوده را باید در محلول 5 درصد صابون کرئول یا محلول اسید کربولیک قرار داده و حداقل 24 ساعت خیس کرد (مایع ضدعفونی کننده نباید کمتر از ارتفاع خیساندن باشد) و سپس با فشار بالا در دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 30 دقیقه استریل شود.
4. مایع برای لکه گیری و شستشوی اسمیر به طور کلی می تواند مستقیماً در فاضلاب ریخته شود. مایع شستشو برای باکتری های بدخیم باید قبل از ریختن در فاضلاب در یک لیوان شسته شده و با فشار بالا استریل شود. اسلایدهای رنگ آمیزی شده در محلول صابون کرزول 5 درصد قرار می گیرند. پس از 24 ساعت خیساندن در آب، بجوشانید و بشویید. اسلایدها یا ظروف مورد استفاده برای آزمایش آگلوتیناسیون باید اتوکلاو شده و سپس شسته شوند.
5. پس از شکستن کشت، فوراً قسمت های آلوده را با محلول صابون کرزول 5 درصد یا محلول اسید کربولیک خیس کنید و نیم ساعت خیس کنید و سپس پاک کنید.
لباس کار یا لباس کار آلوده، کلاه، ماسک و غیره که برای آزمایش های خشونت آمیز استفاده می شود باید در کیسه های ضد عفونی مخصوص قرار داده شود و قبل از شستن با فشار بالا استریل شود.
الزامات آماده سازی متوسط
کیفیت آماده سازی محیط کشت مستقیماً بر رشد میکروارگانیسم ها تأثیر می گذارد، زیرا میکروارگانیسم های مختلف نیازهای تغذیه ای متفاوت و اهداف کشت متفاوتی دارند. شرایط آماده سازی محیط های کشت مختلف به شرح زیر است:
1. مواد را مطابق فرمول متوسط وزن کرده و سپس در آب مقطر حل کنید. قبل از استفاده باید کیفیت معرف ها و داروها مورد بررسی قرار گیرد.
2. اندازه گیری و تنظیم pH: اندازه گیری pH باید زمانی انجام شود که محیط کشت تا دمای اتاق خنک شود، زیرا در شرایط سرد یا گرم تفاوت خاصی در pH وجود دارد. وقتی اندازه گیری تمام شد، قلیایی یا اسید را با توجه به مقدار محاسبه شده اضافه کنید و خوب مخلوط کنید. باید دوباره تست بشه مقدار pH محیط کشت باید دقیق باشد، در غیر این صورت بر رشد میکروارگانیسم ها تأثیر می گذارد یا روی مشاهده نتایج تأثیر می گذارد. با این حال، باید توجه داشت که استریلیزاسیون با فشار بالا میتواند بر کاهش یا افزایش pH برخی از محیطهای کشت تأثیر بگذارد، بنابراین برای جلوگیری از تأثیرگذاری بر کیفیت محیط کشت، استریل کردن در فشار زیاد یا بارها توصیه نمیشود. اندیکاتورها، سدیم دی اکسی کولات، آگار و غیره به طور کلی پس از تنظیم pH آن را اضافه کنید.
3. برای تسهیل مشاهده رشد باکتری، محیط کشت باید شفاف باشد. پس از گرم شدن و جوشاندن محیط کشت، می توان آن را با پنبه یا فلانل جاذب فیلتر کرد تا رسوبات خارج شود. در صورت لزوم، می توان آن را با سفیده تخم مرغ روشن کرد. نوارهای آگار استفاده شده باید از قبل شسته و خشک شوند. قبل از استفاده، به دلیل ناخالصی های موجود در آگار، شفافیت را تحت تأثیر قرار دهید.
4. برای نگهداری محیط کشت نباید از ظروف آهنی، مسی و سایر ظروف استفاده شود. بهتر است از ظروف شیشه ای تمیز خنثی و سخت استفاده کنید.
5. استریل کردن محیط کشت نه تنها باید به هدف استریل کردن کامل برسد، بلکه باید توجه داشت که ارزش غذایی آن در اثر حرارت دادن کاهش نیابد. به طور کلی دمای 121 درجه سانتی گراد به مدت 15 دقیقه کافی است. برای محیط های کشت حاوی موادی که نسبت به حرارت بالا تحمل نمی کنند مانند قندها و سرم، ژلاتین و غیره باید با دمای پایین یا روش متناوب استریل شوند. برخی از معرفهایی که نمیتوان آنها را حرارت داد، مانند تلوریت پتاسیم، زرده تخم مرغ، TTC، آنتیبیوتیکها و غیره، پس از اتوکلاو شدن آگار پایه باید تا حدود 50 درجه سانتیگراد خنک شوند و سپس اضافه شوند.
6. پس از تهیه هر دسته از محیط های کشت، آزمایش رشد استریل و آزمایش رشد سویه های مورد آزمایش باید انجام شود. اگر محیط کشت بیوشیمیایی است، از سویه های باکتریایی استاندارد برای تلقیح و کشت استفاده کنید و نتایج واکنش بیوشیمیایی را مشاهده کنید. باید یک واکنش طبیعی نشان دهد. محیط کشت نباید برای مدت طولانی نگهداری شود. در صورت لزوم می توان آن را در یخچال 4 درجه سانتی گراد نگهداری کرد.
7. در حال حاضر، انواع مختلفی از محیط های کشت خشک وجود دارد. هر دسته باید از سویه های استاندارد برای آزمایش رشد یا مشاهده واکنش های بیوشیمیایی استفاده کند. محیط های کشت مختلف تنها پس از خوب بودن آزمایش رشد سویه های مربوطه قابل استفاده است. می توان از انواع تازه خریداری شده یا خشک شده که مدت زیادی نگهداری شده اند استفاده کرد. PH محیط کشت نیز هنگام تهیه آن باید اندازه گیری شود و دوز و روش آن طبق دستورالعمل محصول رعایت شود.
8. معرف های شیمیایی، شرایط استریلیزاسیون، نتایج آزمایش رشد سویه و پرسنل تولیدی که در هر دسته از محیط های کشت آماده شده استفاده می شود باید برای بررسی ثبت شوند.
الزامات جمع آوری و پردازش نمونه
1. نمونه های بازرسی جمع آوری شده باید معرف باشد. هنگام نمونه برداری، مواد خام، فرآوری، حمل و نقل، روش ها و شرایط نگهداری دسته مواد غذایی، شرایط بهداشت محیط اطراف و غیره باید به طور دقیق بررسی شوند تا بررسی شود که آیا منابع آلودگی وجود دارد یا خیر.
2. با توجه به نوع و مقدار غذا، مقدار و روش نمونه برداری باید مطابق با الزامات روش های بازرسی استاندارد انجام شود.
3. در هنگام نمونه برداری به عملیات آسپتیک توجه کنید و ظرف باید استریل شود تا از آلودگی میکروبی در محیط جلوگیری شود. ظرف نباید با محلول صابون کرئوزال، استریل با کلرمتیونین، الکل و سایر مواد ضد عفونی کننده استریل شود و نباید حاوی چنین ضدعفونی کننده ها یا آنتی بیوتیک ها باشد. برای جلوگیری از کشتن میکروارگانیسم ها در نمونه، قیچی، چاقو و قاشق های استفاده شده نیز باید قبل از استفاده استریل شوند.
4. نمونه ها باید بلافاصله پس از جمع آوری برای بازرسی به اتاق بازرسی فرستاده شود. روند بازرسی معمولاً از 3 ساعت تجاوز نمی کند. اگر فاصله طولانی باشد، می توان آن را در یک محیط 1 تا 5 درجه سانتیگراد ذخیره کرد. در صورت نیاز به فریز کردن، باید در حالت یخ زده نگهداری شود. برای بازرسی ارسال کنید.
5. اتاق بازرسی پس از دریافت نمونه، آن را ثبت (نام نمونه، واحد بازرسی، مقدار، تاریخ، شماره و ...) و مشاهده ظاهر نمونه می کند. اگر هر یک از شرایط زیر یافت شود، بازرسی ممکن است رد شود:
(1) نمونه هایی که با فشار بالا، جوشاندن یا روش های دیگر استریل شده اند، اهمیت خود را در نمایش غذای اصلی از دست خواهند داد.
(2) بطری ها و کیسه های غذا باز شده، گوشت پخته شده و فرآورده های آن، مرغ پخته شده و سایر غذاها شکسته و ناقص است، یعنی شکل اصلی غذا از بین رفته است (به جز نمونه های مسمومیت غذایی).
(3) مقدار نمونه برداری در صورت نیاز کافی نیست.
برای نمونه های ارسال شده برای بازرسی که شرایط را برآورده می کنند، اتاق بازرسی باید بلافاصله پس از دریافت آنها، بازرسی را انجام دهد. در صورت عدم رعایت شرایط، باید آنها را در یخچال 4 درجه سانتیگراد نگهداری کرد، برای ایجاد شرایط به موقع آماده کرد و سپس بازرسی انجام داد.
6. هنگام بازرسی نمونه ها، پردازش مناسب را با توجه به خواص مختلف آنها انجام دهید.
(1) هنگام تلقیح نمونه های مایع، آنها باید کاملاً مخلوط شده و با توجه به مقدار تلقیح شوند.
(2) برای نمونه های جامد، از یک چاقوی استریل شده برای برش دادن 25 گرم از قسمت های مختلف استفاده کنید، آنها را در 225 میلی لیتر نمک استریل شده یا محلول های دیگر قرار دهید، خرد کرده و با هموژنایزر مخلوط کنید، و بر اساس مقدار تلقیح کنید.
(3) بطری ها و کیسه های غذا باید با استریل کردن باز شوند و روش های فوق باید با توجه به خصوصیات قبل از تلقیح انتخاب شوند.
نمونه مورد نیاز بازرسی، ثبت و گزارش
1. پس از دریافت نمونه، اتاق بازرسی ابتدا بازرسی ظاهری را انجام می دهد و به سرعت بازرسی را مطابق با روش های بازرسی استاندارد ملی انجام می دهد. در طی فرآیند بازرسی، عملیات آسپتیک باید با دقت، مسئولانه و به شدت انجام شود تا از جلوگیری شود.نتیجه آزمایش میکروبیآلودگی در محیط زیست
2. روش های مورد استفاده در فرآیند بازرسی نمونه، پدیده ها و نتایج رخ داده و غیره باید در سوابق آزمون کتبی به عنوان مبنایی برای تجزیه و تحلیل و قضاوت نتایج نوشته شود. سوابق باید دقیق، واضح، معتبر، عینی باشد و نباید تغییر یا جعل شود.
را
را
