Ringkesan syarat tes mikrobiologis
2024-01-24 15:14:33
Syarat lan langkah kanggotes mikrobiologisyaiku kaya ing ngisor iki:
Syarat operasi aseptik:
1. Sampeyan kudu nganggo sandhangan kerja lan tutup kerja nalika inokulasi bakteri.
2. Nalika inokulasi conto panganan, sandhangan kerja khusus, tutup lan sandal kudu dianggo, sing kudu dilebokake ing ruang penyangga kamar steril lan digunakake sawise disinfeksi UV sadurunge kerja.
3. Nalika inokulasi conto panganan, wisuh tangan nganggo sabun sadurunge mlebu kamar steril, banjur usap tangan nganggo bal kapas alkohol 75%.
4. Sedotan, piring datar lan media kultur sing digunakake kanggo inokulasi kudu disterilisasi lan disterilisasi. Wadhah sing ora digunakake kudu ora ditinggalake sawise mbukak paket kasebut. Piranti logam kudu diautoklaf utawa diobong kaping telu nganggo alkohol 95% sadurunge digunakake.
5. Nalika njupuk jerami metu saka paket, pucuk jerami kudu ora ndemek bagian sing katon. Nalika nggunakake jerami kanggo inokulasi tabung uji utawa piring, pucuk jerami ora kena ndemek pinggir tabung uji utawa piring.
6. Inokulasi sampel lan transfer bakteri kudu ditindakake ing ngarep lampu alkohol. Nalika inokulasi bakteri utawa conto, jerami kudu disterilisasi kanthi nyala sawise njupuk metu saka paket lan mbukak stopper tabung uji.
7. Sadurunge inokulasi bakteri, kabeh kabel logam saka daur ulang inokulasi lan jarum kudu diobong nganggo nyala, lan yen perlu, sambungan antarane daur ulang, jarum lan rod kudu diobong. Loop inokulasi kanggo inokulasi bakteri tuberkulosis lan bakteri virulen kudu digodhog ing banyu sing nggodhok suwene 5 menit, banjur diobong nganggo geni.
8. Nalika nyedhot cairan bakteri utawa conto nganggo jerami, gunakake ujung karet sing cocog kanggo nyedhot, lan aja nyedhot langsung nganggo cangkeme.
Syarat panggunaan kamar steril:
1. Jendela-jendela sing ana ing njaba kamar steril kudu dilapisi kaca lan ditutup. Padha ora kudu dibukak ing bakal. Mesthine ana ruangan penyangga lan lawang geser sing cocog karo ukuran ruangan steril. Uga kudu ana jendhela cilik 0,5 ~ 0,7m2. Ing preparation kanggo maringaken item sawise ngetik kamar steril.
2. Kamar sing steril kudu tetep resik. Sawise kerja, kudu disinfeksi nganggo larutan sabun cresol 2% nganti 3%, permukaan kerja kudu diusap, lan barang sing ora ana gandhengane karo eksperimen ora kudu disimpen.
3. Lawang kamar steril kudu ditutup kanthi rapet sadurunge lan sawise digunakake, lan lampu ultraviolet kudu diuripake. Yen lampu ultraviolet sing digantung ing njero ruangan digunakake kanggo disinfeksi, lampu ultraviolet 30W dibutuhake. Jarake 1.0m, lan wektu iradiasi ora kurang saka 30 menit. Nalika nggunakake lampu ultraviolet, manungsa waé kudu mbayar kanggo operate langsung ing cahya ultraviolet supaya karusakan. Lampu kasebut kudu diusap kanthi alon-alon nganggo bal katun alkohol saben rong minggu kanggo mbusak bledug lan pelumas kanggo nyuda pengaruh penetrasi ultraviolet.
4. Nalika ngolah lan inokulasi spesimen panganan, ketik kamar steril kanggo operasi lan ora diijini mlebu utawa metu ing karsane. Yen item kudu diterusake, bisa dilewati liwat jendhela cilik.
5. Yen AC perlu dipasang ing kamar steril, kudu ana piranti nyaring.
Persyaratan Disinfeksi lan Sterilisasi
Gelas, piranti logam lan media kultur digunakake kanggotes mikrobiologis, budaya sing kontaminasi lan inokulasi, lan liya-liyane kudu disterilisasi sadurunge digunakake. Metode sterilisasi uap tekanan panas garing lan lembab.
1. Preparation sadurunge sterilization
(1) Kabeh barang sing kudu disterilisasi kudu dikumbah lan dikeringake dhisik. Barang kaca kayata sedotan lan piring sing rata kudu dibungkus kertas kanthi rapet. Yen tabung logam digunakake, bolongan ventilasi kudu dibukak.
(2) Bungkus stopper labu segi telu sing ngemot media kultur ing kertas, tutup tabung uji, lan tarik inti jarum suntik, lan bungkus nganggo gauze.
2. nginstal
(1) Sterilizer panas garing: Barang-barang kasebut ora kena rame lan ora bisa ndemek papat tembok kothak.
(2) Kompor uap tekanan dhuwur sing gedhe: Selehake barang sing wis disteril, bungkus kanthi kapisah, banjur lebokake langsung menyang silinder sterilisasi. Aja akeh barang.
3. Inspeksi peralatan
(1) Priksa manawa ngalih lawang iku fleksibel, apa ring karet rusak lan apa iku warata.
(2) Priksa manawa tolok tekanan tetep ing posisi nol nalika uap kesel, nutup lawang lan tutup, ventilasi uap utawa panas, lan priksa manawa ana bocor udara, apa kahanan sing ditandhani karo ukuran tekanan lan thermometer cocog, lan manawa saluran pipa diblokir.
(3) Kanggo sterilizers karo piranti kontrol program elektronik otomatis, program kasebut kudu dicenthang sadurunge digunakake kanggo ndeleng apa iku meets syarat kanggo sterilization.
4. Pangobatan sterilisasi
(1) Metode sterilisasi panas kering:
Cara iki cocok kanggo barang sing ora ngrusak, rusak, utawa nguap ing kahanan panas garing. Luwih umum digunakake kanggo sterilisasi barang kaca, produk logam, produk keramik, lsp.
①Instrumen lan piranti kudu dikumbah sadurunge garing-panggang kanggo nyegah rereget sing nempel ing permukaan ora dadi karbon.
② Sajrone sterilisasi, barang-barang kasebut ora kena rame, aja langsung ngubungi ngisor lan tembok kothak, lan ninggalake celah ing antarane barang.
③ Sajrone sterilisasi, tutup lawang kanthi kenceng, sambungake sumber daya, bukak bolongan knalpot sajrone udakara 30 menit kanggo mbusak hawa adhem ing sterilisasi, atur lampu indikator nalika suhu mundhak nganti 160 ° C, lan njaga nganti 1,5 nganti 2 jam.
④Sawise sterilisasi rampung utawa sajrone proses kenaikan suhu, lawang kudu dibukak ing ngisor 60 ° C.
(2) Langkah-langkah ing ngisor iki kudu ditindakake nalika nggunakake kompor tekanan portabel utawa sterilisasi uap tekanan vertikal:
① Tambah banyu 3L menyang awak utama kompor tekanan portabel, lan banyu 16L menyang kompor tekanan vertikal (jumlah banyu kudu diisi maneh nalika digunakake maneh, lan banyu kudu diganti yen dadi keruh);
② Kanggo kompor tekanan portabel, lebokake pipa knalpot ing tutup ndhuwur menyang tabung kothak ing tembok njero tong sterilisasi (sterilizer tanpa selang utawa sing nganggo selang corroded lan retak ora kudu digunakake);
③ Tutup tutup ndhuwur lan kenceng kanggo nyegah bocor udara; nyeleh sterilizer ing sumber geni kanggo dadi panas, nguripake daya saka kompor tekanan vertikal, lan mbukak tutup exhaust ing tutup ndhuwur supaya metu udhara (exhaust online kanggo 10 kanggo 15 menit sawise godhok banyu) );
④Tutup katup exhaust kanggo ngunggahake tekanan uap menyang syarat sing ditemtokake lan njaga kanggo wektu sing ditemtokake (gumantung saka sifat barang sing disterilisasi lan kahanan sing cocog);
⑤ Sawise wektu sing ditemtokake wis tekan, kanggo barang-barang sing kudu dikeringake, bukak katup knalpot kanggo ngeculake uap. Nalika tekanan bali menyang nol, adhem kanthi alami nganti 60 ° C banjur bukak tutup kanggo njupuk barang kasebut. Yen barang cair, aja mbukak tutup knalpot. Panci kudu dicopot saka sumber panas langsung lan diidini adhem kanthi alami nganti tekanan bali menyang nol lan suhu mudhun ing ngisor 60 ° C sadurunge mbukak tutup kanggo njupuk isi kanggo nyegah dekompresi dadakan saka cairan saka nggodhok utawa bledosan saka wadhah.
(3) Tindakake langkah-langkah ing ngisor iki kanggo nggunakake sterilizer uap kompor tekanan horisontal:
①Tutup lawang pot kanthi kenceng, bukak tutup inlet udara, ngenalake uap menyang mezzanine kanggo preheating, lan hawa adhem ing mezzanine bakal dibuwang kanthi otomatis liwat penghalang udara;
②Sawise interlayer tekan suhu sing wis ditemtokake, bukak tutup inlet udara saka kamar pot, ngenalake uap menyang kamar pot, lan hawa adhem ing kamar pot bakal dibuwang kanthi otomatis liwat arrester udara kamar pot;
③Nalika tekanan lan suhu ing kamar pot tekan tekanan sing ditemtokake, setel katup inlet udara supaya tetep tetep;
④ Kelangan suhu kanthi alami utawa artifisial nganti 60 ℃ sadurunge mbukak lawang kanggo njupuk barang kasebut. Aja nggunakake cara discharge uap cepet kanggo nyegah tiba-tiba tekanan mudhun, kasar nggodhok Cairan utawa jeblugan wadhah;
⑤ Nalika nggunakake program otomatis-sterilisasi uap tekanan sing dikontrol, sawise nyelehake barang lan nutup lawang kanthi kenceng, saklar sing cocog kudu dipencet miturut kategori barang supaya sterilisasi bisa ditindakake kanthi otomatis miturut prosedur sing dibutuhake. Sajrone sterilisasi, instrumen sing dipasang kudu digunakake kanggo ngrekam suhu lan wektu. Kanggo referensi ing mangsa ngarep, syarat operasi kudu strictly sesuai karo pandhuan pabrikan;
5. Suhu lan wektu sterilisasi
(1) Suhu sterilisasi sterilisasi panas garing yaiku 160 ℃, 1.5 ~ 2h.
(2) Suhu sterilisasi lan wektu sterilisasi uap tekanan
Metode sterilisasi intermiten
1. Metode sterilisasi:
Gunakake sterilisasi uap tanpa tekanan. Sawetara zat gampang dirusak kanthi sterilisasi uap tekanan dhuwur, mula cara iki bisa digunakake kanggo sterilisasi.
(1) Selehake barang sing bakal disterilisasi ing panci, tutup tutup ndhuwur, bukak saluran pembuangan, lan copot banyu sing isih ana ing pot.
(2) Nutup stopkontak saluran, bukak lawang mlebu udara, lan disinfeksi nganti 10 nganti 20 menit yen perlu.
(3) Sawise sterilisasi rampung, tutup lawang inlet udhara, copot barang-barang kasebut lan ngenteni nganti adhem nganti suhu kamar, lebokake ing inkubator 37 ° C sewengi, lan terus sterilisasi miturut metode kasebut ing dina sabanjure. Apa iki kaping telu kanggo entuk tujuan sterilisasi.
2. Cara nggunakake koagulator serum:
Nalika medium kultur ngemot bahan khusus kayata serum utawa endhog, panas sing dhuwur bakal ngrusak nutrisi. Mulane, suhu kurang bisa digunakake kanggo koagulasi serum lan entuk tujuan sterilisasi:
(1) Nalika nggunakake serum sterilized dening cara iki kanggo aliquot, operasi aseptik kudu strictly tindakaken, lan test tabung lan piring uga kudu sterilized sadurunge digunakake;
(2) Nggawe media kultur dadi lereng utawa lapisan dhuwur sing dibutuhake. Sawise nambahake banyu sing cukup, sambungake sumber daya, mundhakake suhu nganti 75 ~ 90 ° C sajrone jam siji banjur sterilake. Selehake ing inkubator 37 ° C ing wayah wengi, banjur sterilisasi kaping telu.
3. Godhok lan disinfect:
Sampeyan bisa nggunakake pot nggodhok utawa sterilizer nggodhok. Sawise banyu nggodhok, godhok nganti 5 nganti 15 menit. Sampeyan uga bisa nambah asam carbolic 2% ing banyu lan godhok nganti 5 menit. Tambah 0,02% formaldehida lan godhok ing 80 ° C suwene 60 menit kanggo entuk tujuan sterilisasi. Nanging, sterilisasi nggodhok bisa digayuh. Nalika nggunakake enhancers, manungsa waé kudu mbayar kanggo corrosiveness saka item.
4. Perawatan sterilisasi:
Sawise sterilisasi, barang wis steril ing kahanan normal. Padha kudu kasebut kanthi teliti, dipriksa lan diselehake nalika dijupuk metu saka sterilizer supaya re-kontaminasi;
(1) Njupuk metu item lan mriksa integritas packaging langsung. Yen ana karusakan utawa tampon dibusak, ora bisa digunakake minangka barang steril;
(2) Barang-barang sing digawa metu ora bisa digunakake minangka barang steril yen kemasane jelas direndhem ing banyu;
(3) Medium kultur utawa reagen kudu dipriksa manawa cocog karo warna utawa kahanan sawise sterilisasi. Sing ora nyukupi syarat kudu dibuwang;
(4) Kanggo wadhah mbukak-tutup, bolongan layar kudu ditutup nalika njupuk metu;
(5) Yen barang-barang sing dicopot tiba ing lemah, dilebokake ing papan sing ora resik, utawa diwarnai banyu, barang kasebut dianggep terkontaminasi lan ora bisa digunakake minangka barang sing resik;
(6) Item sterilized qualified dijupuk metu kudu disimpen ing kamar panyimpenan utawa bledug-kabinèt bukti, lan iku strictly dilarang kanggo nyampur karo item unsterilized;
(7) Kabeh barang sing mumpuni kudu ditandhani tanggal sterilisasi lan tanggal kadaluwarsa;
(8) Sawise saben batch pangolahan sterilisasi rampung, cathet jeneng, jumlah, suhu, wektu, lan operator produk sing disterilisasi.
Syarat kanggo perawatan limbah beracun lan bakteri
Peralatan lan budaya eksperimen sing digunakake ing eksperimen mikrobiologis ora kudu digawa metu saka laboratorium tanpa disinfeksi.
1. Bahan lan sampah sing wis kontaminasi kudu dilebokake ing wadhah sing ketat utawa kranjang kawat lan disimpen ing tengah-tengah ing lokasi sing wis ditemtokake nganti diautoklaf kanthi seragam.
2. Kultur sing terkontaminasi mikroorganisme kudu diautoklaf ing suhu 121 ° C suwene 30 menit.
3. Sawise digunakake, jerami sing wis kontaminasi kudu dilebokake ing larutan sabun kreol 5% utawa larutan asam karbol, direndhem paling sethithik 24 jam (cairan disinfektan kudu ora luwih murah tinimbang dhuwur rendhem), banjur disterilisasi kanthi tekanan dhuwur ing 121 ° C suwene 30 menit.
4. Cairan kanggo pewarnaan lan mbilas apusan umume bisa disiram langsung menyang saluran pembuangan. Cairan mbilas kanggo bakteri virulen kudu dikumbah ing beaker lan disterilisasi kanthi tekanan dhuwur sadurunge diwutahake menyang saluran pembuangan. Geser sing diwarnai dilebokake ing larutan sabun kresol 5%. Sawise direndhem ing banyu suwene 24 jam, godhok lan cuci. Geser utawa piring sing digunakake kanggo tes aglutinasi kudu diautoklaf banjur dicuci.
5. Sawise mecah kultur, langsung nyemprotake lan rendhem bagian sing kena kontaminasi nganggo larutan sabun kresol 5% utawa larutan asam karbol, rendhem nganti setengah jam banjur usap nganti resik.
Sandhangan kerja utawa sandhangan kerja sing kontaminasi, tutup, topeng, lan liya-liyane sing digunakake kanggo tes kekerasan kudu diselehake ing tas disinfeksi khusus lan disterilisasi kanthi tekanan dhuwur sadurunge dicuci.
Syarat preparation medium
Kualitas persiapan medium kultur bakal langsung mengaruhi pertumbuhan mikroorganisme, amarga macem-macem mikroorganisme duwe syarat nutrisi sing beda lan tujuan budaya sing beda. Syarat persiapan kanggo macem-macem media kultur yaiku:
1. Timbang bahan miturut rumus medium, banjur larut ing banyu suling. Kualitas reagen lan obat sing ditrapake kudu dipriksa sadurunge digunakake.
2. Pangukuran lan pangaturan pH: Pangukuran pH kudu ditindakake nalika medium kultur digawe adhem nganti suhu kamar, amarga ana bedane pH ing kahanan panas utawa adhem. Nalika pangukuran rampung, tambahake alkali utawa asam miturut jumlah sing diwilang lan aduk kanthi becik. Kudu dites maneh. Nilai pH medium kultur kudu akurat, yen ora bakal mengaruhi pertumbuhan mikroorganisme utawa mengaruhi asil observasi. Nanging, kudu dicathet yen sterilisasi tekanan dhuwur bisa nyebabake nyuda utawa nambah pH sawetara media kultur, mula ora dianjurake kanggo sterilisasi kanthi tekanan sing dhuwur banget utawa kaping pirang-pirang supaya ora mengaruhi kualitas media kultur. Indikator, sodium deoxycholate, agar, etc. umume Tambah sawise nyetel pH.
3. Medium kultur kudu tetep cetha kanggo nggampangake pengamatan pertumbuhan bakteri. Sawise medium kultur digawe panas lan digodhog, bisa disaring nganggo katun utawa flanel sing nyerep kanggo mbusak endapan. Yen perlu, bisa diklarifikasi nganggo putih endhog. Strip agar-agar sing digunakake kudu dikumbah lan dikeringake sadurunge. Sadurunge nggunakake, supaya ora mengaruhi transparansi amarga impurities ing agar.
4. Wadah wesi, tembaga lan liyane ora kena digunakake kanggo nahan media kultur. Iku luwih apik kanggo nggunakake wadhah kaca hard netral resik.
5. Sterilisasi medium budaya kudu ora mung entuk tujuan sterilisasi lengkap, nanging uga menehi perhatian supaya ora nyuda nilai nutrisi amarga pemanasan. Umumé, 121 ° C kanggo 15 menit wis cukup. Kanggo media kultur sing ngemot zat sing ora tahan panas dhuwur kayata gula lan serum, gelatin, lan liya-liyane, kudu disterilisasi kanthi suhu kurang utawa cara intermiten. Sawetara reagen sing ora bisa dipanasake, kayata kalium tellurite, kuning endhog, TTC, antibiotik, lan liya-liyane, kudu didinginake nganti 50 ° C sawise agar-agar dhasar diautoklaf banjur ditambahake;
6. Sawise saben kumpulan media kultur disiapake, tes pertumbuhan steril lan tes pertumbuhan galur sing diuji kudu ditindakake. Yen media kultur biokimia, gunakake galur bakteri standar kanggo inokulasi lan kultur, lan mirsani asil reaksi biokimia. Sampeyan kudu nuduhake reaksi normal. Media kultur ngirim ora disimpen dawa banget. Yen perlu, bisa disimpen ing kulkas 4 ° C.
7. Ing sapunika kathah jinis media kultur garing. Saben batch kudu nggunakake galur standar kanggo tes pertumbuhan utawa observasi reaksi biokimia. Macem-macem media kultur bisa digunakake mung sawise tes wutah saka galur sing cocog apik. Sing anyar dituku utawa garing sing disimpen suwe bisa digunakake. pH medium kultur uga kudu diukur nalika nyiapake, lan dosis lan cara kudu dituruti miturut pandhuan produk.
8. Reagen kimia, kahanan sterilisasi, asil tes pertumbuhan galur, lan personel produksi sing digunakake ing saben kumpulan media kultur sing disiapake kudu direkam kanggo dipriksa.
Koleksi sampel lan syarat pangolahan
1. Sampel inspeksi sing diklumpukake kudu wakil. Nalika sampling, bahan mentah, pangolahan, transportasi, cara panyimpenan lan kahanan kumpulan panganan, kahanan kesehatan lingkungan, lan liya-liyane kudu diselidiki kanthi rinci kanggo mriksa manawa ana sumber kontaminasi.
2. Miturut jinis lan jumlah panganan, jumlah lan cara sampling kudu ditindakake miturut syarat metode pemeriksaan standar.
3. Pay manungsa waé kanggo operasi aseptik nalika sampling, lan wadhah kudu sterilized supaya kontaminasi mikroba ing lingkungan. Wadhah kasebut ora kudu disterilisasi nganggo larutan sabun kreosal, sterilisasi nganggo klormethionin, alkohol lan disinfektan liyane, lan ora ngemot disinfektan utawa antibiotik kasebut. Supaya ora mateni mikroorganisme ing sampel, gunting, lading, lan sendok sing digunakake uga kudu disterilisasi sadurunge digunakake.
4. Sampel kudu dikirim menyang kamar inspeksi kanggo mriksa langsung sawise koleksi. Proses inspeksi umume ora ngluwihi 3 jam. Yen jarak dawa, bisa disimpen ing lingkungan 1 ~ 5 ℃. Yen perlu beku, kudu disimpen ing kahanan beku. Kirimake kanggo mriksa.
5. Sawise nampa sampel, kamar inspeksi bakal ndhaptar (jeneng sampel, unit kanggo inspeksi, jumlah, tanggal, nomer, lan sapiturute) lan mirsani tampilan sampel. Yen ana kahanan ing ngisor iki, pamriksan bisa ditolak:
(1) Sampel sing wis disterilisasi kanthi tekanan dhuwur khusus, nggodhok utawa cara liya bakal ilang pentinge kanggo makili panganan asli;
(2) Botol lan kanthong panganan wis dibukak, daging masak lan produke, daging unggas sing dimasak lan panganan liyane wis rusak lan ora lengkap, yaiku, bentuk panganan asli wis ilang (kajaba conto keracunan panganan);
(3) Jumlah sampling ora cukup kaya sing dibutuhake;
Kanggo conto sing diajukake kanggo inspeksi sing nyukupi syarat, kamar inspeksi kudu langsung nindakake inspeksi sawise ditampa. Yen kondhisi kasebut ora ditindakake, mula kudu disimpen ing kulkas 4 ° C, nyiapake nggawe kahanan ing wektu sing tepat, lan banjur mriksa.
6. Nalika mriksa conto, nindakake pangolahan sing cocog miturut sifat sing beda.
(1) Nalika inokulasi sampel Cairan, padha kudu sak tenane pipis lan inokulasi miturut jumlah.
(2) Kanggo conto sing padhet, gunakake piso sing disterilisasi kanggo ngethok 25g bagean sing beda-beda, lebokake ing 225mL saline sing disterilisasi utawa solusi liyane, remuk lan nyampur karo homogenizer, lan inokulasi miturut jumlahe.
(3) Botol lan tas panganan kudu dibukak kanthi sterilisasi, lan cara ing ndhuwur kudu dipilih miturut karakteristik sadurunge inokulasi.
Inspeksi sampel, ngrekam lan nglaporake syarat
1. Sawise nampa sampel, kamar inspeksi pisanan bakal nindakake inspeksi tampilan lan sakcepete nindakake inspeksi miturut cara pengawasan standar nasional. Sajrone proses inspeksi, operasi aseptik kudu ditindakake kanthi ati-ati, tanggung jawab, lan kanthi ketat kanggo nyegah.asil tes mikrobakontaminasi ing lingkungan.
2. Cara sing digunakake sajrone proses inspeksi sampel, fénoména lan asil sing kedadeyan, lan liya-liyane kudu ditulis ing cathetan tes tinulis minangka dhasar kanggo analisis lan penilaian asil. Cathetan kudu rinci, jelas, asli, objektif, lan ora kena diowahi utawa dipalsukan.
-
-
Syarat operasi aseptik:
1. Sampeyan kudu nganggo sandhangan kerja lan tutup kerja nalika inokulasi bakteri.
2. Nalika inokulasi conto panganan, sandhangan kerja khusus, tutup lan sandal kudu dianggo, sing kudu dilebokake ing ruang penyangga kamar steril lan digunakake sawise disinfeksi UV sadurunge kerja.
3. Nalika inokulasi conto panganan, wisuh tangan nganggo sabun sadurunge mlebu kamar steril, banjur usap tangan nganggo bal kapas alkohol 75%.
4. Sedotan, piring datar lan media kultur sing digunakake kanggo inokulasi kudu disterilisasi lan disterilisasi. Wadhah sing ora digunakake kudu ora ditinggalake sawise mbukak paket kasebut. Piranti logam kudu diautoklaf utawa diobong kaping telu nganggo alkohol 95% sadurunge digunakake.
5. Nalika njupuk jerami metu saka paket, pucuk jerami kudu ora ndemek bagian sing katon. Nalika nggunakake jerami kanggo inokulasi tabung uji utawa piring, pucuk jerami ora kena ndemek pinggir tabung uji utawa piring.
6. Inokulasi sampel lan transfer bakteri kudu ditindakake ing ngarep lampu alkohol. Nalika inokulasi bakteri utawa conto, jerami kudu disterilisasi kanthi nyala sawise njupuk metu saka paket lan mbukak stopper tabung uji.
7. Sadurunge inokulasi bakteri, kabeh kabel logam saka daur ulang inokulasi lan jarum kudu diobong nganggo nyala, lan yen perlu, sambungan antarane daur ulang, jarum lan rod kudu diobong. Loop inokulasi kanggo inokulasi bakteri tuberkulosis lan bakteri virulen kudu digodhog ing banyu sing nggodhok suwene 5 menit, banjur diobong nganggo geni.
8. Nalika nyedhot cairan bakteri utawa conto nganggo jerami, gunakake ujung karet sing cocog kanggo nyedhot, lan aja nyedhot langsung nganggo cangkeme.
Syarat panggunaan kamar steril:
1. Jendela-jendela sing ana ing njaba kamar steril kudu dilapisi kaca lan ditutup. Padha ora kudu dibukak ing bakal. Mesthine ana ruangan penyangga lan lawang geser sing cocog karo ukuran ruangan steril. Uga kudu ana jendhela cilik 0,5 ~ 0,7m2. Ing preparation kanggo maringaken item sawise ngetik kamar steril.
2. Kamar sing steril kudu tetep resik. Sawise kerja, kudu disinfeksi nganggo larutan sabun cresol 2% nganti 3%, permukaan kerja kudu diusap, lan barang sing ora ana gandhengane karo eksperimen ora kudu disimpen.
3. Lawang kamar steril kudu ditutup kanthi rapet sadurunge lan sawise digunakake, lan lampu ultraviolet kudu diuripake. Yen lampu ultraviolet sing digantung ing njero ruangan digunakake kanggo disinfeksi, lampu ultraviolet 30W dibutuhake. Jarake 1.0m, lan wektu iradiasi ora kurang saka 30 menit. Nalika nggunakake lampu ultraviolet, manungsa waé kudu mbayar kanggo operate langsung ing cahya ultraviolet supaya karusakan. Lampu kasebut kudu diusap kanthi alon-alon nganggo bal katun alkohol saben rong minggu kanggo mbusak bledug lan pelumas kanggo nyuda pengaruh penetrasi ultraviolet.
4. Nalika ngolah lan inokulasi spesimen panganan, ketik kamar steril kanggo operasi lan ora diijini mlebu utawa metu ing karsane. Yen item kudu diterusake, bisa dilewati liwat jendhela cilik.
5. Yen AC perlu dipasang ing kamar steril, kudu ana piranti nyaring.
Persyaratan Disinfeksi lan Sterilisasi
Gelas, piranti logam lan media kultur digunakake kanggotes mikrobiologis, budaya sing kontaminasi lan inokulasi, lan liya-liyane kudu disterilisasi sadurunge digunakake. Metode sterilisasi uap tekanan panas garing lan lembab.
1. Preparation sadurunge sterilization
(1) Kabeh barang sing kudu disterilisasi kudu dikumbah lan dikeringake dhisik. Barang kaca kayata sedotan lan piring sing rata kudu dibungkus kertas kanthi rapet. Yen tabung logam digunakake, bolongan ventilasi kudu dibukak.
(2) Bungkus stopper labu segi telu sing ngemot media kultur ing kertas, tutup tabung uji, lan tarik inti jarum suntik, lan bungkus nganggo gauze.
2. nginstal
(1) Sterilizer panas garing: Barang-barang kasebut ora kena rame lan ora bisa ndemek papat tembok kothak.
(2) Kompor uap tekanan dhuwur sing gedhe: Selehake barang sing wis disteril, bungkus kanthi kapisah, banjur lebokake langsung menyang silinder sterilisasi. Aja akeh barang.
3. Inspeksi peralatan
(1) Priksa manawa ngalih lawang iku fleksibel, apa ring karet rusak lan apa iku warata.
(2) Priksa manawa tolok tekanan tetep ing posisi nol nalika uap kesel, nutup lawang lan tutup, ventilasi uap utawa panas, lan priksa manawa ana bocor udara, apa kahanan sing ditandhani karo ukuran tekanan lan thermometer cocog, lan manawa saluran pipa diblokir.
(3) Kanggo sterilizers karo piranti kontrol program elektronik otomatis, program kasebut kudu dicenthang sadurunge digunakake kanggo ndeleng apa iku meets syarat kanggo sterilization.
4. Pangobatan sterilisasi
(1) Metode sterilisasi panas kering:
Cara iki cocok kanggo barang sing ora ngrusak, rusak, utawa nguap ing kahanan panas garing. Luwih umum digunakake kanggo sterilisasi barang kaca, produk logam, produk keramik, lsp.
①Instrumen lan piranti kudu dikumbah sadurunge garing-panggang kanggo nyegah rereget sing nempel ing permukaan ora dadi karbon.
② Sajrone sterilisasi, barang-barang kasebut ora kena rame, aja langsung ngubungi ngisor lan tembok kothak, lan ninggalake celah ing antarane barang.
③ Sajrone sterilisasi, tutup lawang kanthi kenceng, sambungake sumber daya, bukak bolongan knalpot sajrone udakara 30 menit kanggo mbusak hawa adhem ing sterilisasi, atur lampu indikator nalika suhu mundhak nganti 160 ° C, lan njaga nganti 1,5 nganti 2 jam.
④Sawise sterilisasi rampung utawa sajrone proses kenaikan suhu, lawang kudu dibukak ing ngisor 60 ° C.
(2) Langkah-langkah ing ngisor iki kudu ditindakake nalika nggunakake kompor tekanan portabel utawa sterilisasi uap tekanan vertikal:
① Tambah banyu 3L menyang awak utama kompor tekanan portabel, lan banyu 16L menyang kompor tekanan vertikal (jumlah banyu kudu diisi maneh nalika digunakake maneh, lan banyu kudu diganti yen dadi keruh);
② Kanggo kompor tekanan portabel, lebokake pipa knalpot ing tutup ndhuwur menyang tabung kothak ing tembok njero tong sterilisasi (sterilizer tanpa selang utawa sing nganggo selang corroded lan retak ora kudu digunakake);
③ Tutup tutup ndhuwur lan kenceng kanggo nyegah bocor udara; nyeleh sterilizer ing sumber geni kanggo dadi panas, nguripake daya saka kompor tekanan vertikal, lan mbukak tutup exhaust ing tutup ndhuwur supaya metu udhara (exhaust online kanggo 10 kanggo 15 menit sawise godhok banyu) );
④Tutup katup exhaust kanggo ngunggahake tekanan uap menyang syarat sing ditemtokake lan njaga kanggo wektu sing ditemtokake (gumantung saka sifat barang sing disterilisasi lan kahanan sing cocog);
⑤ Sawise wektu sing ditemtokake wis tekan, kanggo barang-barang sing kudu dikeringake, bukak katup knalpot kanggo ngeculake uap. Nalika tekanan bali menyang nol, adhem kanthi alami nganti 60 ° C banjur bukak tutup kanggo njupuk barang kasebut. Yen barang cair, aja mbukak tutup knalpot. Panci kudu dicopot saka sumber panas langsung lan diidini adhem kanthi alami nganti tekanan bali menyang nol lan suhu mudhun ing ngisor 60 ° C sadurunge mbukak tutup kanggo njupuk isi kanggo nyegah dekompresi dadakan saka cairan saka nggodhok utawa bledosan saka wadhah.
(3) Tindakake langkah-langkah ing ngisor iki kanggo nggunakake sterilizer uap kompor tekanan horisontal:
①Tutup lawang pot kanthi kenceng, bukak tutup inlet udara, ngenalake uap menyang mezzanine kanggo preheating, lan hawa adhem ing mezzanine bakal dibuwang kanthi otomatis liwat penghalang udara;
②Sawise interlayer tekan suhu sing wis ditemtokake, bukak tutup inlet udara saka kamar pot, ngenalake uap menyang kamar pot, lan hawa adhem ing kamar pot bakal dibuwang kanthi otomatis liwat arrester udara kamar pot;
③Nalika tekanan lan suhu ing kamar pot tekan tekanan sing ditemtokake, setel katup inlet udara supaya tetep tetep;
④ Kelangan suhu kanthi alami utawa artifisial nganti 60 ℃ sadurunge mbukak lawang kanggo njupuk barang kasebut. Aja nggunakake cara discharge uap cepet kanggo nyegah tiba-tiba tekanan mudhun, kasar nggodhok Cairan utawa jeblugan wadhah;
⑤ Nalika nggunakake program otomatis-sterilisasi uap tekanan sing dikontrol, sawise nyelehake barang lan nutup lawang kanthi kenceng, saklar sing cocog kudu dipencet miturut kategori barang supaya sterilisasi bisa ditindakake kanthi otomatis miturut prosedur sing dibutuhake. Sajrone sterilisasi, instrumen sing dipasang kudu digunakake kanggo ngrekam suhu lan wektu. Kanggo referensi ing mangsa ngarep, syarat operasi kudu strictly sesuai karo pandhuan pabrikan;
5. Suhu lan wektu sterilisasi
(1) Suhu sterilisasi sterilisasi panas garing yaiku 160 ℃, 1.5 ~ 2h.
(2) Suhu sterilisasi lan wektu sterilisasi uap tekanan
Metode sterilisasi intermiten
1. Metode sterilisasi:
Gunakake sterilisasi uap tanpa tekanan. Sawetara zat gampang dirusak kanthi sterilisasi uap tekanan dhuwur, mula cara iki bisa digunakake kanggo sterilisasi.
(1) Selehake barang sing bakal disterilisasi ing panci, tutup tutup ndhuwur, bukak saluran pembuangan, lan copot banyu sing isih ana ing pot.
(2) Nutup stopkontak saluran, bukak lawang mlebu udara, lan disinfeksi nganti 10 nganti 20 menit yen perlu.
(3) Sawise sterilisasi rampung, tutup lawang inlet udhara, copot barang-barang kasebut lan ngenteni nganti adhem nganti suhu kamar, lebokake ing inkubator 37 ° C sewengi, lan terus sterilisasi miturut metode kasebut ing dina sabanjure. Apa iki kaping telu kanggo entuk tujuan sterilisasi.
2. Cara nggunakake koagulator serum:
Nalika medium kultur ngemot bahan khusus kayata serum utawa endhog, panas sing dhuwur bakal ngrusak nutrisi. Mulane, suhu kurang bisa digunakake kanggo koagulasi serum lan entuk tujuan sterilisasi:
(1) Nalika nggunakake serum sterilized dening cara iki kanggo aliquot, operasi aseptik kudu strictly tindakaken, lan test tabung lan piring uga kudu sterilized sadurunge digunakake;
(2) Nggawe media kultur dadi lereng utawa lapisan dhuwur sing dibutuhake. Sawise nambahake banyu sing cukup, sambungake sumber daya, mundhakake suhu nganti 75 ~ 90 ° C sajrone jam siji banjur sterilake. Selehake ing inkubator 37 ° C ing wayah wengi, banjur sterilisasi kaping telu.
3. Godhok lan disinfect:
Sampeyan bisa nggunakake pot nggodhok utawa sterilizer nggodhok. Sawise banyu nggodhok, godhok nganti 5 nganti 15 menit. Sampeyan uga bisa nambah asam carbolic 2% ing banyu lan godhok nganti 5 menit. Tambah 0,02% formaldehida lan godhok ing 80 ° C suwene 60 menit kanggo entuk tujuan sterilisasi. Nanging, sterilisasi nggodhok bisa digayuh. Nalika nggunakake enhancers, manungsa waé kudu mbayar kanggo corrosiveness saka item.
4. Perawatan sterilisasi:
Sawise sterilisasi, barang wis steril ing kahanan normal. Padha kudu kasebut kanthi teliti, dipriksa lan diselehake nalika dijupuk metu saka sterilizer supaya re-kontaminasi;
(1) Njupuk metu item lan mriksa integritas packaging langsung. Yen ana karusakan utawa tampon dibusak, ora bisa digunakake minangka barang steril;
(2) Barang-barang sing digawa metu ora bisa digunakake minangka barang steril yen kemasane jelas direndhem ing banyu;
(3) Medium kultur utawa reagen kudu dipriksa manawa cocog karo warna utawa kahanan sawise sterilisasi. Sing ora nyukupi syarat kudu dibuwang;
(4) Kanggo wadhah mbukak-tutup, bolongan layar kudu ditutup nalika njupuk metu;
(5) Yen barang-barang sing dicopot tiba ing lemah, dilebokake ing papan sing ora resik, utawa diwarnai banyu, barang kasebut dianggep terkontaminasi lan ora bisa digunakake minangka barang sing resik;
(6) Item sterilized qualified dijupuk metu kudu disimpen ing kamar panyimpenan utawa bledug-kabinèt bukti, lan iku strictly dilarang kanggo nyampur karo item unsterilized;
(7) Kabeh barang sing mumpuni kudu ditandhani tanggal sterilisasi lan tanggal kadaluwarsa;
(8) Sawise saben batch pangolahan sterilisasi rampung, cathet jeneng, jumlah, suhu, wektu, lan operator produk sing disterilisasi.
Syarat kanggo perawatan limbah beracun lan bakteri
Peralatan lan budaya eksperimen sing digunakake ing eksperimen mikrobiologis ora kudu digawa metu saka laboratorium tanpa disinfeksi.
1. Bahan lan sampah sing wis kontaminasi kudu dilebokake ing wadhah sing ketat utawa kranjang kawat lan disimpen ing tengah-tengah ing lokasi sing wis ditemtokake nganti diautoklaf kanthi seragam.
2. Kultur sing terkontaminasi mikroorganisme kudu diautoklaf ing suhu 121 ° C suwene 30 menit.
3. Sawise digunakake, jerami sing wis kontaminasi kudu dilebokake ing larutan sabun kreol 5% utawa larutan asam karbol, direndhem paling sethithik 24 jam (cairan disinfektan kudu ora luwih murah tinimbang dhuwur rendhem), banjur disterilisasi kanthi tekanan dhuwur ing 121 ° C suwene 30 menit.
4. Cairan kanggo pewarnaan lan mbilas apusan umume bisa disiram langsung menyang saluran pembuangan. Cairan mbilas kanggo bakteri virulen kudu dikumbah ing beaker lan disterilisasi kanthi tekanan dhuwur sadurunge diwutahake menyang saluran pembuangan. Geser sing diwarnai dilebokake ing larutan sabun kresol 5%. Sawise direndhem ing banyu suwene 24 jam, godhok lan cuci. Geser utawa piring sing digunakake kanggo tes aglutinasi kudu diautoklaf banjur dicuci.
5. Sawise mecah kultur, langsung nyemprotake lan rendhem bagian sing kena kontaminasi nganggo larutan sabun kresol 5% utawa larutan asam karbol, rendhem nganti setengah jam banjur usap nganti resik.
Sandhangan kerja utawa sandhangan kerja sing kontaminasi, tutup, topeng, lan liya-liyane sing digunakake kanggo tes kekerasan kudu diselehake ing tas disinfeksi khusus lan disterilisasi kanthi tekanan dhuwur sadurunge dicuci.
Syarat preparation medium
Kualitas persiapan medium kultur bakal langsung mengaruhi pertumbuhan mikroorganisme, amarga macem-macem mikroorganisme duwe syarat nutrisi sing beda lan tujuan budaya sing beda. Syarat persiapan kanggo macem-macem media kultur yaiku:
1. Timbang bahan miturut rumus medium, banjur larut ing banyu suling. Kualitas reagen lan obat sing ditrapake kudu dipriksa sadurunge digunakake.
2. Pangukuran lan pangaturan pH: Pangukuran pH kudu ditindakake nalika medium kultur digawe adhem nganti suhu kamar, amarga ana bedane pH ing kahanan panas utawa adhem. Nalika pangukuran rampung, tambahake alkali utawa asam miturut jumlah sing diwilang lan aduk kanthi becik. Kudu dites maneh. Nilai pH medium kultur kudu akurat, yen ora bakal mengaruhi pertumbuhan mikroorganisme utawa mengaruhi asil observasi. Nanging, kudu dicathet yen sterilisasi tekanan dhuwur bisa nyebabake nyuda utawa nambah pH sawetara media kultur, mula ora dianjurake kanggo sterilisasi kanthi tekanan sing dhuwur banget utawa kaping pirang-pirang supaya ora mengaruhi kualitas media kultur. Indikator, sodium deoxycholate, agar, etc. umume Tambah sawise nyetel pH.
3. Medium kultur kudu tetep cetha kanggo nggampangake pengamatan pertumbuhan bakteri. Sawise medium kultur digawe panas lan digodhog, bisa disaring nganggo katun utawa flanel sing nyerep kanggo mbusak endapan. Yen perlu, bisa diklarifikasi nganggo putih endhog. Strip agar-agar sing digunakake kudu dikumbah lan dikeringake sadurunge. Sadurunge nggunakake, supaya ora mengaruhi transparansi amarga impurities ing agar.
4. Wadah wesi, tembaga lan liyane ora kena digunakake kanggo nahan media kultur. Iku luwih apik kanggo nggunakake wadhah kaca hard netral resik.
5. Sterilisasi medium budaya kudu ora mung entuk tujuan sterilisasi lengkap, nanging uga menehi perhatian supaya ora nyuda nilai nutrisi amarga pemanasan. Umumé, 121 ° C kanggo 15 menit wis cukup. Kanggo media kultur sing ngemot zat sing ora tahan panas dhuwur kayata gula lan serum, gelatin, lan liya-liyane, kudu disterilisasi kanthi suhu kurang utawa cara intermiten. Sawetara reagen sing ora bisa dipanasake, kayata kalium tellurite, kuning endhog, TTC, antibiotik, lan liya-liyane, kudu didinginake nganti 50 ° C sawise agar-agar dhasar diautoklaf banjur ditambahake;
6. Sawise saben kumpulan media kultur disiapake, tes pertumbuhan steril lan tes pertumbuhan galur sing diuji kudu ditindakake. Yen media kultur biokimia, gunakake galur bakteri standar kanggo inokulasi lan kultur, lan mirsani asil reaksi biokimia. Sampeyan kudu nuduhake reaksi normal. Media kultur ngirim ora disimpen dawa banget. Yen perlu, bisa disimpen ing kulkas 4 ° C.
7. Ing sapunika kathah jinis media kultur garing. Saben batch kudu nggunakake galur standar kanggo tes pertumbuhan utawa observasi reaksi biokimia. Macem-macem media kultur bisa digunakake mung sawise tes wutah saka galur sing cocog apik. Sing anyar dituku utawa garing sing disimpen suwe bisa digunakake. pH medium kultur uga kudu diukur nalika nyiapake, lan dosis lan cara kudu dituruti miturut pandhuan produk.
8. Reagen kimia, kahanan sterilisasi, asil tes pertumbuhan galur, lan personel produksi sing digunakake ing saben kumpulan media kultur sing disiapake kudu direkam kanggo dipriksa.
Koleksi sampel lan syarat pangolahan
1. Sampel inspeksi sing diklumpukake kudu wakil. Nalika sampling, bahan mentah, pangolahan, transportasi, cara panyimpenan lan kahanan kumpulan panganan, kahanan kesehatan lingkungan, lan liya-liyane kudu diselidiki kanthi rinci kanggo mriksa manawa ana sumber kontaminasi.
2. Miturut jinis lan jumlah panganan, jumlah lan cara sampling kudu ditindakake miturut syarat metode pemeriksaan standar.
3. Pay manungsa waé kanggo operasi aseptik nalika sampling, lan wadhah kudu sterilized supaya kontaminasi mikroba ing lingkungan. Wadhah kasebut ora kudu disterilisasi nganggo larutan sabun kreosal, sterilisasi nganggo klormethionin, alkohol lan disinfektan liyane, lan ora ngemot disinfektan utawa antibiotik kasebut. Supaya ora mateni mikroorganisme ing sampel, gunting, lading, lan sendok sing digunakake uga kudu disterilisasi sadurunge digunakake.
4. Sampel kudu dikirim menyang kamar inspeksi kanggo mriksa langsung sawise koleksi. Proses inspeksi umume ora ngluwihi 3 jam. Yen jarak dawa, bisa disimpen ing lingkungan 1 ~ 5 ℃. Yen perlu beku, kudu disimpen ing kahanan beku. Kirimake kanggo mriksa.
5. Sawise nampa sampel, kamar inspeksi bakal ndhaptar (jeneng sampel, unit kanggo inspeksi, jumlah, tanggal, nomer, lan sapiturute) lan mirsani tampilan sampel. Yen ana kahanan ing ngisor iki, pamriksan bisa ditolak:
(1) Sampel sing wis disterilisasi kanthi tekanan dhuwur khusus, nggodhok utawa cara liya bakal ilang pentinge kanggo makili panganan asli;
(2) Botol lan kanthong panganan wis dibukak, daging masak lan produke, daging unggas sing dimasak lan panganan liyane wis rusak lan ora lengkap, yaiku, bentuk panganan asli wis ilang (kajaba conto keracunan panganan);
(3) Jumlah sampling ora cukup kaya sing dibutuhake;
Kanggo conto sing diajukake kanggo inspeksi sing nyukupi syarat, kamar inspeksi kudu langsung nindakake inspeksi sawise ditampa. Yen kondhisi kasebut ora ditindakake, mula kudu disimpen ing kulkas 4 ° C, nyiapake nggawe kahanan ing wektu sing tepat, lan banjur mriksa.
6. Nalika mriksa conto, nindakake pangolahan sing cocog miturut sifat sing beda.
(1) Nalika inokulasi sampel Cairan, padha kudu sak tenane pipis lan inokulasi miturut jumlah.
(2) Kanggo conto sing padhet, gunakake piso sing disterilisasi kanggo ngethok 25g bagean sing beda-beda, lebokake ing 225mL saline sing disterilisasi utawa solusi liyane, remuk lan nyampur karo homogenizer, lan inokulasi miturut jumlahe.
(3) Botol lan tas panganan kudu dibukak kanthi sterilisasi, lan cara ing ndhuwur kudu dipilih miturut karakteristik sadurunge inokulasi.
Inspeksi sampel, ngrekam lan nglaporake syarat
1. Sawise nampa sampel, kamar inspeksi pisanan bakal nindakake inspeksi tampilan lan sakcepete nindakake inspeksi miturut cara pengawasan standar nasional. Sajrone proses inspeksi, operasi aseptik kudu ditindakake kanthi ati-ati, tanggung jawab, lan kanthi ketat kanggo nyegah.asil tes mikrobakontaminasi ing lingkungan.
2. Cara sing digunakake sajrone proses inspeksi sampel, fénoména lan asil sing kedadeyan, lan liya-liyane kudu ditulis ing cathetan tes tinulis minangka dhasar kanggo analisis lan penilaian asil. Cathetan kudu rinci, jelas, asli, objektif, lan ora kena diowahi utawa dipalsukan.
-
-
