微生物検査要件の概要
2024-01-24 15:14:33
要件と手順は、微生物検査は次のとおりです。
無菌操作の要件:
1.菌を接種する際は必ず作業服、作業帽を着用してください。
2. 食品サンプルを接種するときは、特別な作業服、帽子、スリッパを着用し、無菌室のバッファールームに置き、作業前にUV消毒してから使用する必要があります。
3. 食品サンプルを接種するときは、無菌室に入る前に石鹸で手を洗い、75% アルコールの綿球で手をきれいに拭きます。
4.接種に使用するストロー、平皿、培地は滅菌し、滅菌する必要があります。未使用の容器は、パッケージを開封した後、未使用のまま放置しないでください。金属製の調理器具は、使用前にオートクレーブ滅菌するか、95% アルコールで 3 回焼く必要があります。
5. ストローを袋から取り出す際は、ストローの先端が露出部分に触れないようにしてください。ストローを使用して試験管またはプレートに接種する場合、ストローの先端が試験管またはプレートの端に触れないようにしてください。
6. サンプルの接種および細菌の移入は、必ずアルコールランプの前で行ってください。細菌やサンプルを接種する場合、ストローをパッケージから取り出し、試験管の栓を開けた後、火炎滅菌する必要があります。
7. 細菌を接種する前に、接種ループと針のすべての金属線を火で燃やし、必要に応じてループ、針、ロッドの間の接続部を燃やす必要があります。結核菌および毒性菌を接種するための接種ループは、沸騰したお湯で 5 分間煮沸し、その後火で燃やします。
8. ストローで菌液や検体を吸引する場合は、対応するゴムチップを使用して吸引し、直接口で吸引しないでください。
無菌室の使用要件:
1. 無菌室の外に通じる窓は二重ガラスにし、密閉する必要があります。勝手に開けてはいけません。無菌室のサイズに応じたバッファールームと引き戸が必要です。 0.5～0.7㎡の小窓も必要です。無菌室に入ってから物品の受け渡しに備えます。
2. 無菌室は清潔に保つ必要があります。作業後は2～3%クレゾール石鹸液で消毒し、作業面を拭き、実験に関係のない物は保管しないでください。
3. 使用前後は無菌室のドアをしっかり閉め、紫外線ランプを点灯してください。屋内吊り下げ式紫外線ランプを消毒に使用する場合は、30W の紫外線ランプが必要です。距離は1.0m、照射時間は30分以上です。紫外線ランプを使用する場合は、損傷を避けるため、紫外線の直下で動作させるように注意してください。紫外線の侵入による影響を軽減するために、ランプは 2 週間ごとにアルコール綿で優しく拭いてほこりや油分を取り除く必要があります。
4. 食品検体の処理および接種を行う場合は、操作のために無菌室に立ち入り、自由に出入りすることはできません。物品の受け渡しが必要な場合は、小窓から受け渡しが可能です。
5. 無菌室に空調設備を設置する必要がある場合は、濾過装置を設置する必要があります。
消毒と滅菌の要件
用途に使用されるガラス器具、金属器具および培地微生物検査、汚染され接種された培養物などは、使用前に滅菌する必要があります。乾熱および湿熱加圧蒸気滅菌法。
1. 滅菌前の準備
(1) 滅菌が必要な物品はすべて、最初に洗浄して乾燥させてください。ストローや平らな皿などのガラス製品は紙でしっかりと梱包してください。金属チューブを使用する場合は、通気孔を開けてください。
(2) 培地の入った三角フラスコの栓を紙で包み、試験管に蓋をし、シリンジの芯を抜いてガーゼで包みます。
2.インストールする
(1) 乾熱滅菌器: 箱の四方の壁に物が触れないよう過密状態にしないでください。
(2) 大型高圧蒸気調理器：滅菌済みの物を入れ、別々に包み、滅菌シリンダーに直接入れます。アイテムを詰め込みすぎないでください。
3. 設備の点検
(1) ドアスイッチの柔軟性、ゴムリングの損傷、平坦度を確認してください。
(2) 蒸気が排出されたときに圧力計がゼロの位置にあるかどうかを確認し、扉とカバーを閉め、蒸気や熱を換気し、空気漏れがないか、圧力計と温度計のマークの条件が一致しているか、配管が詰まっていないかを観察します。
(3) 自動電子プログラム制御装置を備えた滅菌器については、指定されたプログラムが滅菌要件を満たしているかどうかを使用前に検査すること。
4. 滅菌処理
(1)乾熱滅菌法：
この方法は、乾熱条件下でも損傷、劣化、または蒸発しないアイテムに適しています。ガラス製品、金属製品、セラミック製品などの滅菌によく使用されます。
①器具や器具は、表面に付着した汚れが炭化するのを防ぐため、乾燥する前に洗ってください。
② 滅菌中は、物品を詰め込みすぎたり、箱の底や壁に直接触れたり、物品の間に隙間を作ったりしないでください。
③ 滅菌中はドアをしっかりと閉め、電源を接続し、排気口を開けて滅菌器内の冷気を約 30 分間開放し、温度が 160℃に上昇したら表示灯を調整し、1.5 ～ 2 時間維持します。
④滅菌終了後または昇温過程中は60℃以下で扉を開けてください。
(2) 携帯用圧力鍋や縦型圧力蒸気滅菌器を使用する場合は、次の手順に従ってください。
① 携帯圧力鍋本体に水3L、縦型圧力鍋に水16Lを入れます（再使用の際は水の量を補充し、水が濁ったら交換してください）。
② 携帯用圧力鍋の場合、トップカバーの排気管を滅菌バレル内壁の角筒に差し込みます（ホースのない滅菌器やホースが腐食・亀裂のある滅菌器は使用しないでください）。
③ 空気漏れを防ぐためにトップカバーをかぶせ、しっかりと締めます。滅菌器を火源の上に置いて加熱し、縦型圧力鍋の電源を入れ、上蓋の排気弁を開けて空気を抜きます（水が沸騰してから10〜15分間排気します）。
④排気バルブを閉じて、蒸気圧力を指定の要件まで高め、その圧力を指定の時間維持します（滅菌物の性質および関連する状況によって異なります）。
⑤ 乾燥が必要なものは、規定の時間が経過したら、直ちに排気弁を開いて蒸気を排出してください。圧力がゼロに戻ったら60℃まで自然冷却し、蓋を開けて取り出します。液体の場合は排気バルブを開けないでください。急激な沸騰や容器の爆発による液体の急激な減圧を防ぐため、鍋はすぐに熱源から外し、圧力がゼロに戻り温度が60℃以下になるまで自然冷却させてから蓋を開けて内容物を取り出してください。
(3) 横型圧力鍋蒸気滅菌器を使用するには、次の手順に従ってください。
①ポットのドアをしっかりと閉め、空気入口バルブを開き、予熱のためにメザニンに蒸気を導入します。メザニン内の冷たい空気は空気バリアを通って自動的に排出されます。
②中間層が所定の温度に達したら、ポット室の空気入口バルブを開き、蒸気をポット室に導入します。ポット室の冷気はポット室のエアアレスターを介して自動的に排出されます。
③ポット室内の圧力と温度が規定の圧力に達したら、空気入口バルブを調整して一定に保ちます。
④ 扉を開けて品物を取り出す前に、自然または人工的に温度を60℃まで下げてください。急激な圧力低下、液体の激しい沸騰、または容器の爆発を防ぐために、急速蒸気排出方法を使用しないでください。
⑤ 自動プログラム加圧蒸気滅菌器を使用する場合は、物品を置き、扉をしっかりと閉めた後、必要な手順に従って滅菌が自動的に行われるように、物品のカテゴリーに応じて対応するスイッチを押す必要があります。滅菌中は、付属の器具を使用して温度と時間を記録する必要があります。将来の参考のために、動作要件は製造元の指示に厳密に従ってください。
5. 滅菌温度と滅菌時間
(1) 乾熱滅菌器の滅菌温度は160℃、1.5～2時間です。
(2) 加圧蒸気滅菌器の滅菌温度と滅菌時間
間欠滅菌方式
1. 滅菌方法:
圧力をかけずに蒸気滅菌を行ってください。物質によっては高圧蒸気滅菌により容易に破壊されるため、この方法は滅菌に使用できる。
(1)ポットに滅菌物を入れ、上蓋をかぶせて排水口を開け、ポット内に残った水を捨てます。
(2) 必要に応じて排水口を閉め、空気取り入れ口のドアを開け、10～20分間消毒してください。
(3) 滅菌終了後、吸気口ドアを閉めて品物を取り出し、室温まで冷却し、37℃の恒温器に一晩入れ、翌日も上記の方法で滅菌を続けます。これを3回繰り返して殺菌の目的を達成します。
2. 血清凝固装置の使用方法:
培地に血清や卵などの特殊な成分が含まれている場合、高熱により栄養素が破壊されてしまいます。したがって、低温を使用して血清を凝固させ、滅菌の目的を達成することができます。
(1) この方法で滅菌した血清を分注して使用する場合は、無菌操作を厳守し、試験管やプレートも滅菌してから使用すること。
(2) 必要に応じて培地を斜面や高層にしてください。十分な水を加えた後、電源を接続し、温度を75〜90℃に1時間上げてから滅菌します。 37°Cのインキュベーターに一晩置き、滅菌を3回行います。
3. 煮沸消毒：
煮沸鍋や煮沸消毒器をご使用いただけます。水が沸騰したら、5〜15分間沸騰させます。 2% の石炭酸を水に加えて 5 分間沸騰させることもできます。 0.02%のホルムアルデヒドを加え、80℃で60分間煮沸すると、滅菌の目的が達成されます。ただし、煮沸消毒は可能です。強化剤を使用する場合は、アイテムの腐食性に注意する必要があります。
4.滅菌処理：
滅菌後のアイテムは、通常の状況ではすでに滅菌されています。再汚染を避けるために、滅菌器から取り出すときは注意深く検査し、配置する必要があります。
(1) すぐに商品を取り出し、梱包状態を確認してください。損傷がある場合、またはタンポンが取り外されている場合は、滅菌品として使用できません。
(2) 取り出した物品の包装が水に浸っていることが明らかな場合は、滅菌物品として使用できません。
(3) 培地や試薬は滅菌後の色や状態と一致しているか確認してください。要件を満たさないものは廃棄する必要があります。
(4) 開閉式の容器の場合、取り出す際にはスクリーンの穴を閉める必要がある。
(5) 取り出した物品が地面に落ちたり、不潔な場所に置き忘れたり、水で汚れたりした場合は汚染されているとみなされ、滅菌物品として使用できません。
(6) 取り出した適格な滅菌品は保管室または防塵キャビネットに保管し、未滅菌品と混合することは厳禁です。
(7) 認定されたすべての品目には、滅菌日と使用期限をマークする必要があります。
(8) 各バッチの滅菌処理が完了したら、滅菌した製品の名前、数量、温度、時間、作業者を記録します。
有毒廃棄物および細菌性廃棄物の処理要件
微生物実験に使用される実験器具や培養物は、消毒せずに実験室から持ち出してはなりません。
1. 培養された汚染物質と廃棄物は密閉容器またはワイヤーバスケットに入れ、均一にオートクレーブ滅菌されるまで指定された場所に集中して保管する必要があります。
2. 微生物によって汚染された培養物は、121°C で 30 分間オートクレーブ滅菌する必要があります。
3. 使用後、汚染されたストローを 5% クレオール石鹸溶液または石炭酸溶液に入れ、少なくとも 24 時間浸漬し (消毒液は浸漬高さより低くてはなりません)、その後 121°C で 30 分間高圧滅菌する必要があります。
4. 汚れを染色および洗い流すための液体は、通常、下水道に直接流すことができます。有毒細菌の洗浄液は、下水道に注ぐ前にビーカーに流し込み、高圧で滅菌する必要があります。染色したスライドを５％クレゾール石鹸溶液に入れる。 24時間水に浸した後、煮沸して洗います。凝集試験に使用するスライドまたはディッシュは、オートクレーブ滅菌してから洗浄する必要があります。
5. 培養物を破壊した後、直ちに汚染部分に 5% クレゾール石鹸溶液または石炭酸溶液をスプレーして浸し、30 分間浸してから拭き取ります。
汚染された作業服や暴力的な試験のために着用した作業服、帽子、マスクなどは、専用の消毒袋に入れて高圧で滅菌してから洗浄する必要があります。
培地の準備要件
さまざまな微生物は異なる栄養要件と異なる培養目的を持っているため、培地の調製の品質は微生物の成長に直接影響します。各種培地の準備要件は次のとおりです。
1. 培地の配合に従って材料を秤量し、蒸留水に溶解します。適用される試薬および薬剤の品質は、使用前に検査する必要があります。
2. pH の測定と調整: pH 測定は、高温または低温の条件下では pH に一定の違いがあるため、培地が室温まで冷却されたときに実行する必要があります。測定が終了したら、アルカリまたは酸を計算量に従って加え、よく混合します。もう一度テストする必要があります。培地の pH 値は正確でなければなりません。そうでないと、微生物の増殖や結果の観察に影響を及ぼします。ただし、高圧滅菌は一部の培地のpHの低下または増加に影響を与える可能性があるため、培地の品質への影響を避けるために高すぎる圧力または多すぎる回数で滅菌することはお勧めできません。指示薬、デオキシコール酸ナトリウム、寒天等は通常、pH調整後に添加します。
3. 細菌の増殖を観察しやすくするために、培地を透明に保つ必要があります。培地を加熱沸騰させた後、脱脂綿やネルなどでろ過して沈殿物を除去します。必要に応じて、卵白で清澄することができます。使用する寒天片は事前に洗浄し、乾燥させておく必要があります。寒天中の不純物による透明性への影響を避けてご使用ください。
4. 培地を入れるために鉄、銅、その他の容器を使用しないでください。清潔な中性硬質ガラス容器を使用することをお勧めします。
5. 培地の滅菌は、完全な滅菌という目的を達成するだけでなく、加熱により栄養価が低下しないように注意する必要があります。通常、121℃、15 分間で十分です。糖類、血清、ゼラチン等の高温に弱い物質を含む培地の場合は、低温または断続的な方法で滅菌する必要があります。亜テルル酸カリウム、卵黄、TTC、抗生物質など、加熱できない一部の試薬は、基本寒天をオートクレーブした後、約 50°C まで冷却してから添加する必要があります。
6. 各バッチの培地を調製した後、無菌増殖試験と試験菌株の増殖試験を実施する必要があります。生化学培地の場合は標準菌株を接種・培養し、生化学反応結果を観察します。正常な反応を示すはずです。培地はあまり長期間保存しないでください。必要に応じて、4℃の冷蔵庫に保管できます。
7. 現在、乾燥培地には多くの種類があります。各バッチでは、生育試験や生化学反応観察用の標準菌株を使用する必要があります。各種培地は、対応する株の生育試験が良好な場合にのみ使用できます。新しく購入したものでも、乾燥させて長期保管したものでも使用可能です。培地のpHも測定して調製し、使用量や方法は製品の説明書に従ってください。
8. 調製した培養培地の各バッチに使用した化学試薬、滅菌条件、菌株増殖試験結果、および製造担当者を調査のために記録する必要があります。
サンプルの収集と処理の要件
1. 収集された検査サンプルは代表的なものでなければなりません。サンプリングの際には、食品バッチの原材料、加工、輸送、保管方法と条件、周囲の環境衛生条件などを詳細に調査し、汚染源が存在するかどうかを確認する必要があります。
2. 食品の種類と量に応じて、標準検査方法の要求に従ってサンプリング量と方法を実施する必要があります。
3. サンプリング時は無菌操作に注意し、環境中の微生物汚染を避けるために容器を滅菌する必要があります。容器は、クレオサール石鹸液による滅菌、クロルメチオニン、アルコール、その他の消毒剤による滅菌を行ってはならず、また、そのような消毒剤や抗生物質を含んでいてはなりません。サンプル中の微生物の死滅を避けるために、使用するハサミ、ナイフ、スプーンも使用前に滅菌する必要があります。
4. サンプルは採取後直ちに検査室に送って検査してください。検査プロセスは通常 3 時間を超えません。距離が遠い場合は1～5℃の環境でも保管可能です。冷凍が必要な場合は、冷凍状態で保存してください。検査のために提出します。
5. 検査室はサンプルを受け取った後、サンプルを登録（サンプル名、検査単位、数量、日付、番号など）し、サンプルの外観を観察します。以下のいずれかに該当する場合、検査をお断りする場合がございます。
(1) 特別な高圧、煮沸その他の方法により滅菌されたサンプルは、元の食品を表す意味を失います。
(2) 食品の瓶や袋が開封され、調理された肉およびその製品、調理された鶏肉およびその他の食品が破損し、不完全である、つまり食品の元の形状が失われた場合（食中毒サンプルを除く）。
(3) 必要なサンプリング量が不足している場合。
検査に提出されたサンプルが要件を満たしている場合、検査室は受領後直ちに検査を実施する必要があります。条件が満たされていない場合は、4℃の冷蔵庫に保管し、時間内に条件を作成する準備をしてから検査を実行する必要があります。
6. サンプルを検査する際には、サンプルの特性に応じて適切な処理を行ってください。
(1) 液体試料を接種する場合は、十分に混合し、量に応じて接種してください。
(2) 固体試料の場合は、滅菌ナイフを用いて各部位 25g を切り出し、滅菌生理食塩水等 225mL に入れ、ホモジナイザーで粉砕・混合し、分量に応じて接種する。
(3) 食品のビンや袋は開封し、滅菌し、上記の方法を特性に応じて選択して接種すること。
サンプルの検査、記録、報告の要件
1. サンプルを受け取った後、検査室はまず外観検査を実施し、国家標準検査方法に従って速やかに検査を実施します。検査プロセス中は、無菌操作を慎重に、責任を持って、厳密に実行して、危険を回避する必要があります。微生物検査結果環境中の汚染。
2. サンプル検査の過程で使用された方法、発生した現象と結果などは、結果の分析と判断の基礎として書面による検査記録に記載されなければなりません。記録は詳細、明確、本物、客観的である必要があり、改ざんまたは偽造してはなりません。
無菌操作の要件:
1.菌を接種する際は必ず作業服、作業帽を着用してください。
2. 食品サンプルを接種するときは、特別な作業服、帽子、スリッパを着用し、無菌室のバッファールームに置き、作業前にUV消毒してから使用する必要があります。
3. 食品サンプルを接種するときは、無菌室に入る前に石鹸で手を洗い、75% アルコールの綿球で手をきれいに拭きます。
4.接種に使用するストロー、平皿、培地は滅菌し、滅菌する必要があります。未使用の容器は、パッケージを開封した後、未使用のまま放置しないでください。金属製の調理器具は、使用前にオートクレーブ滅菌するか、95% アルコールで 3 回焼く必要があります。
5. ストローを袋から取り出す際は、ストローの先端が露出部分に触れないようにしてください。ストローを使用して試験管またはプレートに接種する場合、ストローの先端が試験管またはプレートの端に触れないようにしてください。
6. サンプルの接種および細菌の移入は、必ずアルコールランプの前で行ってください。細菌やサンプルを接種する場合、ストローをパッケージから取り出し、試験管の栓を開けた後、火炎滅菌する必要があります。
7. 細菌を接種する前に、接種ループと針のすべての金属線を火で燃やし、必要に応じてループ、針、ロッドの間の接続部を燃やす必要があります。結核菌および毒性菌を接種するための接種ループは、沸騰したお湯で 5 分間煮沸し、その後火で燃やします。
8. ストローで菌液や検体を吸引する場合は、対応するゴムチップを使用して吸引し、直接口で吸引しないでください。
無菌室の使用要件:
1. 無菌室の外に通じる窓は二重ガラスにし、密閉する必要があります。勝手に開けてはいけません。無菌室のサイズに応じたバッファールームと引き戸が必要です。 0.5～0.7㎡の小窓も必要です。無菌室に入ってから物品の受け渡しに備えます。
2. 無菌室は清潔に保つ必要があります。作業後は2～3%クレゾール石鹸液で消毒し、作業面を拭き、実験に関係のない物は保管しないでください。
3. 使用前後は無菌室のドアをしっかり閉め、紫外線ランプを点灯してください。屋内吊り下げ式紫外線ランプを消毒に使用する場合は、30W の紫外線ランプが必要です。距離は1.0m、照射時間は30分以上です。紫外線ランプを使用する場合は、損傷を避けるため、紫外線の直下で動作させるように注意してください。紫外線の侵入による影響を軽減するために、ランプは 2 週間ごとにアルコール綿で優しく拭いてほこりや油分を取り除く必要があります。
4. 食品検体の処理および接種を行う場合は、操作のために無菌室に立ち入り、自由に出入りすることはできません。物品の受け渡しが必要な場合は、小窓から受け渡しが可能です。
5. 無菌室に空調設備を設置する必要がある場合は、濾過装置を設置する必要があります。
消毒と滅菌の要件
用途に使用されるガラス器具、金属器具および培地微生物検査、汚染され接種された培養物などは、使用前に滅菌する必要があります。乾熱および湿熱加圧蒸気滅菌法。
1. 滅菌前の準備
(1) 滅菌が必要な物品はすべて、最初に洗浄して乾燥させてください。ストローや平らな皿などのガラス製品は紙でしっかりと梱包してください。金属チューブを使用する場合は、通気孔を開けてください。
(2) 培地の入った三角フラスコの栓を紙で包み、試験管に蓋をし、シリンジの芯を抜いてガーゼで包みます。
2.インストールする
(1) 乾熱滅菌器: 箱の四方の壁に物が触れないよう過密状態にしないでください。
(2) 大型高圧蒸気調理器：滅菌済みの物を入れ、別々に包み、滅菌シリンダーに直接入れます。アイテムを詰め込みすぎないでください。
3. 設備の点検
(1) ドアスイッチの柔軟性、ゴムリングの損傷、平坦度を確認してください。
(2) 蒸気が排出されたときに圧力計がゼロの位置にあるかどうかを確認し、扉とカバーを閉め、蒸気や熱を換気し、空気漏れがないか、圧力計と温度計のマークの条件が一致しているか、配管が詰まっていないかを観察します。
(3) 自動電子プログラム制御装置を備えた滅菌器については、指定されたプログラムが滅菌要件を満たしているかどうかを使用前に検査すること。
4. 滅菌処理
(1)乾熱滅菌法：
この方法は、乾熱条件下でも損傷、劣化、または蒸発しないアイテムに適しています。ガラス製品、金属製品、セラミック製品などの滅菌によく使用されます。
①器具や器具は、表面に付着した汚れが炭化するのを防ぐため、乾燥する前に洗ってください。
② 滅菌中は、物品を詰め込みすぎたり、箱の底や壁に直接触れたり、物品の間に隙間を作ったりしないでください。
③ 滅菌中はドアをしっかりと閉め、電源を接続し、排気口を開けて滅菌器内の冷気を約 30 分間開放し、温度が 160℃に上昇したら表示灯を調整し、1.5 ～ 2 時間維持します。
④滅菌終了後または昇温過程中は60℃以下で扉を開けてください。
(2) 携帯用圧力鍋や縦型圧力蒸気滅菌器を使用する場合は、次の手順に従ってください。
① 携帯圧力鍋本体に水3L、縦型圧力鍋に水16Lを入れます（再使用の際は水の量を補充し、水が濁ったら交換してください）。
② 携帯用圧力鍋の場合、トップカバーの排気管を滅菌バレル内壁の角筒に差し込みます（ホースのない滅菌器やホースが腐食・亀裂のある滅菌器は使用しないでください）。
③ 空気漏れを防ぐためにトップカバーをかぶせ、しっかりと締めます。滅菌器を火源の上に置いて加熱し、縦型圧力鍋の電源を入れ、上蓋の排気弁を開けて空気を抜きます（水が沸騰してから10〜15分間排気します）。
④排気バルブを閉じて、蒸気圧力を指定の要件まで高め、その圧力を指定の時間維持します（滅菌物の性質および関連する状況によって異なります）。
⑤ 乾燥が必要なものは、規定の時間が経過したら、直ちに排気弁を開いて蒸気を排出してください。圧力がゼロに戻ったら60℃まで自然冷却し、蓋を開けて取り出します。液体の場合は排気バルブを開けないでください。急激な沸騰や容器の爆発による液体の急激な減圧を防ぐため、鍋はすぐに熱源から外し、圧力がゼロに戻り温度が60℃以下になるまで自然冷却させてから蓋を開けて内容物を取り出してください。
(3) 横型圧力鍋蒸気滅菌器を使用するには、次の手順に従ってください。
①ポットのドアをしっかりと閉め、空気入口バルブを開き、予熱のためにメザニンに蒸気を導入します。メザニン内の冷たい空気は空気バリアを通って自動的に排出されます。
②中間層が所定の温度に達したら、ポット室の空気入口バルブを開き、蒸気をポット室に導入します。ポット室の冷気はポット室のエアアレスターを介して自動的に排出されます。
③ポット室内の圧力と温度が規定の圧力に達したら、空気入口バルブを調整して一定に保ちます。
④ 扉を開けて品物を取り出す前に、自然または人工的に温度を60℃まで下げてください。急激な圧力低下、液体の激しい沸騰、または容器の爆発を防ぐために、急速蒸気排出方法を使用しないでください。
⑤ 自動プログラム加圧蒸気滅菌器を使用する場合は、物品を置き、扉をしっかりと閉めた後、必要な手順に従って滅菌が自動的に行われるように、物品のカテゴリーに応じて対応するスイッチを押す必要があります。滅菌中は、付属の器具を使用して温度と時間を記録する必要があります。将来の参考のために、動作要件は製造元の指示に厳密に従ってください。
5. 滅菌温度と滅菌時間
(1) 乾熱滅菌器の滅菌温度は160℃、1.5～2時間です。
(2) 加圧蒸気滅菌器の滅菌温度と滅菌時間
間欠滅菌方式
1. 滅菌方法:
圧力をかけずに蒸気滅菌を行ってください。物質によっては高圧蒸気滅菌により容易に破壊されるため、この方法は滅菌に使用できる。
(1)ポットに滅菌物を入れ、上蓋をかぶせて排水口を開け、ポット内に残った水を捨てます。
(2) 必要に応じて排水口を閉め、空気取り入れ口のドアを開け、10～20分間消毒してください。
(3) 滅菌終了後、吸気口ドアを閉めて品物を取り出し、室温まで冷却し、37℃の恒温器に一晩入れ、翌日も上記の方法で滅菌を続けます。これを3回繰り返して殺菌の目的を達成します。
2. 血清凝固装置の使用方法:
培地に血清や卵などの特殊な成分が含まれている場合、高熱により栄養素が破壊されてしまいます。したがって、低温を使用して血清を凝固させ、滅菌の目的を達成することができます。
(1) この方法で滅菌した血清を分注して使用する場合は、無菌操作を厳守し、試験管やプレートも滅菌してから使用すること。
(2) 必要に応じて培地を斜面や高層にしてください。十分な水を加えた後、電源を接続し、温度を75〜90℃に1時間上げてから滅菌します。 37°Cのインキュベーターに一晩置き、滅菌を3回行います。
3. 煮沸消毒：
煮沸鍋や煮沸消毒器をご使用いただけます。水が沸騰したら、5〜15分間沸騰させます。 2% の石炭酸を水に加えて 5 分間沸騰させることもできます。 0.02%のホルムアルデヒドを加え、80℃で60分間煮沸すると、滅菌の目的が達成されます。ただし、煮沸消毒は可能です。強化剤を使用する場合は、アイテムの腐食性に注意する必要があります。
4.滅菌処理：
滅菌後のアイテムは、通常の状況ではすでに滅菌されています。再汚染を避けるために、滅菌器から取り出すときは注意深く検査し、配置する必要があります。
(1) すぐに商品を取り出し、梱包状態を確認してください。損傷がある場合、またはタンポンが取り外されている場合は、滅菌品として使用できません。
(2) 取り出した物品の包装が水に浸っていることが明らかな場合は、滅菌物品として使用できません。
(3) 培地や試薬は滅菌後の色や状態と一致しているか確認してください。要件を満たさないものは廃棄する必要があります。
(4) 開閉式の容器の場合、取り出す際にはスクリーンの穴を閉める必要がある。
(5) 取り出した物品が地面に落ちたり、不潔な場所に置き忘れたり、水で汚れたりした場合は汚染されているとみなされ、滅菌物品として使用できません。
(6) 取り出した適格な滅菌品は保管室または防塵キャビネットに保管し、未滅菌品と混合することは厳禁です。
(7) 認定されたすべての品目には、滅菌日と使用期限をマークする必要があります。
(8) 各バッチの滅菌処理が完了したら、滅菌した製品の名前、数量、温度、時間、作業者を記録します。
有毒廃棄物および細菌性廃棄物の処理要件
微生物実験に使用される実験器具や培養物は、消毒せずに実験室から持ち出してはなりません。
1. 培養された汚染物質と廃棄物は密閉容器またはワイヤーバスケットに入れ、均一にオートクレーブ滅菌されるまで指定された場所に集中して保管する必要があります。
2. 微生物によって汚染された培養物は、121°C で 30 分間オートクレーブ滅菌する必要があります。
3. 使用後、汚染されたストローを 5% クレオール石鹸溶液または石炭酸溶液に入れ、少なくとも 24 時間浸漬し (消毒液は浸漬高さより低くてはなりません)、その後 121°C で 30 分間高圧滅菌する必要があります。
4. 汚れを染色および洗い流すための液体は、通常、下水道に直接流すことができます。有毒細菌の洗浄液は、下水道に注ぐ前にビーカーに流し込み、高圧で滅菌する必要があります。染色したスライドを５％クレゾール石鹸溶液に入れる。 24時間水に浸した後、煮沸して洗います。凝集試験に使用するスライドまたはディッシュは、オートクレーブ滅菌してから洗浄する必要があります。
5. 培養物を破壊した後、直ちに汚染部分に 5% クレゾール石鹸溶液または石炭酸溶液をスプレーして浸し、30 分間浸してから拭き取ります。
汚染された作業服や暴力的な試験のために着用した作業服、帽子、マスクなどは、専用の消毒袋に入れて高圧で滅菌してから洗浄する必要があります。
培地の準備要件
さまざまな微生物は異なる栄養要件と異なる培養目的を持っているため、培地の調製の品質は微生物の成長に直接影響します。各種培地の準備要件は次のとおりです。
1. 培地の配合に従って材料を秤量し、蒸留水に溶解します。適用される試薬および薬剤の品質は、使用前に検査する必要があります。
2. pH の測定と調整: pH 測定は、高温または低温の条件下では pH に一定の違いがあるため、培地が室温まで冷却されたときに実行する必要があります。測定が終了したら、アルカリまたは酸を計算量に従って加え、よく混合します。もう一度テストする必要があります。培地の pH 値は正確でなければなりません。そうでないと、微生物の増殖や結果の観察に影響を及ぼします。ただし、高圧滅菌は一部の培地のpHの低下または増加に影響を与える可能性があるため、培地の品質への影響を避けるために高すぎる圧力または多すぎる回数で滅菌することはお勧めできません。指示薬、デオキシコール酸ナトリウム、寒天等は通常、pH調整後に添加します。
3. 細菌の増殖を観察しやすくするために、培地を透明に保つ必要があります。培地を加熱沸騰させた後、脱脂綿やネルなどでろ過して沈殿物を除去します。必要に応じて、卵白で清澄することができます。使用する寒天片は事前に洗浄し、乾燥させておく必要があります。寒天中の不純物による透明性への影響を避けてご使用ください。
4. 培地を入れるために鉄、銅、その他の容器を使用しないでください。清潔な中性硬質ガラス容器を使用することをお勧めします。
5. 培地の滅菌は、完全な滅菌という目的を達成するだけでなく、加熱により栄養価が低下しないように注意する必要があります。通常、121℃、15 分間で十分です。糖類、血清、ゼラチン等の高温に弱い物質を含む培地の場合は、低温または断続的な方法で滅菌する必要があります。亜テルル酸カリウム、卵黄、TTC、抗生物質など、加熱できない一部の試薬は、基本寒天をオートクレーブした後、約 50°C まで冷却してから添加する必要があります。
6. 各バッチの培地を調製した後、無菌増殖試験と試験菌株の増殖試験を実施する必要があります。生化学培地の場合は標準菌株を接種・培養し、生化学反応結果を観察します。正常な反応を示すはずです。培地はあまり長期間保存しないでください。必要に応じて、4℃の冷蔵庫に保管できます。
7. 現在、乾燥培地には多くの種類があります。各バッチでは、生育試験や生化学反応観察用の標準菌株を使用する必要があります。各種培地は、対応する株の生育試験が良好な場合にのみ使用できます。新しく購入したものでも、乾燥させて長期保管したものでも使用可能です。培地のpHも測定して調製し、使用量や方法は製品の説明書に従ってください。
8. 調製した培養培地の各バッチに使用した化学試薬、滅菌条件、菌株増殖試験結果、および製造担当者を調査のために記録する必要があります。
サンプルの収集と処理の要件
1. 収集された検査サンプルは代表的なものでなければなりません。サンプリングの際には、食品バッチの原材料、加工、輸送、保管方法と条件、周囲の環境衛生条件などを詳細に調査し、汚染源が存在するかどうかを確認する必要があります。
2. 食品の種類と量に応じて、標準検査方法の要求に従ってサンプリング量と方法を実施する必要があります。
3. サンプリング時は無菌操作に注意し、環境中の微生物汚染を避けるために容器を滅菌する必要があります。容器は、クレオサール石鹸液による滅菌、クロルメチオニン、アルコール、その他の消毒剤による滅菌を行ってはならず、また、そのような消毒剤や抗生物質を含んでいてはなりません。サンプル中の微生物の死滅を避けるために、使用するハサミ、ナイフ、スプーンも使用前に滅菌する必要があります。
4. サンプルは採取後直ちに検査室に送って検査してください。検査プロセスは通常 3 時間を超えません。距離が遠い場合は1～5℃の環境でも保管可能です。冷凍が必要な場合は、冷凍状態で保存してください。検査のために提出します。
5. 検査室はサンプルを受け取った後、サンプルを登録（サンプル名、検査単位、数量、日付、番号など）し、サンプルの外観を観察します。以下のいずれかに該当する場合、検査をお断りする場合がございます。
(1) 特別な高圧、煮沸その他の方法により滅菌されたサンプルは、元の食品を表す意味を失います。
(2) 食品の瓶や袋が開封され、調理された肉およびその製品、調理された鶏肉およびその他の食品が破損し、不完全である、つまり食品の元の形状が失われた場合（食中毒サンプルを除く）。
(3) 必要なサンプリング量が不足している場合。
検査に提出されたサンプルが要件を満たしている場合、検査室は受領後直ちに検査を実施する必要があります。条件が満たされていない場合は、4℃の冷蔵庫に保管し、時間内に条件を作成する準備をしてから検査を実行する必要があります。
6. サンプルを検査する際には、サンプルの特性に応じて適切な処理を行ってください。
(1) 液体試料を接種する場合は、十分に混合し、量に応じて接種してください。
(2) 固体試料の場合は、滅菌ナイフを用いて各部位 25g を切り出し、滅菌生理食塩水等 225mL に入れ、ホモジナイザーで粉砕・混合し、分量に応じて接種する。
(3) 食品のビンや袋は開封し、滅菌し、上記の方法を特性に応じて選択して接種すること。
サンプルの検査、記録、報告の要件
1. サンプルを受け取った後、検査室はまず外観検査を実施し、国家標準検査方法に従って速やかに検査を実施します。検査プロセス中は、無菌操作を慎重に、責任を持って、厳密に実行して、危険を回避する必要があります。微生物検査結果環境中の汚染。
2. サンプル検査の過程で使用された方法、発生した現象と結果などは、結果の分析と判断の基礎として書面による検査記録に記載されなければなりません。記録は詳細、明確、本物、客観的である必要があり、改ざんまたは偽造してはなりません。
