Tóm tắt yêu cầu xét nghiệm vi sinh
2024-01-24 15:14:33
Yêu cầu và các bước thực hiệnxét nghiệm vi sinhnhư sau:
Yêu cầu vận hành vô trùng:
1.Bạn phải mặc quần áo bảo hộ lao động và đội mũ bảo hộ khi cấy vi khuẩn.
2. Khi cấy mẫu thực phẩm, phải mặc quần áo làm việc đặc biệt, đội mũ và mang dép, đặt trong phòng đệm của phòng vô trùng và sử dụng sau khi khử trùng bằng tia UV trước khi làm việc.
3. Khi cấy mẫu thực phẩm phải rửa tay bằng xà phòng trước khi vào phòng vô trùng, sau đó lau sạch tay bằng bông gòn chứa cồn 75%.
4. Ống hút, đĩa phẳng, môi trường nuôi cấy dùng để cấy phải được khử trùng và tiệt trùng. Các thùng chứa không sử dụng không nên được sử dụng sau khi mở gói. Dụng cụ kim loại phải được hấp khử trùng hoặc đốt ba lần bằng cồn 95% trước khi sử dụng.
5. Khi lấy ống hút ra khỏi bao bì, đầu ống hút không được chạm vào những phần hở ra ngoài. Khi dùng ống hút để cấy vào ống nghiệm hoặc đĩa, đầu ống hút không được chạm vào mép ống nghiệm hoặc đĩa.
6. Việc cấy mẫu và chuyển vi khuẩn phải được thực hiện trước đèn cồn. Khi cấy vi khuẩn hoặc mẫu, ống hút phải được khử trùng bằng ngọn lửa sau khi lấy ra khỏi bao bì và mở nút ống nghiệm.
7. Trước khi cấy vi khuẩn, tất cả các dây kim loại của vòng cấy và kim phải được đốt bằng ngọn lửa, và nếu cần, nên đốt phần nối giữa vòng, kim và que. Vòng tiêm để cấy vi khuẩn lao và vi khuẩn độc hại phải được đun sôi trong nước sôi trong 5 phút, sau đó đốt trên ngọn lửa.
8. Khi hút chất lỏng vi khuẩn hoặc mẫu bằng ống hút, hãy sử dụng đầu cao su tương ứng để hút, không hút trực tiếp bằng miệng.
Yêu cầu sử dụng phòng vô trùng:
1. Các cửa sổ dẫn ra bên ngoài phòng vô trùng phải được lắp kính hai lớp và bịt kín. Chúng không nên được mở theo ý muốn. Cần có phòng đệm và cửa trượt tương ứng với kích thước phòng vô trùng. Cũng nên có một cửa sổ nhỏ 0,5 ~ 0,7m2. Để chuẩn bị chuyển đồ sau khi vào phòng vô trùng.
2. Phòng vô trùng phải được giữ sạch sẽ. Sau khi làm việc, cần khử trùng bằng dung dịch xà phòng cresol 2% đến 3%, lau sạch bề mặt làm việc và không cất giữ những vật dụng không liên quan đến thí nghiệm.
3. Cửa phòng vô trùng phải được đóng chặt trước và sau khi sử dụng, bật đèn cực tím. Nếu sử dụng đèn cực tím treo trong nhà để khử trùng thì cần phải có đèn cực tím 30W. Khoảng cách là 1,0m và thời gian chiếu xạ không dưới 30 phút. Khi sử dụng đèn tia cực tím cần chú ý thao tác trực tiếp dưới tia cực tím để tránh hư hỏng. Đèn cần được lau nhẹ nhàng bằng bông gòn tẩm cồn hai tuần một lần để loại bỏ bụi bẩn và dầu mỡ nhằm giảm tác động của tia cực tím xuyên qua.
4. Khi chế biến, cấy mẫu thực phẩm phải vào phòng vô trùng để thao tác và không được tự ý ra vào. Nếu cần chuyển vật phẩm, chúng có thể được chuyển qua cửa sổ nhỏ.
5. Nếu cần lắp điều hòa trong phòng vô trùng thì cần có thiết bị lọc.
Yêu cầu khử trùng và khử trùng
Đồ thủy tinh, đồ dùng bằng kim loại và môi trường nuôi cấy dùng đểxét nghiệm vi sinh, môi trường nuôi cấy bị ô nhiễm và đã cấy bệnh, v.v... phải được khử trùng trước khi sử dụng. Phương pháp khử trùng hơi nước bằng nhiệt khô và áp suất ẩm.
1. Chuẩn bị trước khi tiệt trùng
(1) Tất cả các vật dụng cần khử trùng phải được rửa sạch và sấy khô trước. Các đồ thủy tinh như ống hút và đĩa phẳng phải được gói chặt bằng giấy. Nếu sử dụng ống kim loại thì phải mở các lỗ thông gió trên chúng.
(2) Dùng giấy bọc nút bình tam giác chứa môi trường nuôi cấy, đậy nắp ống nghiệm và rút lõi ống tiêm ra rồi dùng gạc quấn lại.
2. cài đặt
(1) Máy tiệt trùng nhiệt khô: Các vật dụng không được để quá nhiều và không chạm vào bốn thành hộp.
(2) Nồi hấp áp suất cao lớn: Đặt các vật dụng đã tiệt trùng, bọc riêng và đặt trực tiếp vào xi lanh khử trùng. Đừng quá đông đúc các mặt hàng.
3. Kiểm tra thiết bị
(1) Kiểm tra xem công tắc cửa có linh hoạt hay không, vòng cao su có bị hỏng không và có bị xẹp không.
(2) Kiểm tra xem đồng hồ đo áp suất có ở vị trí 0 khi xả hết hơi nước hay không, đóng cửa và đậy nắp, thông gió bằng hơi nước hoặc nhiệt, đồng thời quan sát xem có rò rỉ không khí hay không, các điều kiện được đánh dấu bởi đồng hồ đo áp suất và nhiệt kế có khớp hay không và đường ống có bị tắc hay không.
(3) Đối với máy tiệt trùng có thiết bị điều khiển chương trình điện tử tự động, cần kiểm tra chương trình quy định trước khi sử dụng để xem liệu chương trình đó có đáp ứng các yêu cầu về khử trùng hay không.
4. Xử lý khử trùng
(1) Phương pháp khử trùng bằng nhiệt khô:
Phương pháp này phù hợp với những đồ vật không bị hư hỏng, hư hỏng hoặc bay hơi trong điều kiện nhiệt khô. Nó thường được sử dụng để khử trùng đồ thủy tinh, sản phẩm kim loại, sản phẩm gốm sứ, v.v.
①Dụng cụ và đồ dùng phải được rửa sạch trước khi sấy khô để tránh bụi bẩn bám trên bề mặt bị cacbon hóa.
② Trong quá trình khử trùng, các vật dụng không được để quá nhiều, không tiếp xúc trực tiếp với đáy và thành hộp, đồng thời chừa khoảng trống giữa các vật dụng.
③ Trong quá trình khử trùng, đóng chặt cửa, cắm nguồn điện, mở lỗ thoát khí trong khoảng 30 phút để thoát khí lạnh trong máy tiệt trùng, điều chỉnh đèn báo khi nhiệt độ tăng lên 160°C và duy trì trong 1,5 đến 2 giờ.
④Sau khi khử trùng xong hoặc trong quá trình tăng nhiệt độ, cửa phải được mở ở nhiệt độ dưới 60°C.
(2) Cần tuân thủ các bước sau khi sử dụng nồi áp suất di động hoặc máy tiệt trùng hơi nước áp suất thẳng đứng:
① Thêm 3L nước vào thân chính của nồi áp suất di động và 16L nước vào nồi áp suất đứng (lượng nước cần được bổ sung khi tái sử dụng và cần thay nước nếu nước bị đục);
② Đối với nồi áp suất di động, lắp ống xả ở nắp trên vào ống vuông ở thành trong của thùng khử trùng (không được sử dụng máy tiệt trùng không có ống mềm hoặc ống có ống bị ăn mòn và nứt);
③ Đậy nắp trên và vặn chặt để tránh rò rỉ không khí; đặt máy tiệt trùng lên nguồn lửa để đun nóng, bật nguồn nồi áp suất đứng và mở van xả ở nắp trên để thoát khí (thoát khí trong vòng 10 đến 15 phút sau khi nước sôi));
④Đóng van xả để tăng áp suất hơi lên yêu cầu quy định và duy trì áp suất đó trong thời gian quy định (tùy thuộc vào tính chất của vật phẩm đã được khử trùng và các trường hợp liên quan);
⑤ Sau khi đạt thời gian quy định, đối với những đồ cần sấy khô, ngay lập tức mở van xả để xả hơi nước. Khi áp suất về 0, làm nguội tự nhiên đến 60°C rồi mở nắp để lấy đồ ra. Nếu là chất lỏng, không mở van xả. Nồi phải được lấy ra khỏi nguồn nhiệt ngay lập tức và để nguội tự nhiên cho đến khi áp suất trở về 0 và nhiệt độ giảm xuống dưới 60°C trước khi mở nắp để lấy chất bên trong ra ngoài nhằm tránh hiện tượng chất lỏng bị giảm áp đột ngột do sôi mạnh hoặc nổ bình chứa.
(3) Thực hiện theo các bước sau để sử dụng máy tiệt trùng hơi nước nồi áp suất nằm:
①Đóng chặt cửa nồi, mở van nạp khí, đưa hơi nước vào gác lửng để làm nóng trước, không khí lạnh trên gác lửng sẽ tự động thoát ra ngoài qua tấm chắn không khí;
②Sau khi lớp xen kẽ đạt đến nhiệt độ xác định trước, hãy mở van nạp khí của khoang nồi, đưa hơi nước vào khoang nồi, không khí lạnh trong khoang nồi sẽ tự động thoát ra ngoài qua bộ ngăn khí buồng nồi;
③Khi áp suất và nhiệt độ trong buồng nồi đạt đến áp suất quy định, hãy điều chỉnh van nạp khí để giữ ổn định;
④ Làm mát nhiệt độ một cách tự nhiên hoặc nhân tạo xuống 60oC trước khi mở cửa lấy đồ ra. Không sử dụng phương pháp xả hơi nhanh để tránh giảm áp suất đột ngột, chất lỏng sôi mạnh hoặc nổ bình chứa;
⑤ Khi sử dụng chương trình tự động-máy tiệt trùng hơi nước áp suất có kiểm soát, sau khi đặt đồ vật và đóng chặt cửa, phải nhấn công tắc tương ứng tùy theo loại đồ vật để quá trình khử trùng có thể được thực hiện tự động theo quy trình yêu cầu. Trong quá trình khử trùng phải sử dụng dụng cụ kèm theo để ghi lại nhiệt độ và thời gian. Để tham khảo trong tương lai, các yêu cầu vận hành phải tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn của nhà sản xuất;
5. Nhiệt độ và thời gian khử trùng
(1) Nhiệt độ khử trùng của máy tiệt trùng nhiệt khô là 160oC, 1,5 ~ 2h.
(2) Nhiệt độ và thời gian tiệt trùng của máy tiệt trùng hơi nước áp suất
Phương pháp khử trùng gián đoạn
1. Phương pháp khử trùng:
Sử dụng khử trùng bằng hơi nước mà không cần áp lực. Một số chất dễ bị phá hủy khi khử trùng bằng hơi nước áp suất cao nên phương pháp này có thể được sử dụng để khử trùng.
(1) Đặt các vật dụng cần khử trùng vào nồi, đậy nắp trên, mở cửa thoát nước và xả hết nước còn lại trong nồi.
(2) Đóng cửa thoát nước, mở cửa hút gió và khử trùng trong 10 đến 20 phút nếu cần.
(3) Sau khi khử trùng xong, đóng cửa hút gió, lấy đồ ra và đợi nguội đến nhiệt độ phòng, cho vào tủ ấm 37°C qua đêm và tiếp tục khử trùng theo phương pháp trên vào ngày hôm sau. Làm điều này ba lần để đạt được mục đích khử trùng.
2. Cách sử dụng máy đông máu huyết thanh:
Khi môi trường nuôi cấy có chứa các thành phần đặc biệt như huyết thanh hoặc trứng, nhiệt độ cao sẽ phá hủy các chất dinh dưỡng trong đó. Do đó, nhiệt độ thấp có thể được sử dụng để đông tụ huyết thanh và đạt được mục đích khử trùng:
(1) Khi sử dụng huyết thanh tiệt trùng theo phương pháp này để chia nhỏ, phải tuân thủ nghiêm ngặt các thao tác vô trùng, ống nghiệm và đĩa thử cũng phải được khử trùng trước khi sử dụng;
(2) Làm môi trường nuôi cấy thành dốc hoặc tầng cao theo yêu cầu. Sau khi thêm đủ nước, kết nối nguồn điện, tăng nhiệt độ lên 75 ~ 90°C trong một giờ rồi khử trùng. Đặt nó vào tủ ấm 37°C qua đêm, sau đó khử trùng ba lần.
3. Đun sôi và khử trùng:
Bạn có thể sử dụng nồi đun sôi hoặc máy tiệt trùng đun sôi. Sau khi nước sôi, đun sôi trong 5 đến 15 phút. Bạn cũng có thể thêm 2% axit carbolic vào nước và đun sôi trong 5 phút. Thêm 0,02% formaldehyde và đun sôi ở 80°C trong 60 phút để đạt được mục đích khử trùng. Tuy nhiên, khử trùng sôi có thể đạt được. Khi sử dụng chất tăng cường, cần chú ý đến khả năng ăn mòn của vật phẩm.
4. Xử lý khử trùng:
Sau khi khử trùng, các vật dụng đã được vô trùng trong điều kiện bình thường. Chúng phải được kiểm tra và đặt cẩn thận khi lấy ra khỏi máy tiệt trùng để tránh tái nhiễm bẩn;
(1) Lấy các mặt hàng ra và kiểm tra tính toàn vẹn của bao bì ngay lập tức. Nếu bị hư hỏng hoặc tampon bị tháo ra thì không thể sử dụng làm vật dụng vô trùng;
(2) Các vật dụng lấy ra không thể được sử dụng làm vật phẩm vô trùng nếu bao bì của chúng rõ ràng đã bị ngâm trong nước;
(3) Cần kiểm tra môi trường nuôi cấy hoặc thuốc thử để xem chúng có đáp ứng được màu sắc hoặc trạng thái sau khi khử trùng hay không. Những sản phẩm không đạt yêu cầu sẽ bị loại bỏ;
(4) Đối với các thùng chứa đóng mở, các lỗ lưới phải được đóng lại khi lấy chúng ra;
(5) Nếu đồ vật bị loại bỏ rơi xuống đất, đặt sai vị trí ở nơi không sạch sẽ hoặc bị dính nước, chúng được coi là bị ô nhiễm và không thể được sử dụng làm vật phẩm vô trùng;
(6) Những vật dụng đã tiệt trùng đủ tiêu chuẩn lấy ra phải được bảo quản trong phòng bảo quản hoặc tủ chống bụi, nghiêm cấm trộn lẫn chúng với những vật dụng chưa được khử trùng;
(7) Tất cả các mặt hàng đủ tiêu chuẩn phải được đánh dấu ngày khử trùng và ngày hết hạn;
(8) Sau khi hoàn thành mỗi đợt xử lý tiệt trùng, ghi lại tên, số lượng, nhiệt độ, thời gian và cách sử dụng của sản phẩm đã tiệt trùng.
Yêu cầu đối với việc xử lý chất thải độc hại và vi khuẩn
Các thiết bị thí nghiệm và môi trường nuôi cấy dùng trong thí nghiệm vi sinh không được phép mang ra khỏi phòng thí nghiệm khi chưa khử trùng.
1. Các vật liệu và chất thải nuôi cấy bị ô nhiễm phải được đặt trong các thùng chứa kín hoặc giỏ lưới và bảo quản tập trung tại các địa điểm được chỉ định cho đến khi chúng được hấp khử trùng đồng nhất.
2. Môi trường cấy bị nhiễm vi sinh vật phải được hấp khử trùng ở 121°C trong 30 phút.
3. Sau khi sử dụng, ống hút bị nhiễm bẩn phải được ngâm trong dung dịch xà phòng creol 5% hoặc dung dịch axit carbolic, ngâm ít nhất 24 giờ (chất lỏng khử trùng không được thấp hơn chiều cao ngâm), sau đó khử trùng bằng áp suất cao ở 121°C trong 30 phút.
4. Chất lỏng để nhuộm và rửa vết bẩn nói chung có thể được xả trực tiếp vào cống. Dung dịch rửa vi khuẩn độc hại phải được tráng qua cốc thủy tinh và khử trùng bằng áp suất cao trước khi đổ xuống cống. Các phiến kính đã nhuộm được cho vào dung dịch xà phòng cresol 5%. Sau khi ngâm trong nước 24 giờ, đun sôi và rửa sạch. Các phiến kính hoặc đĩa dùng để kiểm tra sự ngưng kết phải được hấp khử trùng và sau đó rửa sạch.
5. Sau khi phá vỡ chất cấy, ngay lập tức phun và ngâm những phần bị ô nhiễm bằng dung dịch xà phòng cresol 5% hoặc dung dịch axit carbolic, ngâm trong nửa giờ rồi lau sạch.
Quần áo làm việc hoặc quần áo làm việc, mũ, khẩu trang, v.v. bị nhiễm bẩn được mặc để thử nghiệm bạo lực phải được đặt trong túi khử trùng đặc biệt và khử trùng bằng áp suất cao trước khi giặt.
Yêu cầu chuẩn bị trung bình
Chất lượng chuẩn bị môi trường nuôi cấy sẽ ảnh hưởng trực tiếp đến sự phát triển của vi sinh vật, bởi vì các vi sinh vật khác nhau có yêu cầu dinh dưỡng khác nhau và mục đích nuôi cấy khác nhau. Các yêu cầu chuẩn bị cho các môi trường nuôi cấy khác nhau như sau:
1. Cân các thành phần theo công thức trung bình, sau đó hòa tan chúng trong nước cất. Chất lượng của thuốc thử và thuốc được sử dụng phải được kiểm tra trước khi sử dụng.
2. Đo và điều chỉnh pH: Việc đo pH nên được thực hiện khi môi trường nuôi cấy đã nguội đến nhiệt độ phòng, vì có sự chênh lệch nhất định về độ pH trong điều kiện nóng hoặc lạnh. Khi phép đo hoàn tất, thêm kiềm hoặc axit theo lượng tính toán và trộn đều. Nên kiểm tra lại. Giá trị pH của môi trường nuôi cấy phải chính xác, nếu không sẽ ảnh hưởng đến sự phát triển của vi sinh vật hoặc ảnh hưởng đến việc quan sát kết quả. Tuy nhiên, cần lưu ý rằng việc khử trùng bằng áp suất cao có thể ảnh hưởng đến việc giảm hoặc tăng độ pH của một số môi trường nuôi cấy, do đó không nên khử trùng ở áp suất quá cao hoặc quá nhiều lần để tránh ảnh hưởng đến chất lượng của môi trường nuôi cấy. Các chất chỉ thị, natri deoxycholate, thạch, v.v. thường được thêm vào sau khi điều chỉnh độ pH.
3. Môi trường nuôi cấy cần phải được giữ sạch sẽ để thuận tiện cho việc quan sát sự phát triển của vi khuẩn. Sau khi môi trường nuôi cấy được làm nóng và đun sôi, có thể lọc bằng bông thấm hoặc vải nỉ để loại bỏ cặn. Nếu cần thiết, nó có thể được làm rõ bằng lòng trắng trứng. Các dải thạch được sử dụng phải được rửa sạch và sấy khô trước. Trước khi sử dụng, tránh ảnh hưởng đến độ trong suốt do tạp chất trong thạch.
4. Không nên sử dụng sắt, đồng và các vật chứa khác để đựng môi trường nuôi cấy. Tốt hơn nên sử dụng hộp đựng bằng thủy tinh cứng trung tính sạch.
5. Việc khử trùng môi trường nuôi cấy không chỉ phải đạt được mục đích khử trùng hoàn toàn mà còn phải chú ý không làm giảm giá trị dinh dưỡng do đun nóng. Nói chung, 121°C trong 15 phút là đủ. Đối với môi trường nuôi cấy có chứa các chất không dung nạp được ở nhiệt độ cao như đường, huyết thanh, gelatin... cần tiệt trùng bằng phương pháp nhiệt độ thấp hoặc gián đoạn. Một số thuốc thử không thể đun nóng, chẳng hạn như kali telurit, lòng đỏ trứng, TTC, kháng sinh, v.v., nên được làm lạnh đến khoảng 50°C sau khi thạch cơ bản được hấp khử trùng rồi thêm vào;
6. Sau khi chuẩn bị xong mỗi mẻ môi trường nuôi cấy, phải thực hiện phép thử sinh trưởng vô trùng và phép thử sinh trưởng của các chủng được kiểm tra. Nếu là môi trường nuôi cấy sinh hóa, hãy sử dụng các chủng vi khuẩn tiêu chuẩn để cấy và nuôi cấy, đồng thời quan sát kết quả phản ứng sinh hóa. Nó sẽ hiển thị một phản ứng bình thường. Môi trường nuôi cấy không nên bảo quản quá lâu. Nếu cần, có thể bảo quản trong tủ lạnh 4°C.
7. Hiện nay có rất nhiều loại môi trường nuôi cấy khô. Mỗi mẻ cần sử dụng chủng chuẩn để thử nghiệm sinh trưởng hoặc quan sát phản ứng sinh hóa. Các môi trường nuôi cấy khác nhau chỉ có thể được sử dụng sau khi thử nghiệm tăng trưởng của các chủng tương ứng tốt. Những loại mới mua hoặc phơi khô, bảo quản lâu ngày đều có thể sử dụng được. Độ pH của môi trường nuôi cấy cũng phải được đo khi chuẩn bị, đồng thời phải tuân theo liều lượng và phương pháp theo hướng dẫn của sản phẩm.
8. Thuốc thử hóa học, điều kiện khử trùng, kết quả thử nghiệm tăng trưởng chủng và nhân viên sản xuất được sử dụng trong mỗi mẻ môi trường nuôi cấy đã chuẩn bị phải được ghi lại để điều tra.
Yêu cầu lấy và xử lý mẫu
1. Mẫu giám định thu thập phải có tính đại diện. Khi lấy mẫu, cần điều tra chi tiết nguyên liệu thô, phương pháp chế biến, vận chuyển, bảo quản và điều kiện của lô thực phẩm, điều kiện sức khỏe môi trường xung quanh, v.v. để kiểm tra xem có bất kỳ nguồn ô nhiễm nào hay không.
2. Tùy theo chủng loại và số lượng thực phẩm, số lượng và phương pháp lấy mẫu phải phù hợp với yêu cầu của phương pháp kiểm tra tiêu chuẩn.
3. Khi lấy mẫu, chú ý thao tác vô trùng, thùng chứa phải được khử trùng để tránh ô nhiễm vi sinh vật ra môi trường. Hộp đựng không được khử trùng bằng dung dịch xà phòng creosal, khử trùng bằng chlormethionine, rượu và các chất khử trùng khác và không được chứa các chất khử trùng hoặc kháng sinh đó. Để tránh làm chết vi sinh vật trong mẫu, kéo, dao, thìa sử dụng cũng phải được khử trùng trước khi sử dụng.
4. Mẫu phải được gửi đến phòng kiểm tra để kiểm tra ngay sau khi lấy mẫu. Quá trình kiểm tra thường không quá 3 giờ. Nếu khoảng cách dài, nó có thể được lưu trữ trong môi trường 1 ~ 5oC. Nếu cần đông lạnh thì nên bảo quản ở trạng thái đông lạnh. Gửi để kiểm tra.
5. Sau khi nhận mẫu, phòng kiểm tra sẽ tiến hành đăng ký (tên mẫu, đơn vị kiểm tra, số lượng, ngày tháng, số hiệu…) và quan sát hình thức bên ngoài của mẫu. Nếu phát hiện bất kỳ điều kiện nào sau đây, việc kiểm tra có thể bị từ chối:
(1) Các mẫu đã được khử trùng bằng áp suất cao, đun sôi hoặc các phương pháp khác sẽ mất đi ý nghĩa trong việc thể hiện thực phẩm ban đầu;
(2) Chai, túi đựng thực phẩm đã bị mở, thịt và các sản phẩm từ thịt đã nấu chín, thịt gia cầm nấu chín và các thực phẩm khác bị vỡ, không còn nguyên vẹn, tức là thực phẩm bị mất hình dạng ban đầu (trừ mẫu ngộ độc thực phẩm);
(3) Số lượng lấy mẫu không đủ theo yêu cầu;
Đối với các mẫu gửi đi kiểm tra đạt yêu cầu, phòng kiểm tra phải tiến hành kiểm tra ngay sau khi nhận được. Nếu chưa đạt điều kiện thì nên bảo quản trong tủ lạnh 4°C, chuẩn bị tạo điều kiện kịp thời rồi tiến hành kiểm tra.
6. Khi kiểm tra mẫu, hãy thực hiện xử lý thích hợp tùy theo các đặc tính khác nhau của chúng.
(1) Khi cấy các mẫu chất lỏng, chúng phải được trộn kỹ và cấy theo số lượng.
(2) Đối với mẫu rắn, dùng dao đã tiệt trùng cắt ra 25g các phần khác nhau, cho vào 225mL nước muối tiệt trùng hoặc dung dịch khác, nghiền nát và trộn bằng máy đồng nhất rồi cấy theo lượng.
(3) Chai và túi thực phẩm phải được mở bằng cách khử trùng, và các phương pháp trên phải được lựa chọn theo đặc điểm trước khi tiêm chủng.
Yêu cầu kiểm tra, ghi chép và báo cáo mẫu
1. Sau khi nhận được mẫu, phòng kiểm tra trước tiên sẽ tiến hành kiểm tra bề ngoài và nhanh chóng tiến hành kiểm tra theo phương pháp kiểm tra tiêu chuẩn quốc gia. Trong quá trình kiểm tra, các thao tác vô trùng phải được thực hiện cẩn thận, có trách nhiệm và nghiêm ngặt để tránhkết quả xét nghiệm vi sinh vậtô nhiễm trong môi trường.
2. Các phương pháp được sử dụng trong quá trình kiểm tra mẫu, các hiện tượng, kết quả xảy ra... phải được ghi vào biên bản kiểm nghiệm để làm cơ sở phân tích, nhận định kết quả. Hồ sơ phải chi tiết, rõ ràng, xác thực, khách quan, không được sửa đổi, giả mạo.
Yêu cầu vận hành vô trùng:
1.Bạn phải mặc quần áo bảo hộ lao động và đội mũ bảo hộ khi cấy vi khuẩn.
2. Khi cấy mẫu thực phẩm, phải mặc quần áo làm việc đặc biệt, đội mũ và mang dép, đặt trong phòng đệm của phòng vô trùng và sử dụng sau khi khử trùng bằng tia UV trước khi làm việc.
3. Khi cấy mẫu thực phẩm phải rửa tay bằng xà phòng trước khi vào phòng vô trùng, sau đó lau sạch tay bằng bông gòn chứa cồn 75%.
4. Ống hút, đĩa phẳng, môi trường nuôi cấy dùng để cấy phải được khử trùng và tiệt trùng. Các thùng chứa không sử dụng không nên được sử dụng sau khi mở gói. Dụng cụ kim loại phải được hấp khử trùng hoặc đốt ba lần bằng cồn 95% trước khi sử dụng.
5. Khi lấy ống hút ra khỏi bao bì, đầu ống hút không được chạm vào những phần hở ra ngoài. Khi dùng ống hút để cấy vào ống nghiệm hoặc đĩa, đầu ống hút không được chạm vào mép ống nghiệm hoặc đĩa.
6. Việc cấy mẫu và chuyển vi khuẩn phải được thực hiện trước đèn cồn. Khi cấy vi khuẩn hoặc mẫu, ống hút phải được khử trùng bằng ngọn lửa sau khi lấy ra khỏi bao bì và mở nút ống nghiệm.
7. Trước khi cấy vi khuẩn, tất cả các dây kim loại của vòng cấy và kim phải được đốt bằng ngọn lửa, và nếu cần, nên đốt phần nối giữa vòng, kim và que. Vòng tiêm để cấy vi khuẩn lao và vi khuẩn độc hại phải được đun sôi trong nước sôi trong 5 phút, sau đó đốt trên ngọn lửa.
8. Khi hút chất lỏng vi khuẩn hoặc mẫu bằng ống hút, hãy sử dụng đầu cao su tương ứng để hút, không hút trực tiếp bằng miệng.
Yêu cầu sử dụng phòng vô trùng:
1. Các cửa sổ dẫn ra bên ngoài phòng vô trùng phải được lắp kính hai lớp và bịt kín. Chúng không nên được mở theo ý muốn. Cần có phòng đệm và cửa trượt tương ứng với kích thước phòng vô trùng. Cũng nên có một cửa sổ nhỏ 0,5 ~ 0,7m2. Để chuẩn bị chuyển đồ sau khi vào phòng vô trùng.
2. Phòng vô trùng phải được giữ sạch sẽ. Sau khi làm việc, cần khử trùng bằng dung dịch xà phòng cresol 2% đến 3%, lau sạch bề mặt làm việc và không cất giữ những vật dụng không liên quan đến thí nghiệm.
3. Cửa phòng vô trùng phải được đóng chặt trước và sau khi sử dụng, bật đèn cực tím. Nếu sử dụng đèn cực tím treo trong nhà để khử trùng thì cần phải có đèn cực tím 30W. Khoảng cách là 1,0m và thời gian chiếu xạ không dưới 30 phút. Khi sử dụng đèn tia cực tím cần chú ý thao tác trực tiếp dưới tia cực tím để tránh hư hỏng. Đèn cần được lau nhẹ nhàng bằng bông gòn tẩm cồn hai tuần một lần để loại bỏ bụi bẩn và dầu mỡ nhằm giảm tác động của tia cực tím xuyên qua.
4. Khi chế biến, cấy mẫu thực phẩm phải vào phòng vô trùng để thao tác và không được tự ý ra vào. Nếu cần chuyển vật phẩm, chúng có thể được chuyển qua cửa sổ nhỏ.
5. Nếu cần lắp điều hòa trong phòng vô trùng thì cần có thiết bị lọc.
Yêu cầu khử trùng và khử trùng
Đồ thủy tinh, đồ dùng bằng kim loại và môi trường nuôi cấy dùng đểxét nghiệm vi sinh, môi trường nuôi cấy bị ô nhiễm và đã cấy bệnh, v.v... phải được khử trùng trước khi sử dụng. Phương pháp khử trùng hơi nước bằng nhiệt khô và áp suất ẩm.
1. Chuẩn bị trước khi tiệt trùng
(1) Tất cả các vật dụng cần khử trùng phải được rửa sạch và sấy khô trước. Các đồ thủy tinh như ống hút và đĩa phẳng phải được gói chặt bằng giấy. Nếu sử dụng ống kim loại thì phải mở các lỗ thông gió trên chúng.
(2) Dùng giấy bọc nút bình tam giác chứa môi trường nuôi cấy, đậy nắp ống nghiệm và rút lõi ống tiêm ra rồi dùng gạc quấn lại.
2. cài đặt
(1) Máy tiệt trùng nhiệt khô: Các vật dụng không được để quá nhiều và không chạm vào bốn thành hộp.
(2) Nồi hấp áp suất cao lớn: Đặt các vật dụng đã tiệt trùng, bọc riêng và đặt trực tiếp vào xi lanh khử trùng. Đừng quá đông đúc các mặt hàng.
3. Kiểm tra thiết bị
(1) Kiểm tra xem công tắc cửa có linh hoạt hay không, vòng cao su có bị hỏng không và có bị xẹp không.
(2) Kiểm tra xem đồng hồ đo áp suất có ở vị trí 0 khi xả hết hơi nước hay không, đóng cửa và đậy nắp, thông gió bằng hơi nước hoặc nhiệt, đồng thời quan sát xem có rò rỉ không khí hay không, các điều kiện được đánh dấu bởi đồng hồ đo áp suất và nhiệt kế có khớp hay không và đường ống có bị tắc hay không.
(3) Đối với máy tiệt trùng có thiết bị điều khiển chương trình điện tử tự động, cần kiểm tra chương trình quy định trước khi sử dụng để xem liệu chương trình đó có đáp ứng các yêu cầu về khử trùng hay không.
4. Xử lý khử trùng
(1) Phương pháp khử trùng bằng nhiệt khô:
Phương pháp này phù hợp với những đồ vật không bị hư hỏng, hư hỏng hoặc bay hơi trong điều kiện nhiệt khô. Nó thường được sử dụng để khử trùng đồ thủy tinh, sản phẩm kim loại, sản phẩm gốm sứ, v.v.
①Dụng cụ và đồ dùng phải được rửa sạch trước khi sấy khô để tránh bụi bẩn bám trên bề mặt bị cacbon hóa.
② Trong quá trình khử trùng, các vật dụng không được để quá nhiều, không tiếp xúc trực tiếp với đáy và thành hộp, đồng thời chừa khoảng trống giữa các vật dụng.
③ Trong quá trình khử trùng, đóng chặt cửa, cắm nguồn điện, mở lỗ thoát khí trong khoảng 30 phút để thoát khí lạnh trong máy tiệt trùng, điều chỉnh đèn báo khi nhiệt độ tăng lên 160°C và duy trì trong 1,5 đến 2 giờ.
④Sau khi khử trùng xong hoặc trong quá trình tăng nhiệt độ, cửa phải được mở ở nhiệt độ dưới 60°C.
(2) Cần tuân thủ các bước sau khi sử dụng nồi áp suất di động hoặc máy tiệt trùng hơi nước áp suất thẳng đứng:
① Thêm 3L nước vào thân chính của nồi áp suất di động và 16L nước vào nồi áp suất đứng (lượng nước cần được bổ sung khi tái sử dụng và cần thay nước nếu nước bị đục);
② Đối với nồi áp suất di động, lắp ống xả ở nắp trên vào ống vuông ở thành trong của thùng khử trùng (không được sử dụng máy tiệt trùng không có ống mềm hoặc ống có ống bị ăn mòn và nứt);
③ Đậy nắp trên và vặn chặt để tránh rò rỉ không khí; đặt máy tiệt trùng lên nguồn lửa để đun nóng, bật nguồn nồi áp suất đứng và mở van xả ở nắp trên để thoát khí (thoát khí trong vòng 10 đến 15 phút sau khi nước sôi));
④Đóng van xả để tăng áp suất hơi lên yêu cầu quy định và duy trì áp suất đó trong thời gian quy định (tùy thuộc vào tính chất của vật phẩm đã được khử trùng và các trường hợp liên quan);
⑤ Sau khi đạt thời gian quy định, đối với những đồ cần sấy khô, ngay lập tức mở van xả để xả hơi nước. Khi áp suất về 0, làm nguội tự nhiên đến 60°C rồi mở nắp để lấy đồ ra. Nếu là chất lỏng, không mở van xả. Nồi phải được lấy ra khỏi nguồn nhiệt ngay lập tức và để nguội tự nhiên cho đến khi áp suất trở về 0 và nhiệt độ giảm xuống dưới 60°C trước khi mở nắp để lấy chất bên trong ra ngoài nhằm tránh hiện tượng chất lỏng bị giảm áp đột ngột do sôi mạnh hoặc nổ bình chứa.
(3) Thực hiện theo các bước sau để sử dụng máy tiệt trùng hơi nước nồi áp suất nằm:
①Đóng chặt cửa nồi, mở van nạp khí, đưa hơi nước vào gác lửng để làm nóng trước, không khí lạnh trên gác lửng sẽ tự động thoát ra ngoài qua tấm chắn không khí;
②Sau khi lớp xen kẽ đạt đến nhiệt độ xác định trước, hãy mở van nạp khí của khoang nồi, đưa hơi nước vào khoang nồi, không khí lạnh trong khoang nồi sẽ tự động thoát ra ngoài qua bộ ngăn khí buồng nồi;
③Khi áp suất và nhiệt độ trong buồng nồi đạt đến áp suất quy định, hãy điều chỉnh van nạp khí để giữ ổn định;
④ Làm mát nhiệt độ một cách tự nhiên hoặc nhân tạo xuống 60oC trước khi mở cửa lấy đồ ra. Không sử dụng phương pháp xả hơi nhanh để tránh giảm áp suất đột ngột, chất lỏng sôi mạnh hoặc nổ bình chứa;
⑤ Khi sử dụng chương trình tự động-máy tiệt trùng hơi nước áp suất có kiểm soát, sau khi đặt đồ vật và đóng chặt cửa, phải nhấn công tắc tương ứng tùy theo loại đồ vật để quá trình khử trùng có thể được thực hiện tự động theo quy trình yêu cầu. Trong quá trình khử trùng phải sử dụng dụng cụ kèm theo để ghi lại nhiệt độ và thời gian. Để tham khảo trong tương lai, các yêu cầu vận hành phải tuân thủ nghiêm ngặt hướng dẫn của nhà sản xuất;
5. Nhiệt độ và thời gian khử trùng
(1) Nhiệt độ khử trùng của máy tiệt trùng nhiệt khô là 160oC, 1,5 ~ 2h.
(2) Nhiệt độ và thời gian tiệt trùng của máy tiệt trùng hơi nước áp suất
Phương pháp khử trùng gián đoạn
1. Phương pháp khử trùng:
Sử dụng khử trùng bằng hơi nước mà không cần áp lực. Một số chất dễ bị phá hủy khi khử trùng bằng hơi nước áp suất cao nên phương pháp này có thể được sử dụng để khử trùng.
(1) Đặt các vật dụng cần khử trùng vào nồi, đậy nắp trên, mở cửa thoát nước và xả hết nước còn lại trong nồi.
(2) Đóng cửa thoát nước, mở cửa hút gió và khử trùng trong 10 đến 20 phút nếu cần.
(3) Sau khi khử trùng xong, đóng cửa hút gió, lấy đồ ra và đợi nguội đến nhiệt độ phòng, cho vào tủ ấm 37°C qua đêm và tiếp tục khử trùng theo phương pháp trên vào ngày hôm sau. Làm điều này ba lần để đạt được mục đích khử trùng.
2. Cách sử dụng máy đông máu huyết thanh:
Khi môi trường nuôi cấy có chứa các thành phần đặc biệt như huyết thanh hoặc trứng, nhiệt độ cao sẽ phá hủy các chất dinh dưỡng trong đó. Do đó, nhiệt độ thấp có thể được sử dụng để đông tụ huyết thanh và đạt được mục đích khử trùng:
(1) Khi sử dụng huyết thanh tiệt trùng theo phương pháp này để chia nhỏ, phải tuân thủ nghiêm ngặt các thao tác vô trùng, ống nghiệm và đĩa thử cũng phải được khử trùng trước khi sử dụng;
(2) Làm môi trường nuôi cấy thành dốc hoặc tầng cao theo yêu cầu. Sau khi thêm đủ nước, kết nối nguồn điện, tăng nhiệt độ lên 75 ~ 90°C trong một giờ rồi khử trùng. Đặt nó vào tủ ấm 37°C qua đêm, sau đó khử trùng ba lần.
3. Đun sôi và khử trùng:
Bạn có thể sử dụng nồi đun sôi hoặc máy tiệt trùng đun sôi. Sau khi nước sôi, đun sôi trong 5 đến 15 phút. Bạn cũng có thể thêm 2% axit carbolic vào nước và đun sôi trong 5 phút. Thêm 0,02% formaldehyde và đun sôi ở 80°C trong 60 phút để đạt được mục đích khử trùng. Tuy nhiên, khử trùng sôi có thể đạt được. Khi sử dụng chất tăng cường, cần chú ý đến khả năng ăn mòn của vật phẩm.
4. Xử lý khử trùng:
Sau khi khử trùng, các vật dụng đã được vô trùng trong điều kiện bình thường. Chúng phải được kiểm tra và đặt cẩn thận khi lấy ra khỏi máy tiệt trùng để tránh tái nhiễm bẩn;
(1) Lấy các mặt hàng ra và kiểm tra tính toàn vẹn của bao bì ngay lập tức. Nếu bị hư hỏng hoặc tampon bị tháo ra thì không thể sử dụng làm vật dụng vô trùng;
(2) Các vật dụng lấy ra không thể được sử dụng làm vật phẩm vô trùng nếu bao bì của chúng rõ ràng đã bị ngâm trong nước;
(3) Cần kiểm tra môi trường nuôi cấy hoặc thuốc thử để xem chúng có đáp ứng được màu sắc hoặc trạng thái sau khi khử trùng hay không. Những sản phẩm không đạt yêu cầu sẽ bị loại bỏ;
(4) Đối với các thùng chứa đóng mở, các lỗ lưới phải được đóng lại khi lấy chúng ra;
(5) Nếu đồ vật bị loại bỏ rơi xuống đất, đặt sai vị trí ở nơi không sạch sẽ hoặc bị dính nước, chúng được coi là bị ô nhiễm và không thể được sử dụng làm vật phẩm vô trùng;
(6) Những vật dụng đã tiệt trùng đủ tiêu chuẩn lấy ra phải được bảo quản trong phòng bảo quản hoặc tủ chống bụi, nghiêm cấm trộn lẫn chúng với những vật dụng chưa được khử trùng;
(7) Tất cả các mặt hàng đủ tiêu chuẩn phải được đánh dấu ngày khử trùng và ngày hết hạn;
(8) Sau khi hoàn thành mỗi đợt xử lý tiệt trùng, ghi lại tên, số lượng, nhiệt độ, thời gian và cách sử dụng của sản phẩm đã tiệt trùng.
Yêu cầu đối với việc xử lý chất thải độc hại và vi khuẩn
Các thiết bị thí nghiệm và môi trường nuôi cấy dùng trong thí nghiệm vi sinh không được phép mang ra khỏi phòng thí nghiệm khi chưa khử trùng.
1. Các vật liệu và chất thải nuôi cấy bị ô nhiễm phải được đặt trong các thùng chứa kín hoặc giỏ lưới và bảo quản tập trung tại các địa điểm được chỉ định cho đến khi chúng được hấp khử trùng đồng nhất.
2. Môi trường cấy bị nhiễm vi sinh vật phải được hấp khử trùng ở 121°C trong 30 phút.
3. Sau khi sử dụng, ống hút bị nhiễm bẩn phải được ngâm trong dung dịch xà phòng creol 5% hoặc dung dịch axit carbolic, ngâm ít nhất 24 giờ (chất lỏng khử trùng không được thấp hơn chiều cao ngâm), sau đó khử trùng bằng áp suất cao ở 121°C trong 30 phút.
4. Chất lỏng để nhuộm và rửa vết bẩn nói chung có thể được xả trực tiếp vào cống. Dung dịch rửa vi khuẩn độc hại phải được tráng qua cốc thủy tinh và khử trùng bằng áp suất cao trước khi đổ xuống cống. Các phiến kính đã nhuộm được cho vào dung dịch xà phòng cresol 5%. Sau khi ngâm trong nước 24 giờ, đun sôi và rửa sạch. Các phiến kính hoặc đĩa dùng để kiểm tra sự ngưng kết phải được hấp khử trùng và sau đó rửa sạch.
5. Sau khi phá vỡ chất cấy, ngay lập tức phun và ngâm những phần bị ô nhiễm bằng dung dịch xà phòng cresol 5% hoặc dung dịch axit carbolic, ngâm trong nửa giờ rồi lau sạch.
Quần áo làm việc hoặc quần áo làm việc, mũ, khẩu trang, v.v. bị nhiễm bẩn được mặc để thử nghiệm bạo lực phải được đặt trong túi khử trùng đặc biệt và khử trùng bằng áp suất cao trước khi giặt.
Yêu cầu chuẩn bị trung bình
Chất lượng chuẩn bị môi trường nuôi cấy sẽ ảnh hưởng trực tiếp đến sự phát triển của vi sinh vật, bởi vì các vi sinh vật khác nhau có yêu cầu dinh dưỡng khác nhau và mục đích nuôi cấy khác nhau. Các yêu cầu chuẩn bị cho các môi trường nuôi cấy khác nhau như sau:
1. Cân các thành phần theo công thức trung bình, sau đó hòa tan chúng trong nước cất. Chất lượng của thuốc thử và thuốc được sử dụng phải được kiểm tra trước khi sử dụng.
2. Đo và điều chỉnh pH: Việc đo pH nên được thực hiện khi môi trường nuôi cấy đã nguội đến nhiệt độ phòng, vì có sự chênh lệch nhất định về độ pH trong điều kiện nóng hoặc lạnh. Khi phép đo hoàn tất, thêm kiềm hoặc axit theo lượng tính toán và trộn đều. Nên kiểm tra lại. Giá trị pH của môi trường nuôi cấy phải chính xác, nếu không sẽ ảnh hưởng đến sự phát triển của vi sinh vật hoặc ảnh hưởng đến việc quan sát kết quả. Tuy nhiên, cần lưu ý rằng việc khử trùng bằng áp suất cao có thể ảnh hưởng đến việc giảm hoặc tăng độ pH của một số môi trường nuôi cấy, do đó không nên khử trùng ở áp suất quá cao hoặc quá nhiều lần để tránh ảnh hưởng đến chất lượng của môi trường nuôi cấy. Các chất chỉ thị, natri deoxycholate, thạch, v.v. thường được thêm vào sau khi điều chỉnh độ pH.
3. Môi trường nuôi cấy cần phải được giữ sạch sẽ để thuận tiện cho việc quan sát sự phát triển của vi khuẩn. Sau khi môi trường nuôi cấy được làm nóng và đun sôi, có thể lọc bằng bông thấm hoặc vải nỉ để loại bỏ cặn. Nếu cần thiết, nó có thể được làm rõ bằng lòng trắng trứng. Các dải thạch được sử dụng phải được rửa sạch và sấy khô trước. Trước khi sử dụng, tránh ảnh hưởng đến độ trong suốt do tạp chất trong thạch.
4. Không nên sử dụng sắt, đồng và các vật chứa khác để đựng môi trường nuôi cấy. Tốt hơn nên sử dụng hộp đựng bằng thủy tinh cứng trung tính sạch.
5. Việc khử trùng môi trường nuôi cấy không chỉ phải đạt được mục đích khử trùng hoàn toàn mà còn phải chú ý không làm giảm giá trị dinh dưỡng do đun nóng. Nói chung, 121°C trong 15 phút là đủ. Đối với môi trường nuôi cấy có chứa các chất không dung nạp được ở nhiệt độ cao như đường, huyết thanh, gelatin... cần tiệt trùng bằng phương pháp nhiệt độ thấp hoặc gián đoạn. Một số thuốc thử không thể đun nóng, chẳng hạn như kali telurit, lòng đỏ trứng, TTC, kháng sinh, v.v., nên được làm lạnh đến khoảng 50°C sau khi thạch cơ bản được hấp khử trùng rồi thêm vào;
6. Sau khi chuẩn bị xong mỗi mẻ môi trường nuôi cấy, phải thực hiện phép thử sinh trưởng vô trùng và phép thử sinh trưởng của các chủng được kiểm tra. Nếu là môi trường nuôi cấy sinh hóa, hãy sử dụng các chủng vi khuẩn tiêu chuẩn để cấy và nuôi cấy, đồng thời quan sát kết quả phản ứng sinh hóa. Nó sẽ hiển thị một phản ứng bình thường. Môi trường nuôi cấy không nên bảo quản quá lâu. Nếu cần, có thể bảo quản trong tủ lạnh 4°C.
7. Hiện nay có rất nhiều loại môi trường nuôi cấy khô. Mỗi mẻ cần sử dụng chủng chuẩn để thử nghiệm sinh trưởng hoặc quan sát phản ứng sinh hóa. Các môi trường nuôi cấy khác nhau chỉ có thể được sử dụng sau khi thử nghiệm tăng trưởng của các chủng tương ứng tốt. Những loại mới mua hoặc phơi khô, bảo quản lâu ngày đều có thể sử dụng được. Độ pH của môi trường nuôi cấy cũng phải được đo khi chuẩn bị, đồng thời phải tuân theo liều lượng và phương pháp theo hướng dẫn của sản phẩm.
8. Thuốc thử hóa học, điều kiện khử trùng, kết quả thử nghiệm tăng trưởng chủng và nhân viên sản xuất được sử dụng trong mỗi mẻ môi trường nuôi cấy đã chuẩn bị phải được ghi lại để điều tra.
Yêu cầu lấy và xử lý mẫu
1. Mẫu giám định thu thập phải có tính đại diện. Khi lấy mẫu, cần điều tra chi tiết nguyên liệu thô, phương pháp chế biến, vận chuyển, bảo quản và điều kiện của lô thực phẩm, điều kiện sức khỏe môi trường xung quanh, v.v. để kiểm tra xem có bất kỳ nguồn ô nhiễm nào hay không.
2. Tùy theo chủng loại và số lượng thực phẩm, số lượng và phương pháp lấy mẫu phải phù hợp với yêu cầu của phương pháp kiểm tra tiêu chuẩn.
3. Khi lấy mẫu, chú ý thao tác vô trùng, thùng chứa phải được khử trùng để tránh ô nhiễm vi sinh vật ra môi trường. Hộp đựng không được khử trùng bằng dung dịch xà phòng creosal, khử trùng bằng chlormethionine, rượu và các chất khử trùng khác và không được chứa các chất khử trùng hoặc kháng sinh đó. Để tránh làm chết vi sinh vật trong mẫu, kéo, dao, thìa sử dụng cũng phải được khử trùng trước khi sử dụng.
4. Mẫu phải được gửi đến phòng kiểm tra để kiểm tra ngay sau khi lấy mẫu. Quá trình kiểm tra thường không quá 3 giờ. Nếu khoảng cách dài, nó có thể được lưu trữ trong môi trường 1 ~ 5oC. Nếu cần đông lạnh thì nên bảo quản ở trạng thái đông lạnh. Gửi để kiểm tra.
5. Sau khi nhận mẫu, phòng kiểm tra sẽ tiến hành đăng ký (tên mẫu, đơn vị kiểm tra, số lượng, ngày tháng, số hiệu…) và quan sát hình thức bên ngoài của mẫu. Nếu phát hiện bất kỳ điều kiện nào sau đây, việc kiểm tra có thể bị từ chối:
(1) Các mẫu đã được khử trùng bằng áp suất cao, đun sôi hoặc các phương pháp khác sẽ mất đi ý nghĩa trong việc thể hiện thực phẩm ban đầu;
(2) Chai, túi đựng thực phẩm đã bị mở, thịt và các sản phẩm từ thịt đã nấu chín, thịt gia cầm nấu chín và các thực phẩm khác bị vỡ, không còn nguyên vẹn, tức là thực phẩm bị mất hình dạng ban đầu (trừ mẫu ngộ độc thực phẩm);
(3) Số lượng lấy mẫu không đủ theo yêu cầu;
Đối với các mẫu gửi đi kiểm tra đạt yêu cầu, phòng kiểm tra phải tiến hành kiểm tra ngay sau khi nhận được. Nếu chưa đạt điều kiện thì nên bảo quản trong tủ lạnh 4°C, chuẩn bị tạo điều kiện kịp thời rồi tiến hành kiểm tra.
6. Khi kiểm tra mẫu, hãy thực hiện xử lý thích hợp tùy theo các đặc tính khác nhau của chúng.
(1) Khi cấy các mẫu chất lỏng, chúng phải được trộn kỹ và cấy theo số lượng.
(2) Đối với mẫu rắn, dùng dao đã tiệt trùng cắt ra 25g các phần khác nhau, cho vào 225mL nước muối tiệt trùng hoặc dung dịch khác, nghiền nát và trộn bằng máy đồng nhất rồi cấy theo lượng.
(3) Chai và túi thực phẩm phải được mở bằng cách khử trùng, và các phương pháp trên phải được lựa chọn theo đặc điểm trước khi tiêm chủng.
Yêu cầu kiểm tra, ghi chép và báo cáo mẫu
1. Sau khi nhận được mẫu, phòng kiểm tra trước tiên sẽ tiến hành kiểm tra bề ngoài và nhanh chóng tiến hành kiểm tra theo phương pháp kiểm tra tiêu chuẩn quốc gia. Trong quá trình kiểm tra, các thao tác vô trùng phải được thực hiện cẩn thận, có trách nhiệm và nghiêm ngặt để tránhkết quả xét nghiệm vi sinh vậtô nhiễm trong môi trường.
2. Các phương pháp được sử dụng trong quá trình kiểm tra mẫu, các hiện tượng, kết quả xảy ra... phải được ghi vào biên bản kiểm nghiệm để làm cơ sở phân tích, nhận định kết quả. Hồ sơ phải chi tiết, rõ ràng, xác thực, khách quan, không được sửa đổi, giả mạo.
